牙本質(zhì)涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein，DSPP）包括牙本質(zhì)涎蛋白（dentin sialoprotein，DSP）和牙本質(zhì)磷蛋白（dentin phosphoprotein，DPP），屬于非膠原蛋白，因最早被發(fā)現(xiàn)是由成牙本質(zhì)細(xì)胞合成和分泌，一度被認(rèn)為是牙本質(zhì)的特異性蛋白而得名。近年來的研究表明，DSPP在其他組織和器官（如骨、軟骨、內(nèi)耳等）中也表達(dá)，只是表達(dá)水平相對較低而已，提示DSPP的功能可能并非局限于牙齒的發(fā)育和礦化。為進(jìn)一步探討DSPP在牙齒發(fā)育和礦化中的作用，并在此基礎(chǔ)上對DSPP的功能做更加全面的研究，本研究在DSPP功能研究的在體模型的構(gòu)建方面做了一些嘗試，核心內(nèi)容是建立DSPP的轉(zhuǎn)基因和基因敲除小鼠系。本文是全面研究規(guī)劃中的一部分，即DSP轉(zhuǎn)基因小鼠模型、DSPP四環(huán)素調(diào)控性轉(zhuǎn)基因小鼠體系、DSPP特異性啟動子調(diào)控LacZ轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立和DSPP基因敲除載體的構(gòu)建以及胚胎干細(xì)胞基因打靶。 一、DSP轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建 通過亞克隆將pcDNA3.1中的CMV啟動子替換為cβ-actin啟動子，構(gòu)建載體pcDNA3.1-C... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省211工程院校

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

DSP編碼序列的PCR結(jié)果

peDNA3一DSp的鑒定

符合要求(圖2.9)，均擴(kuò)增出p一actin片段也證明了這一點;來自腎、肺的RNA均擴(kuò)增出預(yù)計大小的片段，而平行對照和陰性對照均沒有(圖2.10)，表明轉(zhuǎn)基因的確在這些器官有表達(dá)。M腎肺對照—285—1851.okb0.skb實驗組1.okb〕.skb1.okb0.skb平行對照組p一actin組圖2.9總RNA電泳結(jié)果圖2.10RT-PCR結(jié)果2、PTREZ一DSPP將pTREZ一DSPP質(zhì)粒乃oI酶切線性化并經(jīng)純化和稀釋后作為顯微注射用的DNA。共注射657個受精卵，移植到28只受體鼠中，13只懷孕，共產(chǎn)下85只小鼠，分別編號(#1一#85)。(l)PCR鑒定將pTREZ一DSPP的序列與GenBank的小鼠基因組庫進(jìn)行BLAsT

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小鼠牙本質(zhì)涎磷蛋白成熟蛋白編碼區(qū)cDNA克隆與部分序列分析[J]. 郝建軍,汪平,麻孫愷,江衛(wèi)民,費儉,劉正.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1999(06)
[2]小鼠輸精管內(nèi)轉(zhuǎn)染法建立人組織型纖溶酶原激活劑（tPA）乳腺定位表達(dá)生物反應(yīng)器的研究[J]. 黃偉民,賴良學(xué),喬桂林,岳軍明,安靚,王凱,付殿國,殷震,李進(jìn).  實驗生物學(xué)報. 1999(03)
[3]精子介導(dǎo)外源DNA轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展[J]. 劉紅林,陳宜峰.  生物工程進(jìn)展. 1997(02)
[4]牙本質(zhì)磷蛋白[J]. 趙大為.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 1995(03)

博士論文
[1]遺傳性牙本質(zhì)發(fā)育不全Ⅱ型致病基因的定位與克隆[D]. 王英.第四軍醫(yī)大學(xué) 2001
[2]牙本質(zhì)涎磷蛋白在牙齒發(fā)育、礦化及牙髓損傷修復(fù)中作用的研究[D]. 張蓉.第四軍醫(yī)大學(xué) 2001



本文編號：3622042