人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克
發(fā)布時間:2022-01-06 07:48
牙本質(zhì)涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)屬于牙本質(zhì)非膠原蛋白,占牙本質(zhì)非膠原蛋白的5%~8%,因與骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)相似而得名。DSP富含谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、絲氨酸(Ser)和甘氨酸(Gly),由366個氨基酸組成,分子量約為53 000,含30%的碳水化合物和10%的涎酸,有6個潛在的糖基化位點和13個潛在的磷酸化位點。DSP的功能尚不清楚,考慮到DSP在成牙本質(zhì)細(xì)胞中有陽性表達,并在前成釉細(xì)胞中有一過性表達,推測DSP可作為成牙本質(zhì)細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞的標(biāo)記物,并可能在上皮和間充質(zhì)之間充當(dāng)信號分子,參與成牙本質(zhì)細(xì)胞分化。 一、人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克隆、表達、多抗制備和組織表達研究 克隆hDSP成熟肽編碼區(qū)基因片段并進行原核表達,用異硫氰酸胍一步法從人牙乳頭組織中抽提總RNA,再用Oligo(dt)作引物逆轉(zhuǎn)錄合成牙乳頭cDNA,然后用RT-PCR法,從cDNA中擴增出hDSP基因片段(約600bp),將所得基因片段插入pBluescript質(zhì)粒載體,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌XL1-Blue后,挑選陽性克隆,提取...
【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:100 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻回顧
第一部分 人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克隆、表達、多抗制備和組織表達研究
實驗一 人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克隆和序列分析
實驗二 人牙本質(zhì)涎蛋白在大腸桿菌中的表達和純化
實驗三 抗人牙本質(zhì)涎蛋白抗體的制備和組織表達研究
第二部分 人牙本質(zhì)涎蛋白全長基因表達載體的構(gòu)建和真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染
實驗一 人牙本質(zhì)涎蛋白真核表達載體的構(gòu)建
實驗二 用COS-7細(xì)胞表達人牙本質(zhì)涎蛋白基因
第三部分 人牙本質(zhì)涎蛋白的功能研究
實驗一 人牙本質(zhì)涎蛋白在人牙胚發(fā)育中的表達和意義
實驗二 人牙本質(zhì)涎蛋白對體外培養(yǎng)的人牙乳頭間充質(zhì)細(xì)胞增殖和堿性磷酸酶的影響
實驗三 人牙本質(zhì)涎蛋白對牙髓損傷修復(fù)影響的動物實驗研究
全文總結(jié)
致謝
簡歷、發(fā)表論文
附圖
本文編號:3572056
【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:100 頁
【學(xué)位級別】:博士
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文獻回顧
第一部分 人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克隆、表達、多抗制備和組織表達研究
實驗一 人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克隆和序列分析
實驗二 人牙本質(zhì)涎蛋白在大腸桿菌中的表達和純化
實驗三 抗人牙本質(zhì)涎蛋白抗體的制備和組織表達研究
第二部分 人牙本質(zhì)涎蛋白全長基因表達載體的構(gòu)建和真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染
實驗一 人牙本質(zhì)涎蛋白真核表達載體的構(gòu)建
實驗二 用COS-7細(xì)胞表達人牙本質(zhì)涎蛋白基因
第三部分 人牙本質(zhì)涎蛋白的功能研究
實驗一 人牙本質(zhì)涎蛋白在人牙胚發(fā)育中的表達和意義
實驗二 人牙本質(zhì)涎蛋白對體外培養(yǎng)的人牙乳頭間充質(zhì)細(xì)胞增殖和堿性磷酸酶的影響
實驗三 人牙本質(zhì)涎蛋白對牙髓損傷修復(fù)影響的動物實驗研究
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