本文關(guān)鍵詞：茶多酚對人牙槽骨成骨細(xì)胞增殖以及成骨細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過觀察不同濃度茶多酚(tea polyphenols,TP)對健康人牙槽骨成骨細(xì)胞(human alveolar osteoblasts,HAOB)增殖以及成骨細(xì)胞(osteoblasts,OB)相關(guān)基因Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(runt related transcription factor 2,RUNX2)、成骨細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子(osterix,OSX)、組織非特異性堿性磷酸酶(tissue-nonspecific alkaline phosphatase,TNAP)、Ⅰ型膠原蛋白α1鏈(collagen typeⅠalpha 1,COL1A1)、骨鈣素(osteocalcin,OCN)和骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)基因表達(dá)的影響,研究TP對健康HAOB增殖以及OB相關(guān)基因的影響,尋求一種簡單安全可靠的方法保持牙周組織健康,甚至修復(fù)已破壞的牙周組織,為進(jìn)一步研究TP對口腔疾病和骨代謝相關(guān)疾病的治療提供實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。方法:1.通過改良的預(yù)消化組織塊培養(yǎng)法體外培養(yǎng)健康HAOB,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,并采用堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)偶氮偶聯(lián)法和細(xì)胞茜素紅鈣染色法進(jìn)行細(xì)胞鑒定;2.采用細(xì)胞增殖—毒性檢測試劑盒(cell counting kit 8,CCK-8)檢測不同濃度TP對健康HAOB增殖的情況;3.采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ PCR)檢測OB相關(guān)基因RUNX2、OSX、TNAP、COL1A1、OCN和BMP2基因的表達(dá)情況。結(jié)果:1.應(yīng)用改良的預(yù)消化組織塊培養(yǎng)法體外培養(yǎng)健康HAOB,約5天左右可見HAOB從骨粒邊緣游出,多為三角形和梭形、體積較大、橢圓形單核、見1~3個核仁、無接觸抑制等形態(tài)特征符合OB;ALP偶氮偶聯(lián)法鑒定達(dá)90%的細(xì)胞陽性表達(dá);細(xì)胞茜素紅鈣染色法鑒定呈陽性。2.CCK-8結(jié)果表明:48 h時各濃度TP對HAOB均有明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用(P0.05),而且比24 h和72 h促進(jìn)效果更佳;24 h、48 h和72 h時均在100μg/ml TP作用下對細(xì)胞增殖的促進(jìn)效果更好(P0.05);24 h和72 h時在低濃度TP作用下促進(jìn)作用不顯著,甚至在102μg/ml TP影響下出現(xiàn)抑制作用(P0.05);在10-4μg/ml~100μg/ml TP濃度范圍內(nèi)呈濃度依賴性促進(jìn)細(xì)胞增殖。3.RUNX2的相對表達(dá)量與實驗第二部分促進(jìn)HAOB的增殖情況基本吻合;OSX、COL1A1、OCN和BMP2在72 h時1.0μg/ml TP組的相對表達(dá)量較24 h和48 h時有所增高;COL1A1和OCN相對表達(dá)量的趨勢類似。結(jié)論:采用改良的預(yù)消化組織塊培養(yǎng)法可以成功體外培養(yǎng)出HAOB;不同濃度TP對HAOB增殖的影響不同,在10-4μg/ml~100μg/ml(0.0001μg/ml~1μg/ml)TP濃度范圍內(nèi)促進(jìn)細(xì)胞增殖呈濃度依賴性,尤其100μg/ml(1μg/ml)TP比其他濃度的促進(jìn)細(xì)胞增殖作用更強(qiáng),但隨著濃度增加會出現(xiàn)抑制現(xiàn)象,并且在48 h時促進(jìn)作用比24 h和72 h時效果更佳;TP對OB的增殖可能與RUNX2的表達(dá)呈正相關(guān),而且72 h時在1.0μg/ml(1μg/ml)TP的影響下,TP可以促進(jìn)OSX、COL1A1、OCN和BMP2的表達(dá)增加。
【關(guān)鍵詞】：茶多酚 人牙槽骨成骨細(xì)胞 Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2 成骨細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子 骨形成蛋白2
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R781
【目錄】：

• 中英縮略詞對照表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 第一部分:人健康牙槽骨成骨細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定12-19
• 第二部分:茶多酚對人牙槽骨成骨細(xì)胞增殖的影響19-22
• 第三部分:茶多酚對成骨細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)的影響22-38
• 討論38-47
• 結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 綜述51-61
• 參考文獻(xiàn)57-61
• 致謝61-63
• 作者簡介63-64

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：326018