本文關(guān)鍵詞：流體剪切力對(duì)SD大鼠髁突與脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞作用的比較研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]比較研究流體剪切力作用下顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨、膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨來(lái)源成骨細(xì)胞的增殖與成骨能力。[方法]1、分別取SD大鼠乳鼠顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨組織、膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨組織進(jìn)行成骨細(xì)胞的培養(yǎng),兩種不同來(lái)源成骨細(xì)胞均采用改良Ⅰ型膠原酶消化法進(jìn)行原代培養(yǎng)、“差速貼壁法”進(jìn)行純化及傳代培養(yǎng),并在倒置顯微鏡下連續(xù)觀察二者的生長(zhǎng)狀況、形態(tài)學(xué)和生物學(xué)特性；2、通過(guò)HE染色、ALP染色和鈣結(jié)節(jié)茜素紅S染色,鑒定兩種不同來(lái)源的第四代成骨細(xì)胞；3、對(duì)鑒定后的第四代成骨細(xì)胞施加1h、12dynes/cm2的流體剪切力,之后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、CCK-8吸光度值及流式細(xì)胞周期的測(cè)定來(lái)比較兩種不同來(lái)源成骨細(xì)胞的增殖能力；4、加力結(jié)束后,通過(guò)Real time PCR測(cè)OPGmRNA表達(dá)量,比較兩種不同來(lái)源成骨細(xì)胞的成骨能力。[結(jié)果]1、兩種不同組織來(lái)源細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)無(wú)明顯差異,培養(yǎng)約24h后即可貼壁、伸展,貼壁時(shí)細(xì)胞體積均較小,呈星形、三角形及短梭形,胞核不明顯,隨著細(xì)胞生長(zhǎng)分化,細(xì)胞表面有突觸并相互之間連結(jié),彼此間融合后向多層生長(zhǎng)。傳代生長(zhǎng)至第四代時(shí),細(xì)胞胞體增大,形態(tài)以多角形、長(zhǎng)梭形為主,胞核明顯增大,同時(shí)細(xì)胞外基質(zhì)分泌增多,并包裹細(xì)胞,逐漸形成細(xì)胞團(tuán)塊,透光性降低,最終形成鈣化結(jié)節(jié),符合成骨細(xì)胞的生長(zhǎng)特性；2、兩種不同組織來(lái)源細(xì)胞經(jīng)HE染色、ALP染色、鈣結(jié)節(jié)茜素紅S染色均呈現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),鑒定全為成骨細(xì)胞；3、細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示,加力后顳下頜關(guān)節(jié)來(lái)源的成骨細(xì)胞數(shù)量顯著低于膝關(guān)節(jié)來(lái)源的成骨細(xì)胞數(shù)量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);CCK-8結(jié)果顯示,加力后顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨成骨細(xì)在接種后第1-2d數(shù)目較少,為細(xì)胞的潛伏期,第3-7d生長(zhǎng)曲線基本為線性曲線,表明細(xì)胞進(jìn)入快速增殖期,第8d達(dá)到峰值,此后增殖減慢,進(jìn)入平臺(tái)期及衰減期。膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞在接種后第1d數(shù)目較少,為細(xì)胞的潛伏期,第2-7d生長(zhǎng)曲線基本為線性曲線,表明細(xì)胞逐漸進(jìn)入快速增殖期,第8d達(dá)到峰值,此后增殖逐漸減慢,進(jìn)入平臺(tái)期及衰亡期；流式細(xì)胞增殖周期結(jié)果顯示,顳下頜關(guān)節(jié)來(lái)源的成骨細(xì)胞G0/G1期比例為58.662.85%,膝關(guān)節(jié)來(lái)源的成骨細(xì)胞G0/G1期比例為49.10±4.46%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；顳下頜關(guān)節(jié)來(lái)源的成骨細(xì)胞G2/S/M期比例為33.10±2.35%,膝關(guān)節(jié)來(lái)源的成骨細(xì)胞G2/S/M期比例為42.99±3.24%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；4、加力前同一時(shí)間,顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨成骨細(xì)胞OPGmRNA的表達(dá)量較膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；加力后同一時(shí)間,顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨成骨細(xì)胞OPGmRNA的表達(dá)量較膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；OPGmRNA表達(dá)量,無(wú)論是顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨成骨細(xì)胞還是膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞,加力后均比加力前增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。[結(jié)論]1、來(lái)源于SD大鼠乳鼠顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨、膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨的原代細(xì)胞,經(jīng)體外傳代培養(yǎng)后均可得到均一性較好、具有典型成骨細(xì)胞形態(tài)特征的成骨細(xì)胞,經(jīng)鑒定均為成骨細(xì)胞；2、本實(shí)驗(yàn)加力后細(xì)胞計(jì)數(shù)、CCK-8吸光度法及流式細(xì)胞周期結(jié)果顯示：顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨成骨細(xì)胞增殖能力低于膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞；3、本實(shí)驗(yàn)加力前后OPGmRNA定量檢測(cè)結(jié)果提示,顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨成骨細(xì)胞OPGmRNA的表達(dá)較膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞弱；4、一定的流體剪切力可以促進(jìn)顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨成骨細(xì)胞和膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞OPGmRNA的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：流體剪切力 成骨細(xì)胞 髁突 脛骨 軟骨下骨
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R782
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 引言11-14
• 第一部分 SD大鼠顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨下骨及膝關(guān)節(jié)脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定14-28
• 1 材料15-16
• 2 方法16-18
• 3 兩種不同組織來(lái)源成骨細(xì)胞的生物學(xué)特性分析與鑒定18-24
• 4 討論24-27
• 5 結(jié)論27-28
• 第二部分 流體剪切力對(duì)SD大鼠髁突和脛骨軟骨下骨成骨細(xì)胞增殖及成骨能力的比較28-46
• 1 材料28-30
• 2 方法30-34
• 3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析34-35
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-40
• 5 討論40-45
• 6 結(jié)論45-46
• 全文總結(jié)46-47
• 問(wèn)題及展望47-48
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 綜述51-62
• 參考文獻(xiàn)59-62
• 攻讀碩士期間發(fā)表的文章62-63
• 致謝63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 唐林;林珠;李永明;王華;;不同大小機(jī)械牽張力對(duì)成骨細(xì)胞增殖及堿性磷酸酶的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年06期

2 唐林;邵s

本文編號(hào)：312859