ASCs復(fù)合PRF促進(jìn)自體移植脂肪血管化的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-02 15:11
【背景】由于各種先天性畸形、創(chuàng)傷、腫瘤切除術(shù)等原因造成的軟組織缺損,是目前臨床上修復(fù)治療的一大難題之一;颊咦泽w的脂肪組織具有來源充足、取材方便且無任何免疫排斥反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),目前被認(rèn)為是修復(fù)各種軟組織缺損的比較好的自體填充材料。但目前常用的自體脂肪移植方法常導(dǎo)致移植脂肪出現(xiàn)一些吸收、萎縮、液化或壞死,充填的組織量難以精確掌握等缺點(diǎn)而嚴(yán)重影響修復(fù)效果,給廣大患者和醫(yī)生帶來極大的困擾。隨著各種研究技術(shù)的不斷發(fā)展,脂肪移植技術(shù)有了進(jìn)一步的發(fā)展。我們課題組前期研究發(fā)現(xiàn)以來源于脂肪組織的血管基質(zhì)成分復(fù)合自體的富血小板纖維蛋白進(jìn)行的脂肪移植,較顯著地提高了移植脂肪的存活率。但其相關(guān)機(jī)理機(jī)制不清,因此本實(shí)驗(yàn)研究以脂肪干細(xì)胞(adipose-derived stem cells, ASCs)和富血小板纖維蛋白(platelet-rich plasma,PRF)作為改善移植脂肪血管化微環(huán)境,探討ASCs和PRF在改善脂肪移植效果及其相關(guān)作用機(jī)理!灸康摹刻接慉SCs、PRF改善脂肪移植效果及其相關(guān)作用機(jī)理,為構(gòu)建新型脂肪組織工程復(fù)合材料提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)!痉椒ā1、從家兔脂肪組織中分離培養(yǎng)出脂肪干細(xì)胞,...
【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:93 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
第三代脂肪干細(xì)胞生長曲線
組呈陰性結(jié)果(附圖 3A)。誘導(dǎo):經(jīng)成骨誘導(dǎo)的 ASCs 呈重疊生長,細(xì)胞形態(tài)多邊形等,并分泌較多的細(xì)胞外基質(zhì),出現(xiàn)顆粒狀的延長,鈣鹽沉積慢慢形成大小不等的鈣結(jié)節(jié),進(jìn)后,經(jīng)誘導(dǎo)的細(xì)胞堿性磷酸酶染色見局部區(qū)域呈藍(lán) 周后經(jīng)茜素紅染色,鈣鹽沉積處見紅染的團(tuán)塊狀, ASC 分化為成骨細(xì)胞。而對照組呈陰性結(jié)果。(附干細(xì)胞流式分析胞表面抗原 CD 分子的流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示, 89.4%±3.5,而 CD31 呈陰性表達(dá),約 3.8%±1.2,表 的 CD 分子表型特征,對照組呈陰性結(jié)果。(圖 2)
比較各實(shí)驗(yàn)組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05,差異有顯著統(tǒng)放血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的含量變化SA 檢測結(jié)果可知,PRF 釋放 VEGF 呈現(xiàn)一定規(guī)律性內(nèi)持續(xù)釋放 VEGF,其特點(diǎn)呈現(xiàn)前 4h 釋放的速度較放緩,3~7d 仍持續(xù)釋放 VEGF,但速度明顯減慢,果相符[84]。同時(shí)結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同材質(zhì)的制備的 PRF 釋放 VEGF 特性存在一定影響[85],實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)玻保存溫度更利于 PRF 釋放 VEGF,提示這兩種因素定影響,見圖 4,具有統(tǒng)計(jì)意義,P<0.05。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]富血小板纖維蛋白體外釋放VEGF影響因素的探討[J]. 李龍,趙建輝,劉斌,令狐大科,劉彥普,梁麗華,楊勇,楊濤. 中國美容醫(yī)學(xué). 2012(03)
[2]大鼠BMSCs體外誘導(dǎo)培養(yǎng)后連接蛋白40及超極化激活環(huán)核苷酸門控陽離子通道4表達(dá)的初步研究[J]. 宋波,廖斌,于風(fēng)旭,夏增亮. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2012(02)
[3]可注射自體脂肪組織移植動(dòng)物模型的建立[J]. 譚新穎,張海霞,劉斌,劉彥普,李龍,徐小方,令狐大科,安然. 實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2011(02)
[4]自體基質(zhì)血管成分改善脂肪組織移植效果的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 譚新穎,張海霞,劉斌,劉彥普,徐小方,李龍,令狐大科,徐海燕. 中國美容醫(yī)學(xué). 2011(03)
[5]血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子基因轉(zhuǎn)染血管內(nèi)皮祖細(xì)胞移植提高移植脂肪存活率的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 易成剛,郭樹忠,張琳西,夏煒,韓巖,舒茂國,張輝,周慶紅. 中華外科雜志. 2005(11)
本文編號(hào):2953130
【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:93 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
第三代脂肪干細(xì)胞生長曲線
組呈陰性結(jié)果(附圖 3A)。誘導(dǎo):經(jīng)成骨誘導(dǎo)的 ASCs 呈重疊生長,細(xì)胞形態(tài)多邊形等,并分泌較多的細(xì)胞外基質(zhì),出現(xiàn)顆粒狀的延長,鈣鹽沉積慢慢形成大小不等的鈣結(jié)節(jié),進(jìn)后,經(jīng)誘導(dǎo)的細(xì)胞堿性磷酸酶染色見局部區(qū)域呈藍(lán) 周后經(jīng)茜素紅染色,鈣鹽沉積處見紅染的團(tuán)塊狀, ASC 分化為成骨細(xì)胞。而對照組呈陰性結(jié)果。(附干細(xì)胞流式分析胞表面抗原 CD 分子的流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示, 89.4%±3.5,而 CD31 呈陰性表達(dá),約 3.8%±1.2,表 的 CD 分子表型特征,對照組呈陰性結(jié)果。(圖 2)
比較各實(shí)驗(yàn)組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05,差異有顯著統(tǒng)放血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的含量變化SA 檢測結(jié)果可知,PRF 釋放 VEGF 呈現(xiàn)一定規(guī)律性內(nèi)持續(xù)釋放 VEGF,其特點(diǎn)呈現(xiàn)前 4h 釋放的速度較放緩,3~7d 仍持續(xù)釋放 VEGF,但速度明顯減慢,果相符[84]。同時(shí)結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同材質(zhì)的制備的 PRF 釋放 VEGF 特性存在一定影響[85],實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)玻保存溫度更利于 PRF 釋放 VEGF,提示這兩種因素定影響,見圖 4,具有統(tǒng)計(jì)意義,P<0.05。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]富血小板纖維蛋白體外釋放VEGF影響因素的探討[J]. 李龍,趙建輝,劉斌,令狐大科,劉彥普,梁麗華,楊勇,楊濤. 中國美容醫(yī)學(xué). 2012(03)
[2]大鼠BMSCs體外誘導(dǎo)培養(yǎng)后連接蛋白40及超極化激活環(huán)核苷酸門控陽離子通道4表達(dá)的初步研究[J]. 宋波,廖斌,于風(fēng)旭,夏增亮. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2012(02)
[3]可注射自體脂肪組織移植動(dòng)物模型的建立[J]. 譚新穎,張海霞,劉斌,劉彥普,李龍,徐小方,令狐大科,安然. 實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2011(02)
[4]自體基質(zhì)血管成分改善脂肪組織移植效果的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 譚新穎,張海霞,劉斌,劉彥普,徐小方,李龍,令狐大科,徐海燕. 中國美容醫(yī)學(xué). 2011(03)
[5]血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子基因轉(zhuǎn)染血管內(nèi)皮祖細(xì)胞移植提高移植脂肪存活率的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 易成剛,郭樹忠,張琳西,夏煒,韓巖,舒茂國,張輝,周慶紅. 中華外科雜志. 2005(11)
本文編號(hào):2953130
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