研究目的:臨床上以骨關(guān)節(jié)�。╫steoarthritis,OA）為代表的軟骨缺損疾病較為常見,嚴重降低患者的生活質(zhì)量。由于軟骨基質(zhì)中缺乏神經(jīng)、血管而不能完全再生,因此在軟骨缺損修復中,干細胞引導的組織再生引起越來越多的關(guān)注。牙周膜干細胞（Periodontal ligament stem cells,PDLSCs）具有多向分化潛能,且較臍帶沃頓間充質(zhì)干細胞（WJCMSCs）與骨髓間充質(zhì)干細胞（BMMSCs）相比具有更高的多向分化潛能。同時其來源廣泛,不涉及倫理問題,可作為理想的種子細胞,但牙周膜干細胞分化機制尚不明確,限制了其在組織再生中的應用。在干細胞分化過程中,表觀遺傳學調(diào)控起到重要作用。KDM6A是主要的H3K27去甲基化酶,有研究證實,KDM6A與干細胞多向分化有關(guān),KDM6A能促進間充質(zhì)干細胞（MSCs）成骨分化,抑制其成脂分化,然而,KDM6A在干細胞成軟骨分化中作用尚不明確。本課題旨在研究KDM6A對PDLSCs成軟骨分化的影響,并探究其對軟骨再生影響的機制,為牙源性干細胞介導的軟骨組織再生奠定基礎,促進牙源性干細胞在組織再生中的臨床轉(zhuǎn)化。研究內(nèi)容:本課題探討了KDM6A... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PDLSCs成骨、成軟骨和成脂向分化潛能檢測

細胞凋亡并無明顯差異；PDLSCs-WT 成軟骨分化培養(yǎng)組與正常培養(yǎng)組相比，細胞凋亡亦無明顯差異（圖2D）。圖 2 敲低 KDM6A 后 PDLSCs 細胞增殖活性和凋亡檢測。（A）：RT-PCR 結(jié)果表明與 PDLSC-WT 相比，PDLD-KDM6Ash 中 KDM6A 敲低效率。 （B）細胞

20圖 3 敲低 KDM6A 后 PDLSCs 成軟骨發(fā)生分化潛能檢測。 用成軟骨誘導基培養(yǎng) PDLSCs 一段時間。（A）：單層培養(yǎng)細胞成軟骨誘導分化 2 周后，用阿辛藍染液染色（a，b），微球培養(yǎng)細胞成軟骨誘導分化 3 周后用阿辛藍染和天狼猩紅染液（d）染色。 比例尺=100 μm。 （B）：單層培養(yǎng)細胞成軟導分化 2 周時蛋白多糖合成的定量檢測。 （C）：蛋白質(zhì)印跡法檢測 PDLS組和 PDLSC-KDM6Ash 組 SOX9 表達量，以 β-actin 為內(nèi)參，結(jié)果顯示 SO白質(zhì)表達量降低。 （D）：成軟骨誘導分化 3 周內(nèi)，RT-PCR 檢測 PDLSC組和 PDLSCs-KDM6Ash 組細胞中成軟骨標志基因，SOX9、Col2a1 和 ACA表達，以 β-actin 為內(nèi)參。計量資料采用單因素方差分析，所有的誤差線代表（n = 3）。 * P <0.05， ** P <0.01。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]組織工程修復髁突軟骨-骨復合體缺損研究進展[J]. 王飛宇,何冬梅,楊秀娟.  中國實用口腔科雜志. 2016(03)
[2]我國顳下頜關(guān)節(jié)病的研究與臨床進展[J]. 劉洪臣.  中華口腔醫(yī)學雜志. 2014 (07)

博士論文
[1]SOX9基因修飾骨髓間充質(zhì)干細胞修復關(guān)節(jié)軟骨損傷[D]. 楊自權(quán).華中科技大學 2008



本文編號：2945803