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糞腸球菌脂磷壁酸誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞表達(dá)TLR2及IL-1β的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-24 13:22
  目的研究糞腸球菌脂磷壁酸(Enterococcus faecalis Lipoteichoic acid, E. faecalis LTA)作用于人牙周膜成纖維細(xì)胞(Human periodontal ligament cells, HPDLCs)后,細(xì)胞表面TLR2表達(dá)及分泌IL-1β的改變,探討糞腸球菌對人牙周膜成纖維細(xì)胞表達(dá)炎癥相關(guān)因子的影響。方法以HPDLCs為受試對象,E. faecalis LTA為施加因素1.組織塊培養(yǎng)法對HPDLCs進(jìn)行體外培養(yǎng)、傳代及鑒定。2.流式細(xì)胞術(shù)檢測0.1、1、10μg/ml糞腸球菌脂磷壁酸(E. faecalis,LTA)作用于HPDLCs 24小時(shí)后,細(xì)胞表面Toll樣受體2(Toll like receptor 2, TLR2)表達(dá)水平的改變,并采用相應(yīng)濃度的大腸桿菌內(nèi)毒素(Escherichia coli Lipopolysaccharide, E.coli LPS)作為對照;3. ELISA檢測0.1、1、10μg/ml糞腸球菌脂磷壁酸作用HPDLCs12、24、48h后,IL-1β的分泌情況;用anti-TLR2單克隆抗體預(yù)處理HP... 

【文章來源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:45 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

糞腸球菌脂磷壁酸誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞表達(dá)TLR2及IL-1β的研究


波形絲蛋白染色陽性(xlo)圖2一3角蛋白染色陰性(x10)

倒置顯微鏡,波形絲蛋白,人牙周膜成纖維細(xì)胞,角蛋白


圖2一1倒置顯微鏡下第五代Ill, DLcs(x10)2.3.2人牙周膜成纖維細(xì)胞免疫組化鑒定細(xì)胞波形絲蛋白染色陽性,細(xì)胞胞漿棕黃色著色(圖2一2),角蛋白染色陰性,細(xì)胞胞漿未見棕黃色著色(圖2一3)。證明培養(yǎng)的細(xì)胞為來自中胚層的間充質(zhì)細(xì)胞。圖2一2波形絲蛋白染色陽性(xlo)圖2一3角蛋白染色陰性(x10)2.3.3LI陳潤激人牙周膜成纖維細(xì)胞表達(dá)TLRZ情況(表2一1,圖表2一1)正常HPDLCs的TLRZ陽性表達(dá)極低,口叭刺激24h后,TLRZ陽性細(xì)胞率明顯上升,與正常對照組及各濃度LPS組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;且隨IJ人濃度升高,幾R2陽性細(xì)胞率上升,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);各濃度LPS組刺激24h后

對照組


;彝 102103104 TLRZPE丁LRZPE圖2一4無關(guān)對照組TLRZ陽性細(xì)胞率圖2一5對照組TLRZ陽性細(xì)胞率LpSO.1LpSI00閃O幻尸O閃扣O盯工仍O(shè)nUO00囚0910戊尸O口一仍O(shè)nCOO寸01O」月勝州月號:右尹節(jié) 102103104TLRZPE下LRZPE圖2一6LpS(0.1陀/ml組)TLRZ陽性細(xì)胞率圖2一7LpS(IPg/ml組)TLRZ陽性細(xì)胞率

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Toll樣受體4對人牙周膜成纖維細(xì)胞表達(dá)p-IRAK1和p-IкB-α的影響[J]. 孫穎,束蓉,張明珠,李超倫.  上?谇会t(yī)學(xué). 2007(06)
[2]TLR4對人牙周膜細(xì)胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影響[J]. 孫穎,束蓉,張秀麗,張明珠.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(06)
[3]炎癥信號受體TLR4在大鼠正常牙髓和牙周組織中的分布及意義[J]. 蔣宏偉,凌均棨,任邦鵬.  臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2006(02)
[4]人正常及炎癥牙髓中炎癥信號受體TLR4表達(dá)的研究[J]. 蔣宏偉,凌均棨,任邦鵬.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2005(08)
[5]Toll樣受體與膿毒癥的研究進(jìn)展[J]. 李紅云,姚詠明,盛志勇.  中華燒傷雜志. 2002(05)

博士論文
[1]牙齦卟啉單胞菌脂多糖誘導(dǎo)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的信號通路研究及其蛋白酶的構(gòu)建和對炎癥慢性化的研究[D]. 張迪亞.浙江大學(xué) 2009



本文編號:2935727

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