目的：通過觀察檳榔堿對體外培養(yǎng)的人口腔粘膜成纖維細(xì)胞uPARAP表達(dá)的影響,探討檳榔堿在口腔粘膜下纖維性變發(fā)病過程中的作用機(jī)制。方法：取健康志愿者的口腔正常的粘膜,采用組織塊培養(yǎng)法獲得體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞,取第3-10代細(xì)胞作為實驗對象。取5個不同濃度組（Oμg/ml,5μg/ml,10μg/ml,25μg/ml,50μg/ml）的檳榔堿加入體外培養(yǎng)的正常牙齦成纖維細(xì)胞中,檢測下列指標(biāo)：1.采用四唑鹽比色試驗（MTT）檢測不同濃度檳榔堿不同時間對口腔粘膜成纖維細(xì)胞增殖的影響。2.采用免疫熒光技術(shù),檢測不同濃度檳榔堿作用口腔粘膜成纖維細(xì)胞后,uPARAP蛋白表達(dá)的改變。3.采用流式細(xì)胞技術(shù),檢測不同濃度檳榔堿作用口腔粘膜成纖維細(xì)胞后,uPARAP蛋白表達(dá)的改變。結(jié)果：1.不同濃度檳榔堿干預(yù)口腔粘膜成纖維細(xì)胞后,結(jié)果顯示：與對照組（即0μg/ml組）相比,5μg/ml組和10μg/ml組的增殖沒有明顯改變；而25μg/ml組和50μg/ml組則比對照組的增殖減慢,50μg/ml組增殖明顯減慢。2.不同濃度的檳榔堿干預(yù)24小時后,濃度為5μg/ml,10μg/ml的檳榔堿輕微地抑制了成纖維細(xì)... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

原代培養(yǎng)6d從組織塊中爬出的細(xì)胞(x200)

不規(guī)則三角形或扇形，有數(shù)個長短不一突起，胞體豐滿，胞漿均勻，胞核呈橢圓形，位于胞體中央。待細(xì)胞呈致密單層鋪滿培養(yǎng)瓶底時，細(xì)胞排列成漩渦狀、放射狀或柵欄狀，可見細(xì)胞分裂相。(見附圖2一1，2一2)細(xì)胞胞漿抗角蛋白抗體染色陰性，波形絲蛋白抗體染色陽性，證實細(xì)胞為來自中胚層的成纖維細(xì)胞，可以用于進(jìn)一步實驗。L二圖2一1，原代培養(yǎng)6d從組織塊中爬出的細(xì)胞(x200)圖2一2，原代培養(yǎng)14d后成纖維細(xì)胞形成的放射狀外觀(“200)2:3檳榔堿對口腔粘膜成纖維細(xì)胞增殖的影響不同濃度不同作用時間的檳榔堿干預(yù)口腔粘膜成纖維細(xì)胞后，結(jié)果顯示:在低濃度的檳榔堿干預(yù)組 (5pg/m1組， 10pg/ml組)中口腔粘膜成纖維細(xì)胞增殖與對照組(即 0pg/ml組)差別不大，而高濃度的檳榔堿干預(yù)組(25協(xié)g/ml組

為方差不齊，故采用非參數(shù)構(gòu)uskal一 walli:HTest檢驗，P=0.009<0.05，可認(rèn)為濃度為25p創(chuàng)ml，50p歲司檳榔堿作用于口腔粘膜成纖維細(xì)胞后，相對于空白組，uPARAp的表達(dá)有差異。(附表2一3，2一4，附圖2一4)表2一3，不同濃度的檳榔堿對證叭幾護(hù)的表達(dá)的影響檳檳榔堿濃度度 opg/mlll5pg/耐 耐 10pg/mlll25pg/mlll50pg/mllluuuPAR為衛(wèi)陽陽71.99士0.0044468.80士0.0011167.81士0.0122257.89士0.0088856.05士0.00555性性率 率 率 率 率 率 率表2一4，不同濃度的檳榔堿對upARAp的表達(dá)的影響(%)(n=3，萬士s)9

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]檳榔堿對口腔頰黏膜成纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖活性的影響[J]. 李明,彭解英,龐丹琳,尹曉敏.  臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2009(02)
[2]檳榔堿誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡Caspase-3活性的研究[J]. 彭解英,尹曉敏,高義軍,方廠云,龐丹琳,夏宇.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2005(04)
[3]口腔粘膜下纖維性變患者角朊細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平變化[J]. 馮云枝,凌天牖.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2000(01)



本文編號：2935723