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siRNA抑制人舌癌細胞VEGF表達對MMP-2,-9及TIMP-1,-2蛋白表達的影響

發(fā)布時間:2020-12-15 16:53
  目的利用小干擾RNA (small interfering RNA, siRNA)抑制人舌癌Tca8113細胞血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表達,觀察其對培養(yǎng)細胞和移植瘤基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs) -2, -9及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(tissue inhibitors of metalloproteinases, TIMPs) -1, -2蛋白表達的影響。方法以穩(wěn)定轉(zhuǎn)染攜帶VEGF-siRNA真核表達載體的人舌癌Tca8113細胞(VEGF-siRNA1、VEGF-siRNA2)為實驗組,以轉(zhuǎn)染空載體的人舌癌Tca8113細胞及未轉(zhuǎn)染的人舌癌Tca8113細胞為實驗對照組和空白對照組。20只裸鼠隨機分為4組,每組5只,將各組細胞分別接種于裸鼠皮下。47天后,剝離瘤體。用免疫細胞化學(xué)法及免疫組織化學(xué)法分別測定各組培養(yǎng)細胞和移植瘤VEGF, MMP-2, -9及TIMP-1, -2的蛋白表達;并用明膠酶譜法(gelatin zymography)及蛋白免疫印跡法(west... 

【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

siRNA抑制人舌癌細胞VEGF表達對MMP-2,-9及TIMP-1,-2蛋白表達的影響


MMP-2,-9及TIMP-1,-2免疫細胞化學(xué)染色(SP,×400)

移植瘤,HE染色


移植瘤組織經(jīng)常規(guī) HE 染色后,鏡下見瘤體細胞中有異常核漿比例及血管竇,并可見核分裂相,證實為腫瘤組織(如圖 2-1 所示)。圖2-1 移植瘤組織HE染色(HE,×100)Fig. 2-1 representative H&E staining features of the xenograft tumor (H&E, ×100 magnification)2.3.2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果1.各組移植瘤 VEGF 表達比較 VEGF 表達的陽性顆粒主要位于腫瘤細胞的胞漿內(nèi), 少數(shù)腫瘤血管內(nèi)皮細胞胞漿內(nèi)也可見陽性顆粒(如圖 2-10示)。實驗組的 VEGF 表達較兩對照組明顯下降,VEGF-siRNA1 與實驗對照組和空白對照組相比較平均陽性表達率降低,有顯著差異(P=0.00),平

移植瘤,免疫組化染色


29圖2-10 各移植瘤VEGF免疫組化染色結(jié)果(SP, ×400)Fig. 2-10 representative immunohistochemistry staining features of VEGF (SP, ×400 magnification)(1: VEGF-siRNA1 group; 2: VEGF-siRNA2 group; 3: experimental control; 4: negative control)圖2-11 各移植瘤MMP-2免疫組化染色結(jié)果(SP, ×400)Fig. 2-11 representative immunohistochemistry staining features of MMP-2 (SP, ×400 magnification)(1: VEGF-siRNA1 group; 2: VEGF-siRNA2 group; 3: exper


本文編號:2918580

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