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富血小板纖維蛋白對牙周膜前體細(xì)胞成骨分化的影響及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2020-12-14 06:18
  口腔多個臨床學(xué)科均面臨著牙槽骨骨量不足的問題。牙周病、創(chuàng)傷和腫瘤等因素導(dǎo)致的牙槽骨缺損,嚴(yán)重降低了患者的咀嚼功能,削弱了美觀效果,也使臨床修復(fù)工作的難度陡增。因此只有徹底解決骨量不足的問題,才能最終提高患者的生活質(zhì)量。目前,臨床常用的骨修復(fù)材料多為替代性成骨,而非真正的再生骨,很難完全滿足臨床修復(fù)及患者的需求。近年來的研究顯示,應(yīng)用組織工程手段,可以逐步實現(xiàn)牙槽骨的再生重建。牙周膜前體細(xì)胞(Periodontal Ligament Progenitor Cells,PDLPCs)為牙周來源的表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞表面抗原CD44、CD146、STRO-1等的專能成體干細(xì)胞,具有牙周組織分化特異性,是牙周組織即牙周膜、牙骨質(zhì)和牙槽骨損傷后自我修復(fù)的原料細(xì)胞,且較容易分離獲得。理想的種子細(xì)胞仍需要理想的細(xì)胞支架。再生醫(yī)學(xué)的核心是用載體模擬特殊的組織微環(huán)境,使種子細(xì)胞和載體形成類似活體組織的整體。目前的研究傾向于使用自體材料作為細(xì)胞支架,而富血小板纖維蛋白(Platelet-Rich Fibrin,PRF)因其絕對的自體源性而成為了理想的自體細(xì)胞支架材料之一。為了驗證PRF是否為理想的PDLPCs... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:113 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

富血小板纖維蛋白對牙周膜前體細(xì)胞成骨分化的影響及機(jī)制研究


PDLPCs的形態(tài)及生長曲線

表面抗原


圖 2.2 表面抗原的識別鑒定Fig.2.2 Identificiation of surface markersA. PI 染料作為活細(xì)胞標(biāo)志; B. MSC 表面標(biāo)志表達(dá)情況A. PI was used as alive cells marker; B. The exression of MSC surface markers2.3.3 PDLPCs 的成骨誘導(dǎo)分化(1)ALP 活性:成骨誘導(dǎo)條件下,3天時,可見誘導(dǎo)組和非誘導(dǎo)組均無顯著的 ALP 表達(dá)。7天時,成骨誘導(dǎo)組細(xì)胞的 ALP 表達(dá)顯著增強(qiáng),對照組 ALP 水平未見明顯變化,與第 3天水平無顯著性差別。14 天時,PDLPCs 的誘導(dǎo)組與 3 天及 7 天組相比較,ALP 表達(dá)水平均顯著增強(qiáng)。此時,對照組即未經(jīng)成骨誘導(dǎo)組,ALP 亦有微弱表達(dá)(圖 2.3A)。在第 14天,誘導(dǎo)組的 ALP 水平與 3 天和 7 天時相比,達(dá)到最高,誘導(dǎo)組亦顯著高于非誘導(dǎo)組約 15倍(P<0.001)(圖 2.3B)。

均勻分布,培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)條件,結(jié)節(jié)形成


圖 2.3 不同培養(yǎng)條件下 ALP 活性Fig.2.3 ALP activity in different conditionsA. PDLPCs 在不同時間點誘導(dǎo)條件和非誘導(dǎo)條件下 ALP 的表達(dá)水平;B. 柱狀圖表示 PDLPCs同時間點誘導(dǎo)條件和非誘導(dǎo)條件下 ALP 的表達(dá)水平A. ALP level of PDLPCs at different time points; B. ALP level at different time points in difconditions(2)基質(zhì)礦化:經(jīng)過 21天培養(yǎng),成骨誘導(dǎo)分化組的 PDLPCs的培養(yǎng)中可見鈣結(jié)節(jié)形成,茜素紅 S可見彌漫性紅染,即鈣化結(jié)節(jié)較均勻分布于細(xì)胞外基質(zhì)中,基質(zhì)礦化程度高(圖2.4B)照組即無誘導(dǎo)組,茜素紅S染色無著色,即無顯著鈣結(jié)節(jié)形成,無基質(zhì)礦化(圖2.4A)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Platelet-rich fibrin-induced bone marrow mesenchymal stem cell differentiation into osteoblast-like cells and neural cells[J]. Qi Li1,Yajun Geng2,Lei Lu3,Tingting Yang1,Mingrui Zhang1,Yanmin Zhou11Implant Center,Stomatology Hospital of Jilin University,Changchun 130021,Jilin Province,China2Department of General Surgery,First Hospital of Jilin University,Changchun 130021,Jilin Province,China 3Department of Neurology,Harrison International Peace Hospital,Hengshui 053000,Hebei Province,China.  Neural Regeneration Research. 2011(31)
[2]富血小板纖維蛋白修復(fù)兔顱骨骨缺損的實驗研究[J]. 李琦,周延民,翟靜捷,王宇,張明銳.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2011(07)
[3]人牙周膜干細(xì)胞礦化誘導(dǎo)分化的實驗研究[J]. 高秦,劉宏偉,金巖,聶鑫,劉源.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2007(04)
[4]人牙周膜干細(xì)胞的體外分離、純化及初步鑒定[J]. 高秦,劉宏偉,金巖,聶鑫,劉源.  實用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2006(01)



本文編號:2915973

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