牙齒的發(fā)生和發(fā)育是由上皮和間充質(zhì)在一系列信號分子組成的信號網(wǎng)絡(luò)的精確調(diào)控下完成的。因此牙齒的生物性再生至少需要兩種細(xì)胞:上皮源性細(xì)胞和間充質(zhì)源性細(xì)胞。目前牙源性間充質(zhì)細(xì)胞的替代研究進展較快而且取得了可喜的成績,例如成體的牙髓干細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞均被證明具有形成牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體的功能。在尋找牙源性上皮細(xì)胞替代細(xì)胞方面雖然也進行了一些研究,如誘導(dǎo)胚胎時期口腔粘膜上皮或皮膚表皮以及成體骨髓來源的細(xì)胞向成釉細(xì)胞轉(zhuǎn)化,但這些研究多建立在應(yīng)用胚胎早期組織基礎(chǔ)之上,以出生后組織為來源尋找替代細(xì)胞的研究進展有限。尋找能夠向牙源性上皮方向分化的成體或出生后組織來源的細(xì)胞對解決牙齒再生研究中上皮源性種子細(xì)胞來源的瓶頸問題具有重要意義。本研究著重探討出生后1d仔鼠的皮膚來源的表皮細(xì)胞向牙源性上皮方向分化以及參與牙齒發(fā)育的能力。本課題主要進行了以下幾方面的研究:1.牙乳頭間充質(zhì)細(xì)胞對皮膚表皮細(xì)胞牙向分化的體外誘導(dǎo)研究（1）皮膚表皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)與鑒定以出生1d的SD仔鼠背部皮膚為組織來源進行表皮細(xì)胞培養(yǎng)。采用胞外基質(zhì)的黏附法對原代培養(yǎng)的表皮細(xì)胞進行篩選,對篩選細(xì)胞的增殖能力、細(xì)胞表型以及細(xì)胞周期的特性進行分... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

DPMCs體外礦化誘導(dǎo)VonKossa染色結(jié)果大體觀察

圖 1.25 RT-PCR 分析結(jié)果3 討論牙源性間充質(zhì)細(xì)胞在發(fā)育生物學(xué)上是牙胞。在牙齒發(fā)育過程中，牙乳頭間充質(zhì)在多下，其表層的細(xì)胞分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞，并的牙本質(zhì)。而中心的細(xì)胞逐漸發(fā)生終末分化的牙髓組織[107,108]。牙胚間充質(zhì)細(xì)胞的體外培和再生研究具有重要意義。44

說如何提供一個誘導(dǎo)環(huán)境能夠盡可能多的包含細(xì)胞分化所是目前對細(xì)胞進行分化誘導(dǎo)的關(guān)鍵。目前研究干細(xì)胞多項分化一般都采用單因子或多因子相結(jié)，例如，牙髓干細(xì)胞的成牙本質(zhì)細(xì)胞方向分化，既可以用T，也可以采用TGF-β與bFGF聯(lián)合應(yīng)用[114]，還可以采用地賽β-磷酸甘油共同作用而實現(xiàn)[115]。但不管采用上述何種方式難完全模擬體內(nèi)牙齒發(fā)育當(dāng)時的多因素協(xié)同作用的復(fù)雜過成牙誘導(dǎo)方案成為實現(xiàn)非牙源性上皮牙向分化的前提。因基礎(chǔ)上，研究者不斷探索新的誘導(dǎo)模式，即采用細(xì)胞間的圖 1.29 體外誘導(dǎo) 6d 后 RT-PCR 結(jié)果分析ane 1:成釉器 Lane 2:誘導(dǎo)后表皮細(xì)胞 Lane 3:未誘導(dǎo)表皮細(xì)胞


本文編號：2895260