牙齒的發(fā)生和發(fā)育是由上皮和間充質(zhì)在一系列信號分子組成的信號網(wǎng)絡(luò)的精確調(diào)控下完成的。因此牙齒的生物性再生至少需要兩種細胞:上皮源性細胞和間充質(zhì)源性細胞。目前牙源性間充質(zhì)細胞的替代研究進展較快而且取得了可喜的成績,例如成體的牙髓干細胞、骨髓基質(zhì)細胞均被證明具有形成牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體的功能。在尋找牙源性上皮細胞替代細胞方面雖然也進行了一些研究,如誘導(dǎo)胚胎時期口腔粘膜上皮或皮膚表皮以及成體骨髓來源的細胞向成釉細胞轉(zhuǎn)化,但這些研究多建立在應(yīng)用胚胎早期組織基礎(chǔ)之上,以出生后組織為來源尋找替代細胞的研究進展有限。尋找能夠向牙源性上皮方向分化的成體或出生后組織來源的細胞對解決牙齒再生研究中上皮源性種子細胞來源的瓶頸問題具有重要意義。本研究著重探討出生后1d仔鼠的皮膚來源的表皮細胞向牙源性上皮方向分化以及參與牙齒發(fā)育的能力。本課題主要進行了以下幾方面的研究:1.牙乳頭間充質(zhì)細胞對皮膚表皮細胞牙向分化的體外誘導(dǎo)研究（1）皮膚表皮細胞的體外培養(yǎng)與鑒定以出生1d的SD仔鼠背部皮膚為組織來源進行表皮細胞培養(yǎng)。采用胞外基質(zhì)的黏附法對原代培養(yǎng)的表皮細胞進行篩選,對篩選細胞的增殖能力、細胞表型以及細胞周期的特性進行分... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

DPMCs體外礦化誘導(dǎo)VonKossa染色結(jié)果大體觀察

圖 1.25 RT-PCR 分析結(jié)果3 討論牙源性間充質(zhì)細胞在發(fā)育生物學上是牙胞。在牙齒發(fā)育過程中，牙乳頭間充質(zhì)在多下，其表層的細胞分化為成牙本質(zhì)細胞，并的牙本質(zhì)。而中心的細胞逐漸發(fā)生終末分化的牙髓組織[107,108]。牙胚間充質(zhì)細胞的體外培和再生研究具有重要意義。44

說如何提供一個誘導(dǎo)環(huán)境能夠盡可能多的包含細胞分化所是目前對細胞進行分化誘導(dǎo)的關(guān)鍵。目前研究干細胞多項分化一般都采用單因子或多因子相結(jié)，例如，牙髓干細胞的成牙本質(zhì)細胞方向分化，既可以用T，也可以采用TGF-β與bFGF聯(lián)合應(yīng)用[114]，還可以采用地賽β-磷酸甘油共同作用而實現(xiàn)[115]。但不管采用上述何種方式難完全模擬體內(nèi)牙齒發(fā)育當時的多因素協(xié)同作用的復(fù)雜過成牙誘導(dǎo)方案成為實現(xiàn)非牙源性上皮牙向分化的前提。因基礎(chǔ)上，研究者不斷探索新的誘導(dǎo)模式，即采用細胞間的圖 1.29 體外誘導(dǎo) 6d 后 RT-PCR 結(jié)果分析ane 1:成釉器 Lane 2:誘導(dǎo)后表皮細胞 Lane 3:未誘導(dǎo)表皮細胞


本文編號：2895260