發(fā)布時間：2020-11-21 15:02

　　 目的：制備殼聚糖溫敏凝膠及富含血小板血漿(PRP),將二者以不同比率共混后觀察其微觀結構；觀察殼聚糖溫敏凝膠/PRP共混物的浸提液對犬骨髓基質(zhì)細胞(BMSCs)增殖、分化的作用。 方法：1、制備殼聚糖凝膠,從全血中提取PRP并對其進行血小板計數(shù)。2、將殼聚糖溫敏凝膠及PRP按不同體積比共混后分為5組：A組,單純殼聚糖溫敏凝膠；B組,殼聚糖溫敏凝膠：PRP=2∶1；C組,殼聚糖溫敏凝膠：PRP=1∶1；D組,殼聚糖溫敏凝膠：PRP=1∶2；E組,單純PRP。將各組實驗材料冷凍干燥后觀察其大體及微觀結構。3、根據(jù)以上分組制備殼聚糖溫敏凝膠/PRP共混物的浸提液。4、體外分離培養(yǎng)犬BMSCs,通過MTT法及堿性磷酸酶試劑盒檢測以上各組浸提液對第3代犬BMSCs增殖、分化的影響。 結果：1、殼聚糖/p-GP溶液在37℃孵箱內(nèi)8～10min形成凝膠；對本方法制備的PRP進行血小板計數(shù),其濃度約為濃縮前的8倍。2、隨著加入PRP比率的增大,殼聚糖溫敏凝膠的孔徑亦逐漸增大：A組為50umm左右；B組為30～60um；C組為100～200um；D組為200～300um；E組為200～500um。3、成功地分離、培養(yǎng)出犬BMSCs,體外生長良好,培養(yǎng)三代后的犬BMSCs生長更趨活躍。B,C,D,E組浸提液與A組比較均可促進BMSCs的增殖及堿性磷酸酶水平的表達。 結論：PRP可以增大殼聚糖溫敏凝膠的孔徑；C組和D組的孔徑已達到較為理想的組織工程支架材料的要求。殼聚糖溫敏凝膠共混PRP后使PRP獲得緩釋功能,進而促進犬BMSCs增殖和分化,殼聚糖溫敏凝膠/PRP共混復合物有望成為促進牙周組織再生的生物支架材料。
【學位單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R780.2
【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一部分 殼聚糖溫敏凝膠的合成及富含血小板血漿的制備
    材料和方法
    結果
    討論
第二部分 殼聚糖溫敏凝膠/PRP共混物的結構觀察
    材料和方法
    結果
    討論
第三部分 殼聚糖溫敏凝膠負載PRP后對BMSCs作用
    材料和方法
    結果
    討論
全文總結
參考文獻
綜述
    綜述的參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
致謝

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本文編號：2893181