發(fā)布時間：2016-12-17 00:27

  本文關(guān)鍵詞：炎性環(huán)境下熱休克蛋白27在人牙齦成纖維細胞損傷愈合中的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東大學(xué)》 2015年

炎性環(huán)境下熱休克蛋白27在人牙齦成纖維細胞損傷愈合中的表達

周芹  

【摘要】：背景與目的：種植體周圍炎是種植體失敗的一個主要原因。種植體周圍炎,即慢性進展性邊緣炎癥,被認為是一種炎癥性反應(yīng),它導(dǎo)致種植體周圍支撐骨組織的功能性吸收而致種植體失敗。種植體周圍炎病變部位主要表現(xiàn)為牙齦組織對種植體表面的附著能力較健康組織較低甚至無附著能力,局部IL-1β、LPS等炎癥因子的水平較健康部位升高,且隨著病變加重有升高的趨勢。對于種植體周圍炎的研究尚處在通過發(fā)現(xiàn)、檢驗種植體周圍齦溝液中的炎癥因子水平從而提供臨床診斷指標(biāo)的階段,就其發(fā)生和發(fā)展過程中的細胞通路及關(guān)鍵蛋白研究尚無報道。本實驗將觀察熱休克蛋白27(Heat Shock Protein 27, Hsp27)在白細胞介素-1β(IL-1)Ⅱ脂多糖(LPS)和香煙提取物(CSE)誘導(dǎo)的人牙齦成纖維細胞(HGFs)損傷過程中的表達,重點在于觀察Hsp27與人牙齦組織損傷愈合是否存在相關(guān)性,為后期研究并揭示Hsp27在種植體周圍炎中的作用機制提供實驗基礎(chǔ)。方法：(1)人牙齦成纖維細胞原代培養(yǎng)；(2)免疫組化鑒別細胞來源；(3)MTT確定最佳IL-1β、LPS和CSE的刺激濃度和刺激時間；(4)通過單層細胞劃痕愈合實驗觀察各種刺激物對牙齦成纖維細胞的遷移能力；(5)取第3代牙齦成纖維細胞接種于六孔板中,選用最佳濃度的IL-1β、 LPS和CSE,刺激人牙齦成纖維細胞細胞,提取細胞總蛋白,western bolting檢測Hsp27的表達變化。結(jié)果：(1)免疫組化實驗結(jié)果顯示原代培養(yǎng)的細胞抗角蛋白抗體陰性表達,抗波形絲蛋白抗體陽性表達,胞漿呈棕黃染色,胞核藍染。證明為中胚層組織來源而不是上皮來源,是人牙齦成纖維細胞的來源。(2) IL-1β, LPS和CSE干預(yù)后,隨IL-1β,LPS和CSE刺激濃度的增高HGFs的遷移能力顯著降低。(3)IL-1p干預(yù)后,HGFs中Hsp70,90表達量無明顯變化,Hsp27表達量顯著上調(diào),并隨IL-1p刺激濃度的增高而增高的趨勢。(4)Hsp27在正常HGFs中呈弱陽性表達,LPS干預(yù)后的HGFs中Hsp27呈強陽性表達,且隨刺激濃度的增高表達量有逐漸增高的趨勢。(5)CSE干預(yù)后,Hsp27在HGFs中呈強陽性表達,且隨刺激濃度的增高表達量有逐漸增高的趨勢。結(jié)論：熱休克蛋白在IL-1β、LPS、CSE誘導(dǎo)的HGFs損傷過程中的表達情況不同,其中Hsp27在IL-1β、LPS、CSE介導(dǎo)的HGFs炎癥損傷中表達升高,且Hsp27表達量與HGFs體外愈合能力呈負相關(guān)關(guān)系；Hsp27在上皮炎癥損傷愈合中可能起到關(guān)鍵性作用,但具體作用機制還有待進一步的研究。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R783
【目錄】：

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