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電離輻射對(duì)大鼠頜下腺TNFα、FGF2和鉀通道的影響

發(fā)布時(shí)間:2016-11-04 20:52

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《吉林大學(xué)》 2016年

電離輻射對(duì)大鼠頜下腺TNFα、FGF2和鉀通道的影響

朱紅華  

【摘要】:目的:放療是頜面部惡性腫瘤最有效的治療方法之一,常不可避免的引起頜面部其它組織不可逆性輻射損傷,其中最常見(jiàn)的是電離輻射引起的口干癥。雖然已有大量研究,但照射后唾液腺功能降低的分子機(jī)制目前仍然不十分清楚。TNFα和FGF2均屬于促細(xì)胞有絲分裂分子,與多種組織纖維化相關(guān),而電離輻射引起的唾液腺損傷亦表現(xiàn)出唾液腺腺泡結(jié)構(gòu)的破壞,其正常結(jié)構(gòu)被膠原纖維等替代,從而出現(xiàn)唾液腺間質(zhì)纖維化,腺體萎縮、體積減小等現(xiàn)象,進(jìn)而導(dǎo)致唾液腺分泌功能降低,甚至喪失。腺泡細(xì)胞分泌唾液與Cl-、Ca2+、K+、Na+等各種離子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān),其中K+的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)扮演了重要的角色。在腺泡細(xì)胞膜上,主要存在大電導(dǎo)鈣激活型鉀通道(Large-Conductance Ca2+-Activated K+Channels,BK)和中電導(dǎo)鈣激活型鉀通道(Intermediate-Conductance Ca2+-Activated K+Channels,IK1)兩種K+通道。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)兩個(gè)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)一通過(guò)研究電離輻射對(duì)大鼠頜下腺中TNFα和FGF2的表達(dá)的影響,探討照射后引起的唾液腺纖維化的可能機(jī)制,實(shí)驗(yàn)二通過(guò)研究電離輻射對(duì)大鼠頜下腺腺泡細(xì)胞膜上BK通道和IK通道開(kāi)放的影響,探討照射后唾液腺分泌功能降低的可能分子機(jī)制。方法:雄性Wistar大鼠,體重180-220g,隨機(jī)分為對(duì)照組和照射組,一次性15Gy X射線頜下腺區(qū)局部照射,對(duì)照組只麻醉不照射。照射后3d和30d處死大鼠取頜下腺,4%多聚甲醛固定、石蠟包埋、切片,HE染色觀察照射后大鼠頜下腺組織學(xué)變化,免疫組化染色觀察照射后頜下腺TNFα和FGF2表達(dá)的變化。照射后3d、15d和40d處死大鼠取頜下腺,膠原蛋白酶消化,從每只大鼠頜下腺消化液中挑選1個(gè)狀態(tài)好的細(xì)胞,全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)研究大鼠頜下腺腺泡細(xì)胞膜上BK和IK1通道電流的變化。結(jié)果:(1)照射后3d和30d大鼠頜下腺TNFα和FGF2表達(dá)均升高,30d高于3d(P0.05,n=5)。(2)在+80m V時(shí),相比對(duì)照組,照射后3d大鼠頜下腺腺泡細(xì)胞膜上BK通道電流密度沒(méi)有顯著性差異(P0.05,n=6),照射后15d大鼠頜下腺腺泡細(xì)胞膜上BK通道電流密度減少9.7%(P0.05,n=6),照射后40d大鼠頜下腺腺泡細(xì)胞膜上BK通道電流密度減少13.8%(P0.01,n=6)。(3)在+80m V時(shí),相比對(duì)照組,照射后3d大鼠頜下腺腺泡細(xì)胞膜上IK1通道電流密度沒(méi)有顯著性差異(P0.05,n=6),照射后15d大鼠頜下腺腺泡細(xì)胞膜上IK1通道電流密度減少12.8%(P0.05,n=6),照射后40d大鼠頜下腺腺泡細(xì)胞膜上IK1通道電流密度減少17.1%(P0.01,n=6)。結(jié)論:(1)照射后大鼠唾液腺分泌功能降低可能與TNFα和FGF2高表達(dá)所致的腺體纖維化有關(guān)。(2)電離輻射引起的唾液腺分泌功能降低可能與照射后唾液腺腺泡細(xì)胞膜上BK和IK1通道電流密度的減少有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R739.8;R730.55
【目錄】:

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本文編號(hào):164722

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