本文關(guān)鍵詞：上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合過程中的作用及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《安徽醫(yī)科大學(xué)》 2015年

上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合過程中的作用及意義

孔苗苗  

【摘要】：背景與目的:口腔是人體攝食的重要通道,口腔黏膜是口腔內(nèi)的一層濕潤襯里,具有屏障保護(hù)功能及感覺功能�？趦�(nèi)黏膜損傷既有因頜面部位置暴露導(dǎo)致外傷頻發(fā)誘發(fā)的口內(nèi)黏膜損傷,亦有病因尚不明確的口腔潰瘍。不論損傷原因?yàn)楹?口腔黏膜的損傷都會(huì)影響人類咀嚼、吞咽、語言活動(dòng),對患者生活、社交甚至心理都會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重影響。臨床上為此就診的病人也屢見不鮮。然而,目前臨床常用的促黏膜愈合藥物主要以抗感染藥物為主,少見真正的促愈合藥物。因此,尋找一種有效的、安全的、便捷的療法促黏膜愈合,會(huì)為患者的生活質(zhì)量帶來極大的提高。越來越多的研究闡明EMT與皮膚創(chuàng)傷愈合的關(guān)系密切,但在口腔黏膜創(chuàng)傷愈合方面的作用卻需要進(jìn)一步探索。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)過程涉及多種信號分子、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及轉(zhuǎn)錄因子,一旦黏膜愈合與EMT的關(guān)系被進(jìn)一步揭示,將為促黏膜愈合的研究提供新的思路及更多切入點(diǎn)。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是在誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化方面研究最多的一種生長因子,本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)觀察大鼠舌黏膜創(chuàng)傷過程中的EMT現(xiàn)象,并初步探討TGF-β1對大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合及體外培養(yǎng)口腔黏膜上皮細(xì)胞的作用及其與EMT的關(guān)系。方法:實(shí)驗(yàn)一:取7-8周齡Wistar大鼠,于舌背部黏膜處作一直徑為3mm的圓形缺損模型,分別于術(shù)后0d,1d,2d,3d,4d及創(chuàng)傷完全愈合的第10d處死,HE染色觀察黏膜愈合過程,同時(shí)采用免疫組織熒光法檢測EMT相關(guān)蛋白E-鈣黏蛋白(E-cadherin,E-cad),波形蛋白(Vimentin)和成纖維細(xì)胞特異性蛋白-1(Fibroblast specific proteins,FSP1)在舌黏膜創(chuàng)傷愈合過程中的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)二:動(dòng)物模型制備同上,術(shù)后創(chuàng)傷局部給藥,大鼠隨機(jī)分為TGF-β1凝膠組,空白凝膠組,空白對照組。術(shù)后0d,2d,4d,6d,8d從每組大鼠中隨機(jī)選擇8只處死,分析比較各組間傷口愈合率差異,間接免疫熒光法觀測上述EMT相關(guān)蛋白。體外培養(yǎng)人類口腔永生化上皮細(xì)胞,劃痕實(shí)驗(yàn)?zāi)M體外創(chuàng)傷觀察比較TGF-β1對劃痕愈合速度的影響。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一:與0d、1d相比,術(shù)后2d-4d大鼠舌黏膜創(chuàng)傷邊緣E-cad表達(dá)減少,而間質(zhì)細(xì)胞特異蛋白Vimentin,FSP1開始在上皮基底層表達(dá)。術(shù)后第10d舌黏膜創(chuàng)傷完全愈合,E-cad表達(dá)量與0d相近,上皮基底層仍可見少量Vimentin,FSP1表達(dá)。實(shí)驗(yàn)二:術(shù)后第4d各組間愈合情況無差異;術(shù)后第8d實(shí)驗(yàn)組TGF-β1凝膠組愈合快于凝膠組和空白對照組(P0.05);實(shí)驗(yàn)組與對照組各時(shí)間點(diǎn),創(chuàng)傷邊緣區(qū)上皮基底層內(nèi)表達(dá)間質(zhì)細(xì)胞表型Vimentin和FSP1細(xì)胞數(shù)目未見明顯差別;細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)可見TGF-β1刺激后的HIOEC細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)間質(zhì)樣改變,與空白組比較,劃痕實(shí)驗(yàn)中愈合速度在TGF-β1組更快,其中TGF-β1組在96h已基本愈合。結(jié)論:大鼠舌背部黏膜創(chuàng)傷愈合過程中發(fā)生了EMT現(xiàn)象;TGF-β1能夠使體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞遷移能力增強(qiáng),對大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合有促進(jìn)作用,然而其作用是否與EMT的發(fā)生有關(guān)需要進(jìn)一步研究證明。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R781.57
【目錄】：

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本文編號：163653