目的探討β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)對(duì)成神經(jīng)瘤細(xì)胞SH-SY5Y軸突生長(zhǎng)狀態(tài)、細(xì)胞微管結(jié)構(gòu)及T514位點(diǎn)磷酸化腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白2(CRMP2)表達(dá)的影響。方法用全反式維甲酸誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞,細(xì)胞外給予聚集態(tài)Aβ1-42致細(xì)胞損傷;用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率;用細(xì)胞化學(xué)法測(cè)量細(xì)胞軸突長(zhǎng)度;免疫熒光法觀察細(xì)胞微管結(jié)構(gòu)及T514位點(diǎn)磷酸化CRMP2的分布;Westen blot分析T514位點(diǎn)磷酸化CRMP2在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。結(jié)果 0.1與1μmol/L聚集態(tài)Aβ1-42使誘導(dǎo)后SH-SY5Y細(xì)胞存活率顯著減低(P<0.01);以1μmol/L Aβ1-42處理后,細(xì)胞軸突長(zhǎng)度縮短(P<0.05)。0.1和1μmol/L Aβ1-42處理后細(xì)胞微管結(jié)構(gòu)模糊,T514位點(diǎn)磷酸化CRMP2在細(xì)胞內(nèi)熒光分布面積擴(kuò)大(P<0.05),強(qiáng)度增加(P<0.01);用0.1和1μmol/L聚集態(tài)Aβ1-42處理后細(xì)胞內(nèi)T514位點(diǎn)磷酸化CRMP2表達(dá)量顯著增加(P<0.01)。結(jié)論 Aβ1-42可增加SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)T514位點(diǎn)磷酸化CRMP2的表達(dá),損害微...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 藥品與試劑
    1.2 Aβ1-42寡聚體的制備
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)和處理
    1.4 MTT法測(cè)細(xì)胞存活率
    1.5 軸突生長(zhǎng)狀態(tài)的測(cè)量
    1.6 直接免疫熒光與間接免疫熒光雙標(biāo)記染色
    1.7 Westen blot檢測(cè)T514位點(diǎn)磷酸化CRMP2的表達(dá)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 Aβ1-42對(duì)細(xì)胞存活率的影響
    2.2 Aβ1-42對(duì)細(xì)胞軸突生長(zhǎng)狀態(tài)的影響
    2.3 免疫熒光分析Aβ1-42對(duì)細(xì)胞微管結(jié)構(gòu)及細(xì)胞磷酸化CRMP2表達(dá)的影響
    2.4 Westen blot分析細(xì)胞內(nèi)T514位點(diǎn)磷酸化CRMP2的表達(dá)
3 討論



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