阿爾茨海默病(AD)是一種慢性神經(jīng)退行性疾病,主要以老年人發(fā)病為主,通常由瞻妄、發(fā)呆等輕型癥狀逐漸發(fā)展為認(rèn)知功能障礙,甚至生活不能自理的重癥癥狀,是癡呆癥的主要原因之一。由于該病神經(jīng)元損傷后無法修復(fù),因此很多研究者致力于尋找一種能夠代替受損神經(jīng)元的方法。神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)是一種具有多向分化能力的潛能細(xì)胞,且具有自我更新,增殖和遷移的功能,并能分化發(fā)育為成熟的神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞以及少突膠質(zhì)細(xì)胞,雖然NSCs在腦內(nèi)的數(shù)量相對(duì)較少,但其分化的神經(jīng)細(xì)胞卻能影響大腦的整體生理機(jī)能,產(chǎn)生的神經(jīng)元可形成新的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)并可調(diào)節(jié)現(xiàn)有神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的活性,這為AD治療提供了新的臨床策略。Midkine(MK)是一種肝素結(jié)合的分泌性生長(zhǎng)因子,因在胚胎發(fā)育中期高表達(dá)而得名,是一種能促進(jìn)正常組織穩(wěn)態(tài)和疾病發(fā)展的多重功效因子。MK在人類神經(jīng)系統(tǒng)和多種惡性腫瘤中高表達(dá),可介導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)、存活、轉(zhuǎn)移、遷移和血管生成等過程。然而MK對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖以及分化的調(diào)控機(jī)制,還處于研究空白階段。本研究擬探討MK對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用及其生物學(xué)機(jī)制,并嘗試?yán)肕K改善AD模型小鼠的神經(jīng)干細(xì)胞數(shù)目及認(rèn)知功能,為修復(fù)或替代AD中受損...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1神經(jīng)球中的神經(jīng)干細(xì)胞同時(shí)高度表達(dá)nestin和MK，兩者具有明確的細(xì)胞共定位

16圖1神經(jīng)球中的神經(jīng)干細(xì)胞同時(shí)高度表達(dá)nestin和MK，兩者具有明確的細(xì)胞共定位。Bar＝25μm。二、MK在分化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元細(xì)胞中不表達(dá)將連續(xù)傳代培養(yǎng)三周后的神經(jīng)球懸浮液，離心消化后，用吸管輕輕吹打至其分散為單個(gè)細(xì)胞，將其接種到涂有PLL的培養(yǎng)板中。五天后可看到神....

圖2免疫熒光染色觀察NSCs體外分化過程中MK的表達(dá)狀況

17圖2免疫熒光染色觀察NSCs體外分化過程中MK的表達(dá)狀況。(a)為分化實(shí)驗(yàn)第一天，綠色為nestin，紅色為MK。Bar＝100μm(b)為分化實(shí)驗(yàn)第五天，綠色為MAP2、GFAP，紅色為MK。Bar＝25μm。三、MK是維持神經(jīng)干細(xì)胞生長(zhǎng)的必需生長(zhǎng)因子為了研究MK對(duì)神經(jīng)干細(xì)....

圖4在體外培養(yǎng)體系中添加MK可明顯促進(jìn)nestin陽性細(xì)胞的增殖

19圖4在體外培養(yǎng)體系中添加MK可明顯促進(jìn)nestin陽性細(xì)胞的增殖。Bar＝100μm。五、MK通過激活A(yù)kt磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進(jìn)NSCs的體外增殖水平200ng/mlMK處理24小時(shí)后，BrdU陽性、nestin陽性的干細(xì)胞細(xì)胞數(shù)目數(shù)量明顯增加，P<0.05，圖5。說明MK....

圖5MK通過激活A(yù)kt磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進(jìn)NSCs的體外增殖

20圖5MK通過激活A(yù)kt磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進(jìn)NSCs的體外增殖。免疫印跡法分析Akt的磷酸化，給與200ng/mlMK24小時(shí)后，NSCs的pAkt/Akt的值升高，P<0.05，與對(duì)照組細(xì)胞相比，給與20ng/mlMK組的pAkt/Akt的值沒有明顯改變，P>0.05。六、....

本文編號(hào)：3950639