阿爾茨海默病(AD)是一種慢性神經退行性疾病,主要以老年人發(fā)病為主,通常由瞻妄、發(fā)呆等輕型癥狀逐漸發(fā)展為認知功能障礙,甚至生活不能自理的重癥癥狀,是癡呆癥的主要原因之一。由于該病神經元損傷后無法修復,因此很多研究者致力于尋找一種能夠代替受損神經元的方法。神經干細胞(NSCs)是一種具有多向分化能力的潛能細胞,且具有自我更新,增殖和遷移的功能,并能分化發(fā)育為成熟的神經元、星形膠質細胞以及少突膠質細胞,雖然NSCs在腦內的數量相對較少,但其分化的神經細胞卻能影響大腦的整體生理機能,產生的神經元可形成新的神經網絡并可調節(jié)現有神經網絡的活性,這為AD治療提供了新的臨床策略。Midkine(MK)是一種肝素結合的分泌性生長因子,因在胚胎發(fā)育中期高表達而得名,是一種能促進正常組織穩(wěn)態(tài)和疾病發(fā)展的多重功效因子。MK在人類神經系統(tǒng)和多種惡性腫瘤中高表達,可介導細胞生長、存活、轉移、遷移和血管生成等過程。然而MK對神經干細胞增殖以及分化的調控機制,還處于研究空白階段。本研究擬探討MK對神經干細胞增殖的促進作用及其生物學機制,并嘗試利用MK改善AD模型小鼠的神經干細胞數目及認知功能,為修復或替代AD中受損...

【文章頁數】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1神經球中的神經干細胞同時高度表達nestin和MK，兩者具有明確的細胞共定位

16圖1神經球中的神經干細胞同時高度表達nestin和MK，兩者具有明確的細胞共定位。Bar＝25μm。二、MK在分化的神經膠質細胞和神經元細胞中不表達將連續(xù)傳代培養(yǎng)三周后的神經球懸浮液，離心消化后，用吸管輕輕吹打至其分散為單個細胞，將其接種到涂有PLL的培養(yǎng)板中。五天后可看到神....

圖2免疫熒光染色觀察NSCs體外分化過程中MK的表達狀況

17圖2免疫熒光染色觀察NSCs體外分化過程中MK的表達狀況。(a)為分化實驗第一天，綠色為nestin，紅色為MK。Bar＝100μm(b)為分化實驗第五天，綠色為MAP2、GFAP，紅色為MK。Bar＝25μm。三、MK是維持神經干細胞生長的必需生長因子為了研究MK對神經干細....

圖4在體外培養(yǎng)體系中添加MK可明顯促進nestin陽性細胞的增殖

19圖4在體外培養(yǎng)體系中添加MK可明顯促進nestin陽性細胞的增殖。Bar＝100μm。五、MK通過激活Akt磷酸化信號轉導通路促進NSCs的體外增殖水平200ng/mlMK處理24小時后，BrdU陽性、nestin陽性的干細胞細胞數目數量明顯增加，P<0.05，圖5。說明MK....

圖5MK通過激活Akt磷酸化信號轉導通路促進NSCs的體外增殖

20圖5MK通過激活Akt磷酸化信號轉導通路促進NSCs的體外增殖。免疫印跡法分析Akt的磷酸化，給與200ng/mlMK24小時后，NSCs的pAkt/Akt的值升高，P<0.05，與對照組細胞相比，給與20ng/mlMK組的pAkt/Akt的值沒有明顯改變，P>0.05。六、....

本文編號：3950639