目的探究甲基苯丙胺(METH)是否通過調(diào)控miR-129-5p/FAM104B分子軸從而影響大鼠胚胎成纖維細(xì)胞(REF)損傷。方法 MTT實(shí)驗(yàn)檢測不同濃度甲基苯丙胺對REF細(xì)胞活力的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測REF凋亡情況, Western blot檢測增殖和凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá);qRT-PCR檢測miR-129-5p與FAM104B的表達(dá)表達(dá)量;雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-129-5p與FAM104B的靶向結(jié)合關(guān)系。結(jié)果甲基苯丙胺可抑制REF細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,還可促進(jìn)miR-129-5p的表達(dá),抑制FAM104B的表達(dá)。雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-129-5p可靶向調(diào)控FAM104B的表達(dá)。miR-129-5p過表達(dá)明顯抑制了細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。沉默F(xiàn)MA104B可抑制細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。抑制miR-129-5p表達(dá)或FMA104B過表達(dá)可明顯降低METH對REF細(xì)胞增殖及凋亡的作用。結(jié)論甲基苯丙胺通過調(diào)控miR-129-5p/FAM104B分子軸而抑制REF增殖及促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與分組
    1.4 細(xì)胞分組與處理
    1.5 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)
    1.6 MTT實(shí)驗(yàn)
    1.7 Annexin V-FITC流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)
    1.8 Western blot實(shí)驗(yàn)
    1.9 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)測定
    1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 METH抑制REF增殖促進(jìn)細(xì)胞凋亡
    2.2 METH促進(jìn)大鼠胚胎細(xì)胞中miR-129-5p表達(dá)和抑制FAM104B表達(dá)
    2.3 miR-129-5p靶向負(fù)調(diào)控FAM104B表達(dá)
    2.4 過表達(dá)miR-129-5p抑制大鼠胚胎細(xì)胞增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡
    2.5 沉默F(xiàn)AM104B對大鼠胚胎細(xì)胞增殖和凋亡的影響
    2.6 METH通過miR-129-5p調(diào)控FAM104B介導(dǎo)大鼠胚胎細(xì)胞增殖和凋亡的影響
3 討論



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