目的探究甲基苯丙胺(METH)是否通過調(diào)控miR-129-5p/FAM104B分子軸從而影響大鼠胚胎成纖維細胞(REF)損傷。方法 MTT實驗檢測不同濃度甲基苯丙胺對REF細胞活力的影響;流式細胞術(shù)檢測REF凋亡情況, Western blot檢測增殖和凋亡相關(guān)蛋白的表達;qRT-PCR檢測miR-129-5p與FAM104B的表達表達量;雙熒光素酶實驗驗證miR-129-5p與FAM104B的靶向結(jié)合關(guān)系。結(jié)果甲基苯丙胺可抑制REF細胞增殖,促進細胞凋亡,還可促進miR-129-5p的表達,抑制FAM104B的表達。雙熒光素酶實驗證實miR-129-5p可靶向調(diào)控FAM104B的表達。miR-129-5p過表達明顯抑制了細胞增殖,促進細胞凋亡。沉默F(xiàn)MA104B可抑制細胞增殖,促進細胞凋亡。抑制miR-129-5p表達或FMA104B過表達可明顯降低METH對REF細胞增殖及凋亡的作用。結(jié)論甲基苯丙胺通過調(diào)控miR-129-5p/FAM104B分子軸而抑制REF增殖及促進細胞凋亡。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 細胞轉(zhuǎn)染與分組
    1.4 細胞分組與處理
    1.5 qRT-PCR實驗
    1.6 MTT實驗
    1.7 Annexin V-FITC流式細胞術(shù)實驗
    1.8 Western blot實驗
    1.9 雙熒光素酶實驗測定
    1.10 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 METH抑制REF增殖促進細胞凋亡
    2.2 METH促進大鼠胚胎細胞中miR-129-5p表達和抑制FAM104B表達
    2.3 miR-129-5p靶向負調(diào)控FAM104B表達
    2.4 過表達miR-129-5p抑制大鼠胚胎細胞增殖并促進細胞凋亡
    2.5 沉默F(xiàn)AM104B對大鼠胚胎細胞增殖和凋亡的影響
    2.6 METH通過miR-129-5p調(diào)控FAM104B介導大鼠胚胎細胞增殖和凋亡的影響
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