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  本文關(guān)鍵詞：美金剛聯(lián)合豐富環(huán)境對(duì)快速衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及突觸可塑性相關(guān)蛋白的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南京醫(yī)科大學(xué)》 2013年

美金剛聯(lián)合豐富環(huán)境對(duì)快速衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及突觸可塑性相關(guān)蛋白的影響

杜明洋  

【摘要】：背景 阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease, AD），最早由德國神經(jīng)病學(xué)專家AloisAlzheimer于1907年提出，是一種以慢性、進(jìn)行性認(rèn)知功能減退伴有精神行為異常為主要臨床表現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，是老年性癡呆的主要類型。其中學(xué)習(xí)記憶能力的減退是阿爾茨海默病早期和最突出的癥狀，隨著病情的進(jìn)展逐漸出現(xiàn)認(rèn)知功能損害、精神行為異常、社交能力障礙等表現(xiàn)，給家庭及社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)，嚴(yán)重影響患者工作和生活。AD主要的特征性病理改變?yōu)棣?淀粉樣蛋白(Aβ)異常聚集所形成的老年斑(senile plaques，SP)、神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)tau蛋白異常磷酸化所導(dǎo)致的神經(jīng)纖維纏結(jié)(Neurofibrillary tangles，，NFTs)、大腦皮層和海馬等區(qū)內(nèi)廣泛的神經(jīng)元缺失，以及海馬錐體細(xì)胞的顆�？张葑冃浴⑤S索、突觸的異常斷裂和血管淀粉樣變等。 近年來，國內(nèi)外學(xué)者針對(duì)AD機(jī)制的研究和臨床治療相繼建立了許多動(dòng)物模型，如轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型、損害中樞膽堿能系統(tǒng)動(dòng)物模型、Aβ模型和自身免疫模型等。這些模型均不能很好地模擬AD發(fā)病的特征。研究發(fā)現(xiàn)快速衰老小鼠（Senescence accelerated mouse prone，SAMP8）主要以學(xué)習(xí)記憶功能呈增齡性加速衰退為特征。在其5月齡時(shí)皮質(zhì)、紋狀體、海馬即可發(fā)現(xiàn)有Tau蛋白的高度磷酸化和β淀粉樣蛋白的異常蓄積。其所表現(xiàn)的認(rèn)知行為能力的減退，記憶皮層海馬等區(qū)的神經(jīng)病理學(xué)改變更加接近于自然老化的腦組織改變和AD的病理特征，是一種自然發(fā)病模型，因此SAMP8是目前研究老齡化相關(guān)學(xué)習(xí)記憶功能損害基本機(jī)制較理想的動(dòng)物模型，也逐漸被作為評(píng)價(jià)藥物療效、研究AD病理機(jī)制的常用模型。 美金剛，作為中等親和力、非競(jìng)爭(zhēng)性的N甲基-D天冬氨酸受體（NMDAR）的拮抗劑，可以選擇性地阻斷NMDAR過度激活，減少谷氨酸興奮性毒作用，同時(shí)對(duì)正常生理活動(dòng)的NMDAR阻斷作用較弱，被認(rèn)為對(duì)神經(jīng)細(xì)胞有較好的保護(hù)作用。已分別于2002年和2003年被歐洲CPMP和美國FDA批準(zhǔn)用于中、重度AD的治療。研究證實(shí)，美金剛能夠通過有效降低神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度，減少神經(jīng)元遲發(fā)型損傷及氧自由基釋放。同時(shí)，還可以有效地降低tau蛋白的過磷酸化和抑制可溶性Aβ的表達(dá)，改善AD患者的認(rèn)知功能障礙和精神行為異常。另外流行病學(xué)報(bào)道稱，處于豐富環(huán)境也可以延緩AD的發(fā)展；大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)亦證實(shí)，豐富環(huán)境有助于改善學(xué)習(xí)記憶能力，其可能機(jī)制是降低海馬組織淀粉樣蛋白的表達(dá)，增加海馬區(qū)突觸相關(guān)蛋白及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的mRNA表達(dá)。 大量研究發(fā)現(xiàn)，AD患者不僅表現(xiàn)出突觸形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)量的變化，并且可能存在對(duì)突觸可塑性起關(guān)鍵作用的腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）、酪氨酸激酶受體B（trkB）、突觸囊泡蛋白（SYP）、突觸后致密物（PSD-95）等突觸可塑性相關(guān)的蛋白表達(dá)異常。這些突觸可塑性相關(guān)蛋白的減少可以導(dǎo)致AD患者腦內(nèi)神經(jīng)元的缺失，神經(jīng)細(xì)胞凋亡，軸突變性以及神經(jīng)遞質(zhì)合成、運(yùn)輸?shù)恼系K，從而引起學(xué)習(xí)記憶能力的降低。因此，BDNF、trkB、SYP和PSD-95表達(dá)的變化很可能與AD認(rèn)知功能變化存在密切的關(guān)系。 在本實(shí)驗(yàn)中我們選取快速衰老小鼠SAMP8作為研究對(duì)象，旨在觀察美金剛聯(lián)合豐富環(huán)境對(duì)其認(rèn)知及精神行為的影響，及影響SAMP8小鼠學(xué)習(xí)記憶的可能機(jī)制，同時(shí)探討兩因素聯(lián)合是否影響更加顯著?為預(yù)防和控制AD提供可能的理論依據(jù)。 目的 探討美金剛聯(lián)合豐富環(huán)境對(duì)快速衰老小鼠（SAMP8）空間學(xué)習(xí)記憶能力改善和海馬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）、酪氨酸蛋白激酶受體B（TrkB）及突觸囊泡蛋白（SYP）、突觸后致密物（PSD-95）表達(dá)的影響。 方法 將6月齡雄性SAMP8小鼠，隨機(jī)分為4組：標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境組（對(duì)照組，SE）﹑豐富環(huán)境治療組(環(huán)境組，EE)﹑美金剛治療組(美金剛組，SM)和美金剛聯(lián)合豐富環(huán)境組（聯(lián)合治療組，EM），每組各6只。治療8周后，采用Morris水迷宮檢測(cè)小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力和開放場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠探索運(yùn)動(dòng)能力及焦慮樣行為，分別通過Western Blotting和Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)小鼠海馬BDNF、trkB、SYP和PSD-95蛋白及mRNA表達(dá)情況。 結(jié)果 Morris水迷宮： ①定位航行試驗(yàn)：與對(duì)照組比較，環(huán)境組、美金剛組小鼠在試驗(yàn)第3d起尋找到平臺(tái)的潛伏期明顯縮短，聯(lián)合治療組小鼠在試驗(yàn)第2d起的逃避潛伏期明顯縮短（P0.05~0.01）；且聯(lián)合治療組小鼠在試驗(yàn)第4d時(shí)的逃避潛伏期明顯短于環(huán)境組和美金剛組（均P0.05）；②空間探索試驗(yàn)：與對(duì)照組比較，其余3組小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)明顯增多(P0.05~0.01)；且聯(lián)合治療組小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)明顯多于環(huán)境組和美金剛組（均P0.05）。同時(shí)，美金剛組和聯(lián)合治療組小鼠在目的象限花費(fèi)的時(shí)間也明顯增多(P0.05~0.01)；但是豐富環(huán)境組、美金剛和聯(lián)合治療組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 開放場(chǎng)實(shí)驗(yàn)： ①與對(duì)照組比較，其他3組小鼠的穿格數(shù)（水平探索能力）及直立次數(shù)（垂直探索能力）均明顯增多（P0.05~0.01），環(huán)境組、美金剛組與聯(lián)合治療組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；②與對(duì)照組比較，環(huán)境組及美金剛組小鼠的理毛次數(shù)、排便次數(shù)均明顯減少（P0.05），且聯(lián)合治療組排泄次數(shù)減少更加顯著（P0.01），但是干預(yù)組之間的差異仍無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 Real-time PCR結(jié)果： 與對(duì)照組比較，美金剛組和聯(lián)合治療組小鼠海馬BDNFmRNA、SYPmRNA和PSD-95mRNA表達(dá)均明顯增多，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01），其中聯(lián)合治療組BDNFmRNA表達(dá)明顯高于環(huán)境組與美金剛組（均P0.05）；與對(duì)照組比較，環(huán)境組小鼠海馬BDNFmRNA、SYPmRNA表達(dá)亦明顯增多（P0.05~0.01），但在PSD-95mRNA表達(dá)水平上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；各組小鼠海馬TrkBmRNA表達(dá)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 Western Blotting結(jié)果： 與對(duì)照組比較，美金剛組和聯(lián)合治療組小鼠海馬BDNF、trkB、SYP和PSD-95蛋白表達(dá)均明顯增多，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05~0.01）；環(huán)境組小鼠海馬BDNF、trkB和SYP蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組亦明顯增多（P0.05~0.01），但PSD-95蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組增加不明顯（P0.05）；且聯(lián)合治療組小鼠海馬在BDNF、trkB和PSD-95蛋白表達(dá)水平上均明顯高于環(huán)境組與美金剛組（P0.05~0.01）。 結(jié)論 1、美金剛和豐富環(huán)境可以明顯改善SAMP8小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力、增加小鼠的自主活動(dòng)和減少焦慮樣行為，并且兩者聯(lián)合改善空間學(xué)習(xí)記憶能力作用明顯優(yōu)于單一治療。 2、美金剛和豐富環(huán)境可以增加SAMP8小鼠海馬BDNF、trkB、SYP和PSD-95蛋白表達(dá)及BDNF、SYP和PSD-95mRNA表達(dá)，尤以兩者聯(lián)合的效果更加明顯；同時(shí)推測(cè)通過上調(diào)SAMP8小鼠海馬BDNF、trkB、SYP和PSD-95蛋白及基因的表達(dá)可能是美金剛和豐富環(huán)境改善SAMP8的空間學(xué)習(xí)記憶能力的機(jī)制之一。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R749.16;R965
【目錄】：

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中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

2 陸志城;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

3 樊鳳輝;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

4 張英;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

5 肖祥云;[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2008年

6 張中橋;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

7 張中橋;[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2006年

8 ;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

9 付于 于建春;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

10 肖祥云;[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2004年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳立蓉;益壽丸延衰益智作用的機(jī)理研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2010年

2 裴媛;獨(dú)活及其醇提物延緩自然衰老小鼠腦老化的實(shí)驗(yàn)研究[D];遼寧中醫(yī)學(xué)院;2005年

3 姚振宇;熟地黃提取物對(duì)衰老小鼠行為學(xué)及大腦退行性病變的影響及機(jī)制[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

4 張秀麗;梓醇對(duì)D-半乳糖衰老小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用研究[D];大連理工大學(xué);2008年

5 馮仁田;衰老的免疫學(xué)研究：自然衰老的免疫系統(tǒng)變化和氧化應(yīng)激對(duì)免疫系統(tǒng)的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

6 馬麗杰;鎖陽多糖延緩衰老的作用及端粒酶調(diào)控機(jī)制研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2009年

7 龔玉石;蓮房原花青素對(duì)老年性癡呆的防治作用及其機(jī)制的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 趙利華;艾炷灸延緩D-半乳糖小鼠腦衰老作用的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2009年

9 宋旭;非酶糖基化致衰老理論的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1999年

10 冉啟濤;衰老小鼠T淋巴細(xì)胞功能變化的研究及延緩免疫衰老藥物的初步篩選[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1995年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 杜明洋;美金剛聯(lián)合豐富環(huán)境對(duì)快速衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及突觸可塑性相關(guān)蛋白的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

2 張磊;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)自然衰老小鼠T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

3 梁穎敏;鐵皮石斛對(duì)雌性衰老小鼠的抗衰老作用及其機(jī)理研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

4 陸碧瓊;不同負(fù)荷間歇游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)衰老小鼠自由基代謝及抗氧化酶活性影響的研究[D];河南大學(xué);2012年

5 黃和賢;D-半乳糖致衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力和睪丸的改變及延衰合劑的治療作用研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

6 欒增強(qiáng);延衰合劑對(duì)衰老小鼠抗氧化及學(xué)習(xí)記憶能力影響的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

7 石兵兵;血清微環(huán)境對(duì)自然衰老小鼠T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

8 揣國鋼;開竅益智方對(duì)亞急性衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響[D];揚(yáng)州大學(xué);2010年

9 王忠娟;七白膏加減方對(duì)D-半乳糖衰老小鼠皮膚的有效性作用研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2010年

10 金紅;山茱萸多糖對(duì)D-半乳糖致衰大鼠腦老化及NGFmRNA表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];佳木斯大學(xué);2008年

  本文關(guān)鍵詞：美金剛聯(lián)合豐富環(huán)境對(duì)快速衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及突觸可塑性相關(guān)蛋白的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：171247