本文關(guān)鍵詞：自噬對(duì)血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《華北理工大學(xué)》 2015年

自噬對(duì)血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

劉金霞  

【摘要】：目的通過(guò)對(duì)血管性癡呆模型大鼠分別進(jìn)行側(cè)腦室注射自噬抑制劑(3-甲基腺嘌呤)、自噬激動(dòng)劑(雷帕霉素),Morris水迷宮測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)記憶能力,檢測(cè)自噬特異性蛋白及突觸可塑性相關(guān)蛋白的表達(dá),探討自噬對(duì)血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,為血管性癡呆的發(fā)病機(jī)制及治療提供理論依據(jù)。方法1選取192只健康雄性SD大鼠,使用隨機(jī)數(shù)字法將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為:假手術(shù)組(Sham組)、血管性癡呆模型組(VD組)、自噬抑制劑(3-甲基腺嘌呤)組(3-MA組)、自噬激動(dòng)劑(雷帕霉素)組(Rap組)。每組又分為模型制備成功后1 w、2 w、4 w、8 w 4個(gè)亞組。2血管性癡呆模型制備:應(yīng)用改良的Pulsinelli四血管阻斷法進(jìn)行血管性癡呆模型制備,即電凝雙側(cè)椎動(dòng)脈致永久性閉塞,24小時(shí)后反復(fù)短暫性?shī)A閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈,造成大鼠全腦缺血,制備大鼠血管性癡呆模型。假手術(shù)組大鼠在術(shù)中只進(jìn)行雙側(cè)椎動(dòng)脈及頸總動(dòng)脈的暴露,不予以阻斷血流。3給藥方法:自噬抑制劑(3-甲基腺嘌呤)組和自噬激動(dòng)劑(雷帕霉素)組大鼠于造模前30min,分別進(jìn)行側(cè)腦室注射3-甲基腺嘌呤和雷帕霉素。4用Morris水迷宮測(cè)定大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。5采用免疫組化法檢測(cè)大鼠海馬CA1區(qū)自噬相關(guān)蛋白微管相關(guān)蛋白1輕鏈3 II(microtubule associated protein 1 light chain 3,MAP1-LC3II,即LC3II)的表達(dá),免疫印跡法檢測(cè)大鼠海馬CA1區(qū)自噬相關(guān)蛋白LC3II/LC3I的比值;應(yīng)用免疫組化法及免疫印跡法檢測(cè)大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白的表達(dá),包括突觸素(synaptophysin,Syn),突觸后膜致密物質(zhì)95(Postsynaptic density material 95,PSD-95),生長(zhǎng)相關(guān)蛋白(growth-associated protein,GAP-43),微管相關(guān)蛋白2(microtubule-associated protein2,MAP-2)。6采用OLYMPUS攝像顯微鏡(400×)攝像,并應(yīng)用Motic Med 6.0數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析,免疫印跡結(jié)果用Image J分析。7數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(sx±)表示,多組間均值比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA),兩組間比較采用t檢驗(yàn),兩變量間關(guān)系判斷采用Pearson相關(guān)性分析方法進(jìn)行相關(guān)性分析,以P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1與Sham組相比較,VD組觀察的各時(shí)間點(diǎn)逃避潛伏期在1 d時(shí)無(wú)明顯變化(P0.05),第2 d以后各觀察時(shí)間點(diǎn)逃避潛伏期較Sham組延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),穿越原平臺(tái)位置次數(shù)均較Sham組少(均P0.05);與VD組比較,3-MA組大鼠各時(shí)間點(diǎn)逃避潛伏期在1 d時(shí)無(wú)明顯變化(P0.05),第2 d以后各測(cè)試時(shí)間點(diǎn)逃避潛伏期縮短,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),穿越原平臺(tái)位置次數(shù)均增多(均P0.05);與VD組相比,Rap組大鼠各時(shí)間點(diǎn)逃避潛伏期在1 d時(shí)無(wú)明顯變化(P0.05),第2 d以后各測(cè)試時(shí)間點(diǎn)逃避潛伏期延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),穿越平臺(tái)的次數(shù)均減少(均P0.05)。2與Sham組比較,VD組各時(shí)間點(diǎn)LC3II蛋白陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)及LC3II/LC3I的比值在1 w時(shí)較小,2 w增大,4 w時(shí)達(dá)到高峰,8 w減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.01);與VD組比較,3-MA組各時(shí)間點(diǎn)LC3II蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及LC3II/LC3I的比值水平較VD組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01);與VD組比較,Rap組各時(shí)間點(diǎn)LC3II蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及LC3II/LC3I的比值水平較VD組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。3與Sham組比較,VD組各時(shí)間點(diǎn)Syn、PSD-95、MAP-2蛋白表達(dá)均減少,GAP-43蛋白表達(dá)均增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.01);與VD組比較,3-MA組各時(shí)間點(diǎn)Syn、PSD-95、MAP-2、GAP-43蛋白表達(dá)水平較VD組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01);與VD組比較,Rap組各時(shí)間點(diǎn)Syn、PSD-95、MAP-2、GAP-43蛋白表達(dá)水平較VD組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。4相關(guān)性分析結(jié)果示自噬相關(guān)蛋白LC3II或LC3II/LC3I與突觸可塑性相關(guān)蛋白呈負(fù)相關(guān)(均P0.01);自噬相關(guān)蛋白LC3II與GAP-43無(wú)明顯相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論1自噬參與了血管性癡呆的發(fā)病過(guò)程,在一定程度上增加血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)自噬的發(fā)生,大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力可能減退。2突觸可塑性相關(guān)蛋白在血管性癡呆發(fā)病中起重要作用,突觸可塑性相關(guān)蛋白表達(dá)減少可能會(huì)減弱大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。3自噬對(duì)血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白表達(dá)可能具有抑制作用,在一定程度上增加自噬可能會(huì)通過(guò)抑制血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白表達(dá)而加重血管性癡呆大鼠的學(xué)習(xí)記憶障礙。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R749.13
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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8 吳巧鳳;盧圣峰;余曙光;;沉默突觸在突觸可塑性及針灸促神經(jīng)康復(fù)中的作用探討[A];2010年中國(guó)針灸學(xué)會(huì)腦病專業(yè)委員會(huì)、中國(guó)針灸學(xué)會(huì)循證針灸專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2010年

9 李澎濤;潘彥舒;黃啟福;賈旭;嚴(yán)京;王永炎;;解毒通絡(luò)方對(duì)腦缺血損傷后海馬區(qū)突觸可塑性的影響[A];第四次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2002年

10 胡前勝;董勝璋;陳學(xué)敏;;神經(jīng)細(xì)胞粘附分子與學(xué)習(xí)記憶[A];2003年全國(guó)免疫毒理學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2003年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 成都軍區(qū)總醫(yī)院 張虎軍;[N];健康報(bào);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王瑋;一種融合多種可塑性的脈沖神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)研究[D];重慶大學(xué);2015年

2 楊波;富勒醇對(duì)海馬突觸可塑性影響的離體研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2011年

3 葉晨靜;快速眼動(dòng)睡眠剝奪對(duì)大鼠海馬突觸可塑性相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

4 趙江;研究突觸后膜NMDA受體在突觸內(nèi)外側(cè)向移位對(duì)突觸可塑性的可能影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

5 高楊;非動(dòng)作電位依賴的突觸前后配對(duì)刺激誘導(dǎo)大鼠視皮層突觸可塑性的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

6 張廣輝;神經(jīng)元突觸可塑性的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)動(dòng)力學(xué)研究[D];浙江師范大學(xué);2012年

7 李曉麗;高頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對(duì)老齡小鼠突觸可塑性相關(guān)基因的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

8 李穎;應(yīng)激對(duì)前額葉皮層、丘腦突觸可塑性的影響[D];山東師范大學(xué);2014年

9 陳云芝;基于突觸可塑性的神經(jīng)信息傳遞的模型構(gòu)建及仿真分析[D];河北工業(yè)大學(xué);2014年

10 彭志勇;mTOR信號(hào)通路在神經(jīng)病理疼痛大鼠脊髓背角突觸可塑性的作用[D];中南大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：自噬對(duì)血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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