本文關(guān)鍵詞：rHSG基因調(diào)控COPD大鼠氣道成纖維細(xì)胞增殖凋亡

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【摘要】：目的采用脂質(zhì)體介導(dǎo)攜帶大鼠增殖抑制基因(rHSG)的真核表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染至COPD模型大鼠氣道成纖維細(xì)胞,為干預(yù)COPD的氣道成纖維細(xì)胞增殖,打下基因治療基礎(chǔ)。方法構(gòu)建真核表達(dá)載體pEGFP-N1,對重組質(zhì)粒pEGFP-rHSG進(jìn)行鑒定并測序;采用陽離子脂質(zhì)體將重組質(zhì)粒pEGFP-rHSG轉(zhuǎn)染至COPD模型大鼠氣道成纖維細(xì)胞,分別感染24和48 h及3、5和7 d后,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time PCR)檢測rHSG mRNA的不同時(shí)段表達(dá)水平,MTT、流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染后成纖維細(xì)胞增殖及凋亡。結(jié)果證實(shí)重組質(zhì)粒pEGFP-rHSG構(gòu)建成功。轉(zhuǎn)染24 h,rHSG mRNA表達(dá)量開始增加,7 d達(dá)到高峰,各轉(zhuǎn)染組間rHSG mRNA表達(dá)差異顯著(P0.05);轉(zhuǎn)染48 h后rHSG基因轉(zhuǎn)染組成纖維細(xì)胞的增殖抑制明顯低于未轉(zhuǎn)染組成纖維細(xì)胞(P0.05);轉(zhuǎn)染后48 h凋亡開始,與模型對照組相比,隨著時(shí)間延長,凋亡逐漸增加,7 d時(shí)凋亡率達(dá)最大(P0.05)。結(jié)論外源性rHSG基因介導(dǎo),能夠使氣道成纖維細(xì)胞的增殖受到抑制并誘導(dǎo)其凋亡。
【作者單位】： 貴陽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 慢性阻塞性肺疾病 氣道重塑 氣道成纖維細(xì)胞 大鼠增殖抑制基因
【基金】：國家自然基金地區(qū)科學(xué)基金(81060319) 貴州省科學(xué)技術(shù)基金(黔科合基字[2008I 2177號(hào)])
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonarydisease,COPD)是一種具有氣流受限特征的疾病,氣流受限不完全可逆,通常呈進(jìn)行性發(fā)展,并與肺臟對有害顆粒和氣體的異常炎性反應(yīng)有關(guān)。而氣道重塑是導(dǎo)致氣流受限不完全可逆的主要原因,氣道重塑[1]主要是小氣道周圍纖維組織增生,

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本文編號(hào)：846716