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外源性miR-34a抑制H1299細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2017-08-29 23:18

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【摘要】:將合成的miR-34a成熟序列轉(zhuǎn)染p53 / 的非小細(xì)胞肺癌H1299細(xì)胞,探究外源性的miR-34a是否影響p53缺失細(xì)胞的生長(zhǎng)、凋亡和衰老以及其作用機(jī)制。MTT檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)與存活,藻紅B染色檢測(cè)細(xì)胞的死亡,Annexin V/PI染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡,β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)細(xì)胞的衰老,Western blot檢測(cè)與細(xì)胞凋亡和周期相關(guān)的Bcl-2、Puma、Cdk4和E2F3蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示,miR-34a轉(zhuǎn)染組和陰性對(duì)照組相比,存活率明顯降低,且48 h較24 h更顯著,24 h和48 h存活率分別為79.94%、64.83%;細(xì)胞死亡和凋亡的分析結(jié)果表明,外源性miR-34a可以促進(jìn)細(xì)胞死亡和凋亡;此外,細(xì)胞還出現(xiàn)了明顯的衰老,并且檢測(cè)到凋亡、衰老相關(guān)的Bcl-2、Puma、E2F3和Cdk4蛋白的表達(dá)下調(diào)。miR-34a可以下調(diào)p53下游相應(yīng)靶蛋白的表達(dá),通過(guò)部分補(bǔ)救p53通路或p53非依賴途徑促進(jìn)細(xì)胞的凋亡、衰老并抑制細(xì)胞的增殖。
【作者單位】: 蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院;蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院;蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】miR-a 凋亡 衰老 EF
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):81071878)資助的課題~~
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: microRNA(miRNA)是一種內(nèi)源性、非編碼的單鏈小RNA分子。其長(zhǎng)度約19-25 nt,它可以通過(guò)形成RNA依賴的沉默復(fù)合體(RNA-induced silencingcomplex,RISC)與其靶基因的3′-端的非翻譯區(qū)(3′-UTR)發(fā)生非完全的互補(bǔ)結(jié)合,從而降解其靶基因的mRNA或抑制靶基因的翻譯[1]。其本身在正常

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳吉球,梁麗凡,肖軍,張?jiān)鹿?心肌細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生理.病理科學(xué)與臨床分冊(cè);2000年05期

2 朱健,蔡文瑋,成靜,陳朝婷;老年鼠外周血淋巴細(xì)胞凋亡及細(xì)胞免疫功能變化的研究[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2002年05期

3 黃勤,尢家,

本文編號(hào):755981


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