本文關(guān)鍵詞：人腸道病毒71型3A蛋白的原核表達(dá)及抗體制備

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【摘要】：目的構(gòu)建人腸道病毒71型3A基因原核表達(dá)質(zhì)粒,制備重組3A蛋白及其抗體。方法 PCR方法擴(kuò)增人腸道病毒71型3A基因,構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒PET28a-3A并轉(zhuǎn)化大腸埃希菌,誘導(dǎo)表達(dá)3A重組蛋白,免疫小鼠制備3A蛋白抗體。通過(guò)免疫熒光和Western blot方法鑒定抗體特異性。結(jié)果成功構(gòu)建了PET28a-3A原核表達(dá)質(zhì)粒并表達(dá)了3A重組蛋白,3A蛋白以包涵體的形式存在。細(xì)胞免疫熒光和Western blot檢測(cè)顯示,制備的鼠源3A蛋白抗體可識(shí)別真核表達(dá)的EGFP-3A融合蛋白以及EV71感染細(xì)胞表達(dá)的3A蛋白。結(jié)論成功構(gòu)建了人腸道71型3A基因原核表達(dá)質(zhì)粒,利用該質(zhì)粒表達(dá)的重組蛋白成功制備了特異性的3A蛋白的鼠源抗體。
【作者單位】： 華中師范大學(xué)生命科學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 人腸道病毒型 A蛋白 多克隆抗體
【基金】：華中師范大學(xué)中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目資助(No.CCNU10A01018)
【分類(lèi)號(hào)】：R373.2
【正文快照】： ***腸道病毒71型(Enterovirus 71)屬于小RNA病毒科腸道病毒屬。EV71感染可致人手足口病、皰疹性咽峽炎、無(wú)菌性腦膜炎、腦炎和脊髓灰質(zhì)炎樣的麻痹性疾病等多種與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的疾病,主要在4歲以下嬰幼兒中引起疾病癥狀。病毒基因組為約7 400個(gè)核苷酸的具有感染性的單鏈正義RNA

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：745229