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人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶啟動子調(diào)控的腫瘤特異性載體的構(gòu)建及表達(dá)

發(fā)布時間:2017-08-24 13:22

  本文關(guān)鍵詞:人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶啟動子調(diào)控的腫瘤特異性載體的構(gòu)建及表達(dá)


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【摘要】:目的構(gòu)建由人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)啟動子調(diào)控的具有腫瘤細(xì)胞特異性表達(dá)能力的綠色熒光蛋白質(zhì)粒。方法利用PCR技術(shù)克隆hTERT基因啟動子,利用分子生物學(xué)方法以該啟動子替換pEGFP-C3質(zhì)粒的CMV啟動子,構(gòu)建重組質(zhì)粒(hTERTp-EGFP)。用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將hTERTp-EGFP質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染至腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞,觀察此兩種細(xì)胞內(nèi)綠色熒光蛋白的表達(dá)差異。結(jié)果成功構(gòu)建重組質(zhì)粒hTERTp-EGFP,轉(zhuǎn)染結(jié)果顯示該質(zhì)粒在腫瘤細(xì)胞中表達(dá),而在正常細(xì)胞中無明顯表達(dá)。結(jié)論重組質(zhì)粒hTERTp-EGFP具有腫瘤特異性表達(dá)能力。
【作者單位】: 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】端粒酶 端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶啟動子 腫瘤 質(zhì)粒
【基金】:國家大學(xué)生創(chuàng)新基金(200600)
【分類號】:R346
【正文快照】: 端粒酶由一段與端粒DNA互補的小分子RNA序列及反轉(zhuǎn)錄酶(human telomerase reverse-tran-scriptase,hTERT)構(gòu)成,前者可與染色體末端的端粒DNA配對結(jié)合,后者以RNA序列為模板延長端粒DNA序列[1-2]。編碼hTERT基因的轉(zhuǎn)錄序列之前有一啟動子(hTERT-promoter),該啟動子僅在端粒酶陽

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【共引文獻(xiàn)】

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9 沈偉;李蘭;吳曉潔;周艷榮;潘慶杰;陳宏;鄧?yán)^先;;外源基因轉(zhuǎn)染導(dǎo)致小鼠體細(xì)胞過快衰老及p16~(INK4a)表達(dá)水平變化[J];遺傳;2006年11期

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6 鮑s,

本文編號:731534


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