本文關(guān)鍵詞：融合蛋白LTβR-Fc對卵清蛋白誘發(fā)的皮炎小鼠模型的影響

  更多相關(guān)文章： 特應(yīng)性皮炎 卵清蛋白 LIGHT-HVEM信號通路

【摘要】：特應(yīng)性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一種T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病,常伴發(fā)哮喘、過敏性鼻炎和結(jié)膜炎等一系列癥狀,以劇烈瘙癢和睡眠障礙為主要特征。其發(fā)病機制尚不明確,目前認(rèn)為T細(xì)胞免疫異常在AD的發(fā)病環(huán)節(jié)中扮演了重要角色,AD的發(fā)病、皮損的持續(xù)存在與T淋巴細(xì)胞的過度活化以及產(chǎn)生的細(xì)胞因子功能異常有關(guān)。共刺激分子在T淋巴細(xì)胞活化過程中起著至關(guān)重要的作用。研究中針對其受體-配體結(jié)合的阻斷策略既可用于急性移植免疫排斥反應(yīng)的預(yù)防,也可用于自身免疫抑制的維持。單純皰疹病毒侵入介質(zhì)配體(herpesvirus entry mediator ligand,HVEML,或稱LIGHT)是新近發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)配體超家族的一員,它參與許多炎癥性疾病的發(fā)病過程,其受體一般表達(dá)于活化的T淋巴細(xì)胞,屬于單純皰疹病毒侵入介質(zhì)(herpesvirus entry mediator,HVEM)。研究證實,LIGHT共刺激分子參與了炎癥性腸疾病、強直性脊柱炎與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病的發(fā)病進程,而特應(yīng)性皮炎患者外周血血清中LIGHT的表達(dá)水平較健康者顯著上調(diào),且與患者血清內(nèi)IgE的水平以及濕疹面積與嚴(yán)重度指數(shù)(eczema area and severity index,EASI)顯著相關(guān)。因此,本研究擬探討單純皰疹病毒侵入介質(zhì)配體信號通路LIGHT-HVEM阻斷抗體LTβR-Fc融合蛋白對卵清蛋白誘發(fā)的皮炎小鼠模型的影響,以進一步探索LIGHT-HVEM信號通路在AD發(fā)病機制中的作用。第一部分IL-4、IL-5和IFN-γ在皮炎小鼠模型中的表達(dá)【目的】檢測LIGHT-HVEM阻斷抗體LTβR-Fc融合蛋白建立的皮炎小鼠模型皮損處及脾細(xì)胞上清液內(nèi)白介素(IL)-4、IL-5和干擾素γ(IFN-γ)的表達(dá),并分析LIGHT-HVEM信號通路在AD發(fā)病機制中的作用�！痉椒ā繉ALB/c小鼠隨機分為空白對照組(以100μl生理氯化鈉溶液進行刺激)、模型組(將100μg卵清蛋白溶于100μl生理氯化鈉溶液中進行刺激)以及阻斷劑組(在卵清蛋白致敏前24 h將100μg LTβR-Fc溶于100μl生理氯化鈉溶液作為阻斷藥物進行刺激),于造模結(jié)束時處死各組小鼠,用rt-pcr法檢測小鼠皮損處il-4、il-5和ifn-γ的mrna表達(dá)情況,用elisa法檢測小鼠脾細(xì)胞上清液內(nèi)il-4、il-5和ifn-γ的蛋白表達(dá)情況。【結(jié)果】融合蛋白ltβr-fc顯著抑制了卵清蛋白誘發(fā)的皮炎小鼠模型的炎癥反應(yīng)。皮炎小鼠模型組與阻斷劑組小鼠皮損處il-4mrna(1.81±0.25vs0.88±0.25)、il-5mrna(1.24±0.26vs0.75±0.15)、ifn-γmrna(1.11±0.19vs0.62±0.09)水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),脾細(xì)胞上清液內(nèi)il-4蛋白[(20.12±5.39)ng/lvs(9.58±1.44)ng/l]、il-5蛋白[(22.77±4.07)ng/lvs(11.37±2.02)ng/l]、ifn-γ蛋白[(23930±44.20)ng/lvs(16167±950.40)ng/l]水平差異亦具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)�！窘Y(jié)論】融合蛋白阻斷抗體ltβr-fc通過阻斷l(xiāng)ight-hvem信號通路可以顯著下調(diào)卵清蛋白誘發(fā)的皮炎小鼠模型的il-4、il-5和ifn-γ,提示light-hvem可以作為特應(yīng)性皮炎的潛在治療靶點。第二部分皮炎小鼠模型血清中總ige、igg1以及卵清蛋白特異性ige、igg1的表達(dá)水平【目的】評估light-hvem阻斷抗體ltβr-fc融合蛋白建立的皮炎小鼠模型的濕疹面積與嚴(yán)重度指數(shù)(eczemaareaandseverityindex,easi),并檢測皮炎小鼠模型血清中總的以及卵清蛋白特異性的ige、igg1的表達(dá),分析light-hvem信號通路在ad發(fā)病機制中的作用�！痉椒ā繉alb/c小鼠隨機分為空白對照組(以100μl生理氯化鈉溶液進行刺激)、模型組(將100μg卵清蛋白溶于100μl生理氯化鈉溶液中進行刺激)以及阻斷劑組(在卵清蛋白致敏前24h將100μgltβr-fc溶于100μl生理氯化鈉溶液作為阻斷藥物進行刺激),在開始致敏后第0、4、8、12、15、20、23、27、31、34天分別對各組實驗小鼠進行病情嚴(yán)重程度評分,同時測量皮損面積大小,最后于造模結(jié)束行眼眶取血,提取血清后處死各組小鼠,用elisa方法檢測血清內(nèi)總的ige、igg1以及卵清蛋白特異性的ige、igg1的表達(dá)水平。【結(jié)果】融合蛋白ltβr-fc顯著抑制了卵清蛋白誘發(fā)的皮炎小鼠模型的炎癥反應(yīng)。與模型組相比,阻斷劑組小鼠皮損面積顯著減少(P0.05),EASI明顯降低(P0.05)。皮炎小鼠模型組與阻斷劑組血清內(nèi)總的IgE[(32277.00±407.53)μg/L vs27446367±2052.64)μg/L]和IgG1[(2323.33±502.43)μg/L vs(1296.33±32.72)μg/L]水平差異均有統(tǒng)計學(xué)差異,血清內(nèi)卵清蛋白特異性的IgE[(0.84±0.11)μg/L vs(0.46±0.10)μg/L]和IgG1[(0.86±0.07)μg/L vs(0.62±0.10)μg/L]亦具有統(tǒng)計學(xué)意義�！窘Y(jié)論】融合蛋白LTβR-Fc可以通過阻斷共刺激分子LIGHT,促使皮炎模型EASI降低,同時血清總的與卵清蛋白特異性的IgE、IgG1顯著下調(diào),提示LIGHT-HVEM信號通路可作為特應(yīng)性皮炎的潛在治療靶點。
【關(guān)鍵詞】：特應(yīng)性皮炎 卵清蛋白 LIGHT-HVEM信號通路
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R758.2;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-12
• 研究背景12-20
• 一 共刺激分子LIGHT及其配體HVEM12-15
• 二 LIGHT-HVEM信號通路與炎癥性疾病15-16
• 參考文獻16-20
• 第一部分 IL-4、IL-5 和IFN-Γ在皮炎小鼠模型中的表達(dá)20-26
• 一 材料和方法20-22
• 二 結(jié)果22-24
• 三 討論24-25
• 參考文獻25-26
• 第二部分 皮炎小鼠模型血清中總IGE、IGG1以及卵清蛋白特異性IGE、IGG1的表達(dá)水平26-33
• 一 材料和方法26-28
• 二 結(jié)果28-31
• 三 討論31-32
• 參考文獻32-33
• 結(jié)論33-34
• 綜述34-57
• 參考文獻44-57
• 碩士期間發(fā)表的論文57-58
• 本課題的受資助情況58-59
• 縮寫詞表59-60
• 致謝60-61

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳培金;卵清蛋白對幾種藥物溶解的影響[J];國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊;1990年01期

2 潘殊男;董小曼;陳波;董翊;張碧如;許盟;;抗卵清蛋白單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株的制備[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進展;2007年03期

3 辛忠,范宇紅,莊茂欣,楊慧,張松青,惠琦,左毅,張巖;流感疫苗中卵清蛋白檢定方法精確度的探討[J];生物技術(shù);2004年04期

4 王春花;劉愛霞;葉鳳釵;王玉秋;;顆粒物對卵清蛋白致敏動物模型影響的研究進展[J];環(huán)境與健康雜志;2010年06期

5 陳洪,劉晶星;重組卵清蛋白-促黃體激素釋放激素有望成為絕育疫苗[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;2000年01期

6 張國強;馮素英;施彤;王晉;敖淑英;;酶聯(lián)免疫卵清蛋白定量試劑的研制及驗證[J];中國實驗診斷學(xué);2006年09期

7 何麗麗;段江曼;裘佳寅;于飛;劉叔文;李琳;;鄰苯二甲酸酐修飾卵清蛋白體外抗單純皰疹病毒Ⅱ型的活性研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年07期

8 孫大慶;楊錫強;劉瑋;李欣;;卵清蛋白霧化吸入誘導(dǎo)腸道菌群失調(diào)小鼠肺部過敏反應(yīng)的發(fā)生[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年03期

9 田博;施彤;王晉;馮素英;董小曼;張國強;;酶聯(lián)法檢測流感疫苗中卵清蛋白含量試劑盒的質(zhì)量驗證[J];中國生物制品學(xué)雜志;2006年06期

10 馬志宇;陳美麗;張萌;劉靜;賈重來;羅亮;解紅艷;;Capto Core 700在流感疫苗中去除卵清蛋白的應(yīng)用[J];中國生物制品學(xué)雜志;2013年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 嚴(yán)慧;郭霞;郭榮;;表面活性劑對卵清蛋白自組裝機構(gòu)的調(diào)控[A];中國化學(xué)會第二十五屆學(xué)術(shù)年會論文摘要集（下冊）[C];2006年

2 梁麗君;王春花;王玉秋;閆振廣;劉征濤;;不同顆粒物對卵清蛋白致敏豚鼠免疫指標(biāo)的影響5[A];中國毒理學(xué)會環(huán)境與生態(tài)毒理學(xué)專業(yè)委員會第二屆學(xué)術(shù)研討會暨中國環(huán)境科學(xué)學(xué)會環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)與基準(zhǔn)專業(yè)委員會2011年學(xué)術(shù)研討會會議論文集[C];2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 方富民;融合蛋白LTβR-Fc對卵清蛋白誘發(fā)的皮炎小鼠模型的影響[D];蘇州大學(xué);2016年

2 豆玉新;動態(tài)超高壓微射流均質(zhì)對卵清蛋白改性機理的研究[D];南昌大學(xué);2008年

3 胡月明;微波場內(nèi)卵清蛋白糖基化反應(yīng)的研究[D];南昌大學(xué);2014年

4 周明廣;卵清蛋白單克隆抗體的研制及應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2012年

5 張琦;蛋雞輸卵管卵清蛋白表達(dá)的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

6 秦倩茹;抗卵清蛋白單克隆抗體的制備及卵清蛋白、醇溶蛋白ELISA檢測方法的建立[D];中國海洋大學(xué);2010年

7 鄧小芳;食品中四種重要過敏原酶聯(lián)免疫檢測方法的研究[D];江南大學(xué);2012年

，

本文編號：727231