兔下頜骨來(lái)源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)及鑒定
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【摘要】:目的:探討兔下頜骨來(lái)源的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)體外分離、培養(yǎng)并對(duì)下頜骨來(lái)源的BMMSCs進(jìn)行鑒定,為骨組織工程提供種子細(xì)胞。方法:取兔下頜骨中的骨松質(zhì),采用密度梯度離心法分離單個(gè)核細(xì)胞,貼壁培養(yǎng),取P2或P3代BMMSCs進(jìn)行檢測(cè)。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài);MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖并繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線;克隆形成實(shí)驗(yàn)計(jì)算克隆形成率;向成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞多向誘導(dǎo)分化;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面抗原標(biāo)記。采用SPSS16.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:細(xì)胞經(jīng)傳代后形態(tài)一致,呈梭形或三角形;細(xì)胞生長(zhǎng)曲線顯示,下頜骨BMMSCs經(jīng)歷潛伏期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和平臺(tái)期;克隆形成率為37%;成骨及成脂誘導(dǎo)形成鈣結(jié)節(jié)及脂滴,茜素紅及油紅O染色呈陽(yáng)性;成骨骼肌誘導(dǎo)desmin抗原標(biāo)記陽(yáng)性;流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,所獲得的下頜骨BMMSCs純度較高,CD90和CD146表面標(biāo)記陽(yáng)性率分別為98.7%、98.1%。結(jié)論:從兔下頜骨分離的BMMSCs純度較高,有強(qiáng)大的自我復(fù)制、增殖特性和體外多向誘導(dǎo)分化潛能,有望成為骨組織工程的種子細(xì)胞。
【作者單位】: 佳木斯大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科;長(zhǎng)春市口腔醫(yī)院口腔頜面外科;
【關(guān)鍵詞】: 兔 下頜骨 骨髓 間充質(zhì)干細(xì)胞
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81170935)~~
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMMSCs)以往主要來(lái)源于股骨、髂骨[1-2],目前對(duì)于頜骨來(lái)源的BMMSCs的研究有限,其生物學(xué)行為尚不十分清楚。人體成骨方式為軟骨成骨和膜內(nèi)成骨,研究表明,頜骨的成骨方式為膜內(nèi)成骨[3-4]。胚胎第7周,位于下頜骨始基部位的
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,本文編號(hào):723396
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