本文關(guān)鍵詞：人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及凍存前后生物學(xué)變化

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【摘要】：目的有效地分離并擴(kuò)增人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(hADSCs),并觀察凍存前后hADSCs的一般生物學(xué)特征。方法采用Ⅰ型膠原酶消化的方法從抽脂手術(shù)廢棄的脂肪組織中分離hADSCs,接種在人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。采用胰酶消化法傳代擴(kuò)增,取處于生長對(duì)數(shù)期的第3代細(xì)胞,以液氮凍存6個(gè)月。復(fù)蘇后以臺(tái)盼藍(lán)染色檢測細(xì)胞存活率,MTT法描繪細(xì)胞生長曲線;以流式細(xì)胞儀檢測凍存前后細(xì)胞表面分子CD44、CD105、CD29、CD73、CD31、HLA-DR的表達(dá)水平。結(jié)果細(xì)胞大小均等,呈長梭形漩渦狀生長。復(fù)蘇后細(xì)胞存活率可達(dá)(91.25±3.02)%;凍存前后細(xì)胞生長曲線無明顯差別,均呈"S"形;經(jīng)過2～3d潛伏期后進(jìn)入增殖期,7d后進(jìn)入平臺(tái)期。凍存前CD44、CD105雙陽性細(xì)胞占(99.850±0.001)%,CD29、CD73雙陽性細(xì)胞占(92.600±0.028)%,CD31陽性細(xì)胞占(4.186±0.010)%,HLA-DR陽性細(xì)胞占(1.02±0.007)%;凍存后CD44、CD105雙陽性細(xì)胞占(98.060±0.028)%,CD29、CD73雙陽性細(xì)胞占(91.224±0.041)%,CD31陽性細(xì)胞占(3.832±0.009)%,HLA-DR陽性細(xì)胞占(1.514±0.006)%。凍存前后上述6種hADSCs表面分子表達(dá)水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論來源于人的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞易于體外培養(yǎng)擴(kuò)增和凍存,復(fù)蘇后存活率高,一般生物學(xué)特征無明顯變化,可用作組織工程的種子細(xì)胞。
【作者單位】： 溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 流式細(xì)胞儀 凍存 分離 生物學(xué)特征
【基金】：浙江省自然科學(xué)基金(NO.Y2101091)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(human adipose-derivedstem cells,hADSCs)最初是由Zuk等[1]從人脂肪組織中分離得到的一種具有自我更新和多向分化潛能的多能干細(xì)胞[2]。hADSCs在一定條件下可以分化成脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞、肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等,并且具有特殊的免疫調(diào)節(jié)作用[3],常

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本文編號(hào)：707448