本文關鍵詞：HBx介導miR-221上調-ERα下調致HepG2細胞惡性增殖

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【摘要】：目的探討microRNA221(miR-221)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染相關性肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的促癌功能以及HBV基因編碼的X蛋白(HBx)誘導miR-221上調促進HepG2細胞異常增殖的分子機制。方法重組HBx腺病毒(Ad-HBx)感染人肝癌HepG2細胞,熒光定量PCR檢測HepG2-HBx細胞中miR-221和ERα mRNA表達的變化;流式細胞術檢測細胞周期,Western blot檢測雌激素受體α(estrogen receptorα,ERα)蛋白表達水平變化,分別用miR-221 mimic和miR-221 inhibitor轉染HepG2細胞后,熒光定量PCR檢測HepG2-HBx細胞中miR-221和ERαmRNA表達變化;Western blot檢測ERα蛋白水平表達變化。結果 RT-PCR實驗證實,adv-HBx感染HepG2細胞后,HBx在HepG2細胞中高效表達;感染48 h后,HBx蛋白可顯著上調miR-221[(495.84±61.16)vs(239.25±21.15),P0.05]并抑制ERα蛋白[(0.24±0.01)vs(0.61±0.02),P0.05]的表達水平,同時促進HepG2細胞異常增殖[(31.73±3.53)%vs(56.08±1.56)%,P=0.01]。miRNA轉染實驗及Western blot證實:miR-221抑制ERα蛋白的表達(P0.05),miR-221抑制劑促進ERα蛋白的表達(P0.05)。結論 HBx可能通過上調miR-221進而下調ERα對肝癌的保護性效應而促進肝癌細胞異常增殖,靶向miR-221的策略具有抑制肝癌細胞增殖的治療潛能。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】： HBx蛋白 miR- 雌激素受體α HepG細胞 增殖
【基金】：國家自然科學基金(81071621,30973378,81101826,81272545) 國家臨床重點�？平ㄔO項目[財社(2010)305號] 重慶市自然科學基金(2010BB5390) 重慶市衛(wèi)生局課題(2010-2-090)~~
【分類號】：R394.3
【正文快照】： 慢性乙型肝炎病毒(hepatititis B virus,HBV)與肝細胞肝癌發(fā)生的關系密切,是肝細胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)發(fā)生的主要危險因素之一[1]。在我國,慢性HBV感染已成為HCC的首要原因,各種遺傳學和表觀遺傳學失調均可致HBV感染相關性肝癌[2-3]。HBV基因編碼的X蛋白(HBx)作

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