本文關(guān)鍵詞：HBx介導(dǎo)miR-221上調(diào)-ERα下調(diào)致HepG2細(xì)胞惡性增殖

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【摘要】：目的探討microRNA221(miR-221)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染相關(guān)性肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的促癌功能以及HBV基因編碼的X蛋白(HBx)誘導(dǎo)miR-221上調(diào)促進(jìn)HepG2細(xì)胞異常增殖的分子機(jī)制。方法重組HBx腺病毒(Ad-HBx)感染人肝癌HepG2細(xì)胞,熒光定量PCR檢測HepG2-HBx細(xì)胞中miR-221和ERα mRNA表達(dá)的變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期,Western blot檢測雌激素受體α(estrogen receptorα,ERα)蛋白表達(dá)水平變化,分別用miR-221 mimic和miR-221 inhibitor轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞后,熒光定量PCR檢測HepG2-HBx細(xì)胞中miR-221和ERαmRNA表達(dá)變化;Western blot檢測ERα蛋白水平表達(dá)變化。結(jié)果 RT-PCR實(shí)驗(yàn)證實(shí),adv-HBx感染HepG2細(xì)胞后,HBx在HepG2細(xì)胞中高效表達(dá);感染48 h后,HBx蛋白可顯著上調(diào)miR-221[(495.84±61.16)vs(239.25±21.15),P0.05]并抑制ERα蛋白[(0.24±0.01)vs(0.61±0.02),P0.05]的表達(dá)水平,同時(shí)促進(jìn)HepG2細(xì)胞異常增殖[(31.73±3.53)%vs(56.08±1.56)%,P=0.01]。miRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)及Western blot證實(shí):miR-221抑制ERα蛋白的表達(dá)(P0.05),miR-221抑制劑促進(jìn)ERα蛋白的表達(dá)(P0.05)。結(jié)論 HBx可能通過上調(diào)miR-221進(jìn)而下調(diào)ERα對肝癌的保護(hù)性效應(yīng)而促進(jìn)肝癌細(xì)胞異常增殖,靶向miR-221的策略具有抑制肝癌細(xì)胞增殖的治療潛能。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： HBx蛋白 miR- 雌激素受體α HepG細(xì)胞 增殖
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81071621,30973378,81101826,81272545) 國家臨床重點(diǎn)�？平ㄔO(shè)項(xiàng)目[財(cái)社(2010)305號] 重慶市自然科學(xué)基金(2010BB5390) 重慶市衛(wèi)生局課題(2010-2-090)~~
【分類號】：R394.3
【正文快照】： 慢性乙型肝炎病毒(hepatititis B virus,HBV)與肝細(xì)胞肝癌發(fā)生的關(guān)系密切,是肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素之一[1]。在我國,慢性HBV感染已成為HCC的首要原因,各種遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)失調(diào)均可致HBV感染相關(guān)性肝癌[2-3]。HBV基因編碼的X蛋白(HBx)作

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10 張s，

本文編號：703322