Kin17表達(dá)促進(jìn)乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A增殖
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【摘要】:Kin17是一個(gè)與DNA復(fù)制、DNA修復(fù)有關(guān)的蛋白質(zhì),在人類的各種組織中表達(dá)均很低.目前乳腺上皮細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的分子機(jī)制尚未闡明.為了探討Kin17與乳腺上皮細(xì)胞增殖的關(guān)系,檢測(cè)了Kin17在不同增殖狀況下的MCF-10A細(xì)胞中的表達(dá)情況,并把KIN17基因插入真核表達(dá)載體pcDNA3.1-(+)中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pcDNA3.1-Kin17,通過轉(zhuǎn)染MCF-10A細(xì)胞,檢測(cè)Kin17的表達(dá)對(duì)MCF-10A細(xì)胞的增殖、DNA復(fù)制活性及信號(hào)分子表達(dá)的影響;同時(shí),在轉(zhuǎn)染Kin17特異性小干擾RNA(siRNA_Kin17)后,分析MCF-10A細(xì)胞的Kin17表達(dá)及細(xì)胞生長(zhǎng)狀況.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,經(jīng)高濃度血清刺激后,細(xì)胞中Kin17表達(dá)升高,而且生長(zhǎng)越快的細(xì)胞,Kin17表達(dá)越強(qiáng);轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒pcDNA3.1-Kin17明顯提高了MCF-10A細(xì)胞中Kin17的表達(dá),同時(shí)Kin17的上調(diào)表達(dá)促進(jìn)了細(xì)胞的增殖速度與DNA復(fù)制活性,增強(qiáng)了cyclin D1的表達(dá)水平.當(dāng)轉(zhuǎn)染siRNA_Kin17時(shí)使Kin17含量下調(diào),MCF-10A細(xì)胞生長(zhǎng)速度的抑制不顯著.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Kin17與乳腺上皮細(xì)胞的DNA復(fù)制及生長(zhǎng)增殖密切相關(guān).對(duì)Kin17在乳腺上皮細(xì)胞增殖中的作用及分子調(diào)控機(jī)制的深入探討,將有助于揭示乳腺癌細(xì)胞快速增殖的潛在機(jī)制.
【作者單位】: 廣東醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院;廣東省婦幼保健院病理科;
【關(guān)鍵詞】: Kin 細(xì)胞增殖 乳腺上皮細(xì)胞 真核表達(dá)載體
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81201831) 廣東省自然科學(xué)基金(No.S2012040006310) 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究基金項(xiàng)目(No.B2012266)~~
【分類號(hào)】:R346
【正文快照】: 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)第29卷乳腺癌是女性中發(fā)病率最高的腫瘤,給女性的身體健康造成了極大的威脅[1].很多乳腺癌患者在手術(shù)后易復(fù)發(fā),近50%的患者對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性,臨床上對(duì)轉(zhuǎn)移性乳腺癌尚無有效的對(duì)策[2,3].這迫切需要深入認(rèn)識(shí)乳腺癌的發(fā)病機(jī)制,尋找更理想的治療方
【相似文獻(xiàn)】
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10 李sビ,
本文編號(hào):698658
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