本文關(guān)鍵詞：病證結(jié)合T2DM胃粘膜損傷動(dòng)物模型的建立及相關(guān)研究

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【摘要】：目的：糖尿病的全球發(fā)病率正呈逐年上升趨勢(shì),而胃腸損傷為其常見(jiàn)并發(fā)癥之一,人類(lèi)健康將受到嚴(yán)重威脅。由于目前中醫(yī)臨床辨證帶有較強(qiáng)的主觀性,限制了中醫(yī)藥在治療糖尿病方面的推廣應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)研究病證結(jié)合2型糖尿病胃粘膜損傷大鼠模型的建立方法,并在中醫(yī)整體觀念及辨證論治等理論指導(dǎo)下,用相關(guān)中藥治療,采集中醫(yī)四診信息,進(jìn)行系統(tǒng)的中醫(yī)辨證,將證候客觀化、計(jì)量化。探討T2DM胃粘膜損傷大鼠胃組織MUC1、COX-1、COX-2、cNOS、iNOS表達(dá)水平的變化及其脾氣虛證的時(shí)間窗和相關(guān)中藥干預(yù)的作用,以進(jìn)一步探求其縱向病機(jī)發(fā)展規(guī)律。方法：將50只SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為正常組10只及造模組40只,造模組飼以高脂高糖飼料,正常組飼以全價(jià)普通飼料。實(shí)驗(yàn)第5周,造模組腹腔注射1%STZ溶液(劑量：35mg/kg),正常組腹腔注射同等劑量的檸檬酸鈉緩沖液。注射STZ 72h后監(jiān)測(cè)隨機(jī)血糖,連續(xù)3次血糖值16.7 mmol/L且有多飲、多食、多尿癥狀,入選糖尿病動(dòng)物模型,進(jìn)而用30%乙醇灌胃,空白組給予同等劑量的生理鹽水灌胃。1次/周,連續(xù)4周。將造模組入選為糖尿病模型的大鼠,再按隨機(jī)區(qū)組法,細(xì)分為模型組、補(bǔ)中益氣丸組、金匱腎氣丸組、補(bǔ)中益氣丸+金匱腎氣丸組�？瞻捉M、模型組,第6周起等體積生理鹽水灌胃；各治療組于實(shí)驗(yàn)第6周起給予相應(yīng)中藥灌胃治療,但補(bǔ)中+金匱組,先予補(bǔ)中丸治療,待出現(xiàn)腎虛表征時(shí)再予金匱丸治療。每日1次,連續(xù)12周。定期尾尖采血監(jiān)測(cè)大鼠隨機(jī)血糖水平及檢測(cè)糖耐量水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)行空腹血糖、血清INS、GLP-1、SOD、MDA、NO檢測(cè),并計(jì)算胰島素相關(guān)指數(shù)。心臟、肝臟、脾臟、腎臟、胃、小腸及胰腺作HE病理制片,胃做免疫組化檢測(cè)及PcrCOX-2, PcriNOS檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)大鼠在2型糖尿病成模后治療前及治療后每2周行1次中醫(yī)四診辨證的相關(guān)檢測(cè),以進(jìn)行辨證分析,連續(xù)12周。結(jié)果：(1)病理HE制片光鏡下觀察結(jié)果：①胃：空白組正常；模型組符合胃粘膜損傷病理改變,并可見(jiàn)潰瘍形成,黏膜缺損直達(dá)肌層；其余組鏡下所見(jiàn)均與空白組相似。②心臟：空白組正常；模型組有病理改變,并與補(bǔ)中組及補(bǔ)中+金匱組相似；金匱組鏡下所見(jiàn)與空白組相似。③腎臟：空白組正常；模型組有病理改變,并與補(bǔ)中組、金匱組、補(bǔ)中+金匱組相似,但金匱組腎小管上皮細(xì)胞水腫較輕微。④胰腺：空白組正常；模型組符合T2DM病理改變；各治療組的胰腺組織有不同程度的病理改變,但金匱組較接近空白組。⑤各實(shí)驗(yàn)組均未見(jiàn)肝、脾、小腸的組織學(xué)形態(tài)改變。(2)實(shí)驗(yàn)一檢測(cè)結(jié)果：①模型組與空白組的隨機(jī)血糖、糖耐量檢測(cè)、胰島素抵抗指數(shù)、胰島素敏感指數(shù)及胰島素分泌指數(shù)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但胰島素?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。②模型組與空白組的MDA比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。③造模成功初期及實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),空白組大鼠均如常；模型組大鼠符合造模成功的癥狀和征象且實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)均有所加重。④造模成功初期為氣盛證,實(shí)驗(yàn)第11周出現(xiàn)脾氣虛證。(3)實(shí)驗(yàn)二檢測(cè)結(jié)果：①補(bǔ)中組降空腹血糖效最佳,并和模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。②胃粘膜損傷的發(fā)病機(jī)理與胃粘膜蛋白有一定關(guān)系,中藥治療有效,金匱組療效最好,并與空白組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。③血清的SOD抑制率、SOD活力、INS、GLP-1、NO和胃的Western-blot檢測(cè)的PcrCOX2檢測(cè)值的區(qū)組間比較、組間比較及兩兩比較,均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。④各治療組大鼠的鼻部、吻部、舌象、爪部色淡暗程度由輕到重依次為：補(bǔ)中+金匱組、補(bǔ)中組、金匱組。全病程呈陰虛征象,空白組與模型組、補(bǔ)中組、金匱組及補(bǔ)中+金匱組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。⑤病程初期用較少量補(bǔ)中丸治療有效,并與模型組、金匱組及補(bǔ)中+金匱組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。體質(zhì)量對(duì)陰盛衰度有影響且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。⑥全病程均呈胃熱征象,模型組和金匱組各組縱向比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。體質(zhì)量對(duì)胃熱程度有影響且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。⑦病程初期多呈氣盛證,中期呈短暫偏氣虛證,后期多呈氣盛或偏氣盛證。初期不宜單獨(dú)用較大量金匱丸治療,金匱組縱向比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。⑧全病程的血盛衰度基本正常,模型組縱向比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)成功地建立了病證結(jié)合T2DM(飲食不節(jié)致消渴)胃粘膜損傷大鼠模型,成模率為60%,T2DM的成模率為81.25%。其病程初期為氣盛證型,實(shí)驗(yàn)研究的第11周為脾氣虛證的時(shí)間窗。T2DM胃黏膜損傷大鼠代謝異常,氧化自由基升高,其發(fā)病機(jī)理與胃粘膜蛋白有一定的關(guān)系,可能與COX2過(guò)量分泌、iNOS分泌不足有關(guān)。中藥治療有效,補(bǔ)中+金匱組療效最好。臟器指數(shù)結(jié)果提示肝臟、脾臟、胰腺、腎臟有一定程度損傷。各治療組大鼠的鼻部、吻部、舌象、爪部色淡暗程度由輕到重依次為：補(bǔ)中+金匱組、補(bǔ)中組、金匱組。T2DM胃黏膜損傷大鼠全病程的血盛衰度基本正常、均呈陰虛征象、胃熱征象及幾乎均呈氣盛征象,并伴有不同程度的瘀血征象。體質(zhì)量對(duì)陰盛衰度、胃熱程度有影響。體質(zhì)量均可作為陰盛衰度、胃熱程度各自相應(yīng)的特有征象。體質(zhì)量與SOD抑制率、SOD活力、NO、GLP1各血清檢測(cè)值無(wú)關(guān)。T2DM胃黏膜損傷大鼠(飲食不節(jié)致消渴)之根本病機(jī)為陰虛燥熱,其病機(jī)的縱向發(fā)展規(guī)律是：胃熱傷陰,燥熱內(nèi)生,燥熱傷肺,進(jìn)而及腎、脾等,并伴有不同程度的瘀血征象,若治療方法不當(dāng)或不給予任何干預(yù)措施,最終波及三焦或最終導(dǎo)致陰陽(yáng)兩虛證或甚至陰不斂陽(yáng)之亡陽(yáng)證而死亡。
【關(guān)鍵詞】：病證結(jié)合 2型糖尿病 中醫(yī)病機(jī) 中醫(yī)四診 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R259;R-332
【目錄】：

• 摘要3-6
• Abstract6-13
• 引言13-15
• 第一章 文獻(xiàn)研究15-26
• 第一節(jié) 糖尿病胃腸損傷在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究進(jìn)展15-18
• 一、糖尿病糖病理學(xué)機(jī)制研究15-16
• 二、糖尿病胃腸損傷與MUC、COX、NOS的關(guān)系16-18
• 第二節(jié) 糖尿病胃腸損傷在中醫(yī)學(xué)研究進(jìn)展18-22
• 一、糖尿病的病因病機(jī)18-20
• 二、中藥對(duì)糖尿病的干預(yù)作用20-22
• 第三節(jié) 糖尿病動(dòng)物模型研究概況22-26
• 一、糖尿病的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型22-23
• 二、糖尿病的中醫(yī)證候動(dòng)物模型23-26
• 第二章 實(shí)驗(yàn)研究26-120
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)研究思考26-31
• 一、建立病證結(jié)合T2DM胃粘膜損傷動(dòng)物模型的重要意義26
• 二、病證結(jié)合T2DM胃粘膜損傷動(dòng)物模型證候量化的實(shí)驗(yàn)研究?jī)?yōu)勢(shì)26
• 三、實(shí)驗(yàn)研究目的及意義26-27
• 四、研究?jī)?nèi)容27-28
• 五、創(chuàng)新性28-31
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)一 病證結(jié)合T2DM胃粘膜損傷動(dòng)物模型的建立31-57
• 一、材料與方法31-34
• 二、檢測(cè)指標(biāo)與方法34-42
• 三、病證結(jié)合2型糖尿病胃粘膜損傷大鼠模型的判定標(biāo)準(zhǔn)42-43
• 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析43
• 五、檢測(cè)結(jié)果分析43-54
• 六、結(jié)論54-55
• 七、討論55-57
• 第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)二 T2DM胃粘膜損傷大鼠的中藥治療作用及病機(jī)研究57-120
• 一、材料與方法57
• 二、檢測(cè)指標(biāo)與方法57
• 三、中藥治療病證結(jié)合T2DM胃粘膜損傷大鼠模型的作用及中醫(yī)病機(jī)的判定標(biāo)準(zhǔn)57-58
• 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析58
• 五、檢測(cè)結(jié)果分析58-115
• 六、結(jié)論115-116
• 七、討論116-120
• 結(jié)語(yǔ)120-125
• 一、結(jié)論120-122
• 二、創(chuàng)新性122-124
• 三、不足124
• 四、展望124-125
• 參考文獻(xiàn)125-132
• 附錄132-135
• 在校期間發(fā)表論文情況135-136
• 致謝136-137

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：671562