目的:在慢性間歇性缺氧狀態(tài)下建立心房纖維化模型后,使用高通量測(cè)序技術(shù)分析心房組織中的lncRNA表達(dá)譜,通過RT-PCR驗(yàn)證深度測(cè)序結(jié)果的可靠性,并進(jìn)行生物學(xué)分析,為心房纖維化的上游治療方法提供新的思路及方向。方法:(1)建立大鼠慢性間歇缺氧心房纖維化模型將40只SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(C組),間歇缺氧組(CIH組),通過對(duì)CIH組大鼠連續(xù)間歇缺氧4周建立大鼠心房纖維化模型。建模完成后檢查兩組大鼠心臟超聲,同時(shí)測(cè)量大鼠血壓、心電圖。最后獲取大鼠心房組織后通過HE染色觀察模型組與對(duì)照組心肌細(xì)胞的排列及大小;Masson染色比較對(duì)照與模型組心房組織膠原纖維含量的變化;免疫組織化學(xué)及Western bolt比較兩組纖維化相關(guān)因子(Ⅰ型膠原、 Ⅱ Ⅲ型膠原、CTGF、TGF-β1)的變化,從而驗(yàn)證模型建立成功。(2)慢性間歇缺氧模型中心房組織的lncRNA表達(dá)譜研究采用高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)9對(duì)心房組織中l(wèi)ncRNA的表達(dá)譜,并篩選差異表達(dá)lncRNA,繪制火山圖、聚類圖等顯示差異表達(dá)的lncRNAs。隨機(jī)選取5個(gè)差異表達(dá)的lncRNAs(NONRATT011456.2,NONRATT013797....

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號(hào)說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、建立慢性間歇缺氧大鼠心房纖維化模型
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
        1.1.3 建立心房纖維化模型
        1.1.4 心臟彩超測(cè)量
        1.1.5 血壓、心電圖監(jiān)測(cè)
        1.1.6 心房組織獲取
        1.1.7 心房組織固定、脫水、包埋及切片
        1.1.8 HE染色
        1.1.9 Masson染色
        1.1.10 免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry,IHC)染色
        1.1.11 Western Blot實(shí)驗(yàn)
        1.1.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 基礎(chǔ)參數(shù)及心臟超聲資料
        1.2.2 心電、血壓指標(biāo)
        1.2.3 心房組織病理學(xué)變化
        1.2.4 Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、慢性間歇缺氧模型中心房組織lncRNA的表達(dá)譜研究
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備及試劑
        2.1.3 LncRNA表達(dá)譜的鑒定
        2.1.4 RT-PCR實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證高通量測(cè)序結(jié)果
        2.1.5 生物信息學(xué)分析
        2.1.6 構(gòu)建lncRNA-miRNA-mRNA網(wǎng)絡(luò)
        2.1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 RNA質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果
        2.2.2 原始數(shù)據(jù)質(zhì)量控制
        2.2.3 大鼠心房組織lncRNA一般特性
        2.2.4 差異lncRNA篩選
        2.2.5 差異表達(dá)基因的火山圖
        2.2.6 LncRNA的聚類分析
        2.2.7 RT-PCR法驗(yàn)證差異表達(dá)的lncRNA
        2.2.8 GO分析
        2.2.9 KEGG結(jié)果
        2.2.10 lncRNA-miRNA-mRNA網(wǎng)絡(luò)圖
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
論文局限性
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 LncRNA與心血管疾病的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：4032799