該文探討了SIRT3激動(dòng)劑(Honokiol,HKL)對(duì)乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的影響。培養(yǎng)HepG2-NTCP和人原代肝細(xì)胞(primary human hepatocytes,PHH),感染HBV顆粒后,用Honokiol(5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L)處理細(xì)胞后繼續(xù)培養(yǎng)10天,通過熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs水平,Southern blot實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步檢測(cè)胞內(nèi)HBV DNA水平。構(gòu)建SIRT3-KO細(xì)胞,檢測(cè)敲除SIRT3后,Honokiol對(duì)細(xì)胞內(nèi)HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs的影響。通過小鼠尾靜脈高壓注射pCMV-KRAB-Cre質(zhì)粒和precccDNA質(zhì)粒構(gòu)建持續(xù)感染小鼠模型,一周后腹腔注射Honokiol持續(xù)20天。熒光定量PCR檢測(cè)小鼠血清中HBV DNA拷貝數(shù),肝組織內(nèi)HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs水平。結(jié)果表明,Honokiol濃度依賴性地抑制HepG2-NTCP和PHH細(xì)胞內(nèi)HBV DNA以及HBV RNAs水平,此外,Hon...

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 HBV DNA的提取及Southern blot實(shí)驗(yàn)
        1.2.3 血清及肝組織HBV DNA的提取
        1.2.4 Hirt法提取HBV cccDNA
        1.2.5 熒光定量PCR
        1.2.6 MTT實(shí)驗(yàn)
        1.2.7 Western blot實(shí)驗(yàn)
        1.2.8 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        1.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 HKL對(duì)HepG2-NTCP和PHH細(xì)胞毒性的影響
    2.2 HKL對(duì)HepG2-NTCP和PHH細(xì)胞HBV DNA水平的影響
    2.3 HKL對(duì)HepG2-NTCP和PHH細(xì)胞HBV RNAs水平的影響
    2.4 HKL對(duì)HepG2-NTCP和PHH細(xì)胞HBV cccDNA水平及轉(zhuǎn)錄活性的影響
    2.5 HKL抑制HBV復(fù)制和轉(zhuǎn)錄與SIRT3相關(guān)
    2.6 在HBV持續(xù)感染小鼠模型中驗(yàn)證HKL的抗病毒作用
3 討論



本文編號(hào)：3877960