目前由于缺失特異性的商品化抗體,不同tau異構(gòu)體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中,尤其在朊病毒病中的變化鮮有報道。本研究利用雜交瘤技術(shù)制備了抗tau蛋白外顯子2和10的單克隆抗體,同時對制備抗體的靈敏度、特異性、免疫反應(yīng)親和力、種屬反應(yīng)性等方面進行了評價,隨后對制備的抗體應(yīng)用范圍進行了摸索。結(jié)果顯示,制備的四株單抗特異性高、靈敏度好,尤其可以識別小鼠腦組織中的tau蛋白。制備的四株單抗可用于間接細胞免疫熒光實驗和多種感染神經(jīng)細胞和感染小鼠模型腦組織的蛋白免疫印跡和免疫組織化學(xué)實驗。綜上,本研究制備了四株tau外顯子特異性單抗,上述單抗具有較廣的應(yīng)用范圍,將成為神經(jīng)退行性疾病中tau蛋白檢測的有力工具。

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【文章目錄】：
材料與方法
    1 Tau蛋白外顯子特異性單克隆抗體的制備
    2朊病毒毒株及細胞株
    3腦組織勻漿制備
    4 ELISA
    5免疫組織化學(xué)染色（IHC)
    6生物膜干涉分析
    7細胞免疫熒光檢測
    8 Weatern Blot
    9統(tǒng)計分析
結(jié)果
    1人tau蛋白外顯子2和10單抗的制備
    2制備單抗的特異性和敏感性評價
    3制備單抗與抗原親和力的動力學(xué)評價
    4制備單抗的種屬反應(yīng)性
    5制備單抗的初步應(yīng)用
討論



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