目的在建立的人增生性瘢痕力學(xué)模型上,通過給予不同時(shí)間段的持續(xù)的機(jī)械加載張力,研究正常的人體成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的過程中α-SMA和Intergin-β₁的表達(dá)及意義。為進(jìn)一步研究α-SMA和Intergin-β₁的表達(dá)對(duì)增生性瘢痕形成提供理論依據(jù)。方法取增生性瘢痕患者接受瘢痕切除術(shù)后獲得的瘢痕組織和正常皮膚真皮組織,通過組織塊體外培養(yǎng)法分別培養(yǎng)出增生性瘢痕成纖維細(xì)胞(HSFB)和正常皮膚成纖維細(xì)胞(NSFB),酶消化法獲取第4-8代細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。將兩種細(xì)胞分別設(shè)立機(jī)械牽張組(實(shí)驗(yàn)組)和不牽張組(對(duì)照組)。運(yùn)用多通道應(yīng)力加載系統(tǒng),給予實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞0.1Hz、10%牽張幅度和正弦波形的周期性機(jī)械牽張力,每天持續(xù)牽張時(shí)間為4h,時(shí)間段設(shè)定為³d、⁵d、⁷d;不加載機(jī)械牽張力的對(duì)照組正常培養(yǎng)條件下培養(yǎng)相同的時(shí)間。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞培養(yǎng)到3d、5d、7d后,對(duì)各組細(xì)胞分別進(jìn)行以下檢測(cè):細(xì)胞免疫化學(xué)染色(ICC)檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá),細(xì)胞免疫熒光染色(...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第1章 材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本與材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來源
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
第2章 實(shí)驗(yàn)方法
    1 實(shí)驗(yàn)分組及實(shí)驗(yàn)條件
    2 細(xì)胞的分離培養(yǎng)、傳代、凍存及復(fù)蘇
        2.1 細(xì)胞的分離培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞的傳代
        2.3 細(xì)胞的凍存
        2.4 細(xì)胞的復(fù)蘇
    3 細(xì)胞免疫化學(xué)染色(Immunocytochemical staining,ICC)
        3.1 樣品準(zhǔn)備
        3.2 操作步驟
    4 細(xì)胞免疫熒光染色(Immunofluorescence,IF)
        4.1 樣品準(zhǔn)備
        4.2 操作步驟
    5 蛋白免疫印跡(Western blot,WB)
        5.1 總蛋白的提取及樣品制備
        5.2 Western blot
    6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1 PCNA在不同處理組細(xì)胞中的表達(dá)情況
    2 α-SMA的表達(dá)情況
    3 Integrin-β₁ 的表達(dá)情況
第4章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄或縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3792213