目的探討重組旋毛蟲半胱氨酸蛋白酶抑制（rTs-Cys）對體外誘導(dǎo)骨髓來源巨噬細(xì)胞（BMDMs）極化的調(diào)控作用。方法獲取BMDMs并培養(yǎng)至條件培養(yǎng)基中,7d后獲取成熟BMDMs。將此BMDMs分為陰性對照組（A組）、陽性對照組（B組）、單獨(dú)重組蛋白組（C組）和蛋白共培養(yǎng)組（D組）,A組細(xì)胞給予10 ng/mLγ-干擾素（IFN-γ）和100 ng/mL脂多糖（LPS）刺激,B組細(xì)胞給予10 ng/mL白細(xì)胞介素（IL）-4和10 ng/mL IL-10刺激,C組細(xì)胞給予1_μg/mL rTs-Cys干預(yù),D組細(xì)胞給予1_μg/mL rTs-Cys、10 ng/mL IFN-γ及100 ng/mL LPS刺激。干預(yù)24 h后,收集細(xì)胞及培養(yǎng)上清,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞中F4/80⁺、CD11b⁺、CD206⁺和CD11c⁺細(xì)胞比例,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、IL-10及轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 rTs-Cys蛋白表達(dá)及鑒定
        2.2 BMDMs獲取及培養(yǎng)
        2.3 BMDMs極化
        2.4 極化后巨噬細(xì)胞CD11c+、CD206+比例檢測
        2.5 CD86+、CD206+蛋白表達(dá)檢測
        2.6 細(xì)胞因子測定
    3 倫理學(xué)聲明
    4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1 rTs-Cys的的表表達(dá)達(dá)、純化和鑒定
    2 rTs-Cys誘導(dǎo)MM2型巨噬細(xì)胞比例增加并抑制向MM1型極化
    3 rTs-Cys干預(yù)后BMDMs表型鑒定及極化形態(tài)
    4 極化后BMDMs分泌的細(xì)胞因子變化
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]源自日本血吸蟲的半胱氨酸蛋白酶抑制劑對葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的影響[J]. 褚亮,李徽徽,王書書,袁圓,姜輝,徐嵐松,賀文欣,王守祥,趙木子,白永生,魏明,劉濤,盛潔,陳興智,方強(qiáng),楊小迪.  中國血吸蟲病防治雜志. 2018(03)
[2]兩種蠕蟲半胱氨酸蛋白酶抑制劑對小鼠腹腔滲出細(xì)胞一氧化氮產(chǎn)生及細(xì)胞因子分泌的影響[J]. 楊小迪,李徽徽,陶志勇,方強(qiáng),程洋,徐嵐松,薛仁敏,陳勇,夏惠,張慧,姜輝,劉濤,彭琨,陳興智.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2017(02)
[3]小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)及極化相關(guān)實(shí)驗(yàn)方法的建立[J]. 任凱夕,趙詣林,金超,韓驊.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2013(03)
[4]旋毛蟲半胱氨酸蛋白酶抑制劑基因TsCystatin1的克隆及序列分析[J]. 姚菊霞,李文卉,蓋文燕,曲自剛,謝志宙,王艷華,張德林,付寶權(quán).  中國獸醫(yī)科學(xué). 2011(06)



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