目的:肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae,Mp）是社區(qū)獲得性肺炎的主要病原體,目前尚無有效的疫苗預(yù)防其感染。本研究擬探究Mp活菌經(jīng)胃腸道接種C57BL/6J小鼠后對其呼吸道感染的免疫保護(hù)作用和初步機(jī)制。方法:培養(yǎng)Mp標(biāo)準(zhǔn)株M129,轉(zhuǎn)種于PPLO固體培養(yǎng)基計數(shù)每mL菌落形成單位（CFU）。將200μL含2.0×10⁷ CFU的Mp連續(xù)7天經(jīng)灌胃免疫6-8周齡雌性C57BL/6J小鼠,灌胃第3天和第8天分別處死小鼠,固體培養(yǎng)計數(shù)全肺組織Mp菌落數(shù)、實(shí)時定量PCR（qPCR）檢測小鼠糞便和肺組織Mp載量;將腸道組織和肺組織固定、病理切片后HE染色鏡檢分析病理改變和進(jìn)行肺組織病理評分。末次免疫4w和16w后,用50μL含1.0×10⁷ CFU的Mp分別滴鼻感染免疫組小鼠和對照未免疫組小鼠,觀察小鼠體重等機(jī)能指標(biāo),于Mp攻擊后的第3天、第7天、第14天分別處死小鼠,固體培養(yǎng)計數(shù)肺組織Mp菌落數(shù)、qPCR檢測肺組織勻漿Mp載量;病理切片分析小鼠肺組織病理學(xué)改變;酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測肺組織上清中促炎細(xì)胞因子腫瘤壞死因子α... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Mp在PPLO肉湯培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象Fig4.1CultureofM.pneumoniaeinthePPLObrothmedium

圖 4.2 Mp 在固體培養(yǎng)基中生長情況 (10×)Fig 4.2 Colonies of M. pneumoniae in solid medium(10×)左圖：光學(xué)顯微鏡直接觀察 Mp 菌落； 右圖：Dienes 染色后顯微鏡觀察 Mp 菌

擴(kuò)增 Mp p1 基因瓊脂糖凝膠電trophoresis of p1 gene amplifica性對照；2: 以 Mp M129 基因 基因組為模板擴(kuò)增 p1 基因（性評估機(jī)能狀況鼠未表現(xiàn)出豎毛、食量減織 Mp 載量及病理改

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肺炎支原體黏附蛋白P30的高效表達(dá)及初步應(yīng)用[J]. 王成紅,于傳亭,張奇舒,李鵬飛,王曉丹,修冰水,張賀秋.  生物技術(shù)通訊. 2014(06)
[2]綿羊肺炎支原體P30-HSP70C融合蛋白的表達(dá)及免疫原性研究[J]. 劉文青,胡明麗,孫紅巖,趙寶華.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2014(11)
[3]IL-2增強(qiáng)肺炎支原體P1C核酸疫苗的肌注免疫效果[J]. 朱翠明,陳蘇芳,余敏君,游曉星,唐雙陽,吳移謀.  中國免疫學(xué)雜志. 2013(06)
[4]肺炎支原體P1C-IL-2融合基因疫苗鼻飼對小鼠免疫效果的檢測[J]. 朱翠明,余敏君,高順利,曾焱華,游曉星,吳移謀.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2013(06)
[5]綿羊肺炎支原體Y98標(biāo)準(zhǔn)株P(guān)30外膜蛋白與IFN-γ的融合表達(dá)及其免疫原性[J]. 張亞寧,劉文青,趙紅艷,張樂祎,趙寶華.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2013(06)
[6]Role of neuronal nitric oxide synthase and inducible nitric oxide synthase in intestinal injury in neonatal rats[J]. Hui Lu, Xin-Dong Xue, Department of Pediatrics, the Second Affiliated Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, Liaoning Province, China Bing Zhu, Department of Cardiac Surgery, the Second Affiliated Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, Liaoning Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2006(27)
[7]肺炎支原體P1蛋白預(yù)防動物支原體肺炎的研究[J]. 賈飛勇,梁東,傅文永,李海波,魯繼榮,陳銀波,李春懷.  中華兒科雜志. 2001(05)



本文編號：3536317