發(fā)布時(shí)間：2021-09-05 07:07

　　乙烷基亞硝基脲（ENU）是一種人工合成的高效烷化劑,能夠以較高的效率誘導(dǎo)DNA突變,從而獲得大量的人類(lèi)疾病小鼠模型,用于人類(lèi)相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制以及基因功能的研究。本研究利用ENU誘變方法,目前獲得7種可遺傳的突變小鼠模型,并對(duì)其中2種角膜病小鼠模型的角膜組織病變特征進(jìn)行研究:1 ENU誘變獲得兩種遺傳性角膜病小鼠模型本研究利用ENU腹腔注射15只8-10周齡雄性野生型C57BL/6J（B6）小鼠,待其恢復(fù)生殖能力后與野生型B6雌鼠配種繁育。經(jīng)過(guò)初步篩選,共獲得36只異常表型小鼠（白斑、瞳孔異位、無(wú)眼、角膜混濁等）。通過(guò)遺傳驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),目前確定了7種可遺傳的突變小鼠模型。本研究將其中2種角膜病小鼠分別命名為Cod1（Corneal disease 1）、Cod2（Corneal disease 2）,并展開(kāi)后續(xù)工作。2Cod1、Cod2小鼠角膜HE染色分析采用HE染色法分析角膜組織發(fā)現(xiàn):（1）正常小鼠角膜整體結(jié)構(gòu)層次分明,上皮細(xì)胞排列整齊,上皮基部平整;角膜基質(zhì)層中可見(jiàn)平行排列的膠原纖維,不含血管;內(nèi)皮細(xì)胞明顯。（2）2周齡Cod1小鼠角膜基質(zhì)層底部局部膠原纖維松散,部分內(nèi)皮細(xì)胞層缺... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１野生型及ＣＭ／小鼠角膜ＨＥ染色結(jié)果（比例尺＝１００?Ｍｍ）??Ｆｉｇ．?２－１?ＨＥ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ａｎｄ?Ｃｏｄ?Ｉ?ｍｉｃｅ?ｃｏｒｎｅａｓ?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?１００?ｊａｍ）??注：箭頭處為新生血管；三角處為內(nèi)皮細(xì)胞層；星號(hào)處為空泡??

?＇ｉ??ｅ／?Ｉ?ｅ??圖２－１野生型及ＣＭ／小鼠角膜ＨＥ染色結(jié)果（比例尺＝１００?Ｍｍ）??Ｆｉｇ．?２－１?ＨＥ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ａｎｄ?Ｃｏｄ?Ｉ?ｍｉｃｅ?ｃｏｒｎｅａｓ?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?１００?ｊａｍ）??注：箭頭處為新生血管；三角處為內(nèi)皮細(xì)胞層；星號(hào)處為空泡??Ｎｏｔｅ：?Ｔｈｅ?ａｒｒｏｗ?ｐｏｉｎｔｓ?ｔｏ?ｎｅｗ?ｂｌｏｏｄ?ｖｅｓｓｅｌｓ；?ｔｈｅ?ｔｒｉａｎｇｌｅｓ?ｐｏｉｎｔ?ｔｏ?ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌ?ｌａｙｅｒｓ；??ｔｈｅ?ａｓｔｅｒｉｓｋ?ｐｏｉｎｔｓ?ｔｏ?ｖａｃｕｏｌｅｓ??（３）?２周齡ＣｏＪ２小鼠角膜基質(zhì)層底部膠原纖維松散（圖２－２Ｃ），８周齡角膜上皮明??顯變薄，角膜基質(zhì)層底部膠原纖維松散，基質(zhì)層出現(xiàn)明顯新生血管（圖２－２?Ｄ箭頭處）。??野生型Ｂ６?ＧＷ２小鼠??雜?Ｉ，１！?＾??＾?＼＼?Ｃ?＼?＼??ｐｉｉｋ?ｖ?、??圖２－２野生型及ＣＭ２小鼠角膜ＨＥ染色結(jié)果（比例尺＝１００叫１）??Ｆｉｇ．?２－２?ＨＥ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ａｎｄ?Ｃｏｄ２?ｍｉｃｅ?ｃｏ

均可表達(dá)Ｋ１２；?２周齡ＣｏＷ小鼠角膜上皮細(xì)胞Ｋ１２表達(dá)明顯減弱且局部為陰性，８周齡??小鼠角膜Ｋ１２表達(dá)増強(qiáng)與野生型小鼠類(lèi)似；２周齡Ｃｏ必小鼠局部角膜上皮細(xì)胞??Ｋ１２為陰性，８周齡角膜Ｋ１２陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少且表達(dá)變?nèi)酰▓D３－２）。??野生型Ｂ６?Ｃｏｒｆ／小鼠?ＣＷ２小鼠??Ｖ?＼?＼?？?ｔ?；．??Ｖ、Ａ?Ｖ?ｉｆｌ?Ｉｖｖ?＾??２周齡?＼?＼?１??＼?＼?Ｉ??＼＇?＼?１??＼?ｗ??８周齡?＼?，／?，＇：．４??＼?＃?—??圖３－２抗Ｋ１２抗體免疫組化結(jié)果（比例尺＝１００阿）??Ｆｉｇ．?３－２?Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｕｓｉｎｇ?ａｎｔｉ－Ｋ１２?ａｎｔｉｂｏｄｙ?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?１００?｜ｉｍ）??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于高通量測(cè)序數(shù)據(jù)構(gòu)建斑馬魚(yú)隱性遺傳突變篩選系統(tǒng)[J]. 張自冠,施靜藝,陳漪,孔杰,陳賽娟,黃金艷.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2016(09)
[2]眼科學(xué)領(lǐng)域發(fā)展態(tài)勢(shì)分析[J]. 何明光.  科學(xué)觀察. 2015(01)
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[9]實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與公共衛(wèi)生安全的思考[J]. 姜光瑤,王琦,何學(xué)令,巫波,別明江,魏小慶.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2010(01)
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博士論文
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碩士論文
[1]乙烷基亞硝基脲誘變眼瞼開(kāi)放小鼠模型角膜組織學(xué)及突變基因研究[D]. 尹依恒.揚(yáng)州大學(xué) 2017
[2]三例眼部突變小鼠的培育、特征分析及一例小眼小鼠突變基因的染色體定位[D]. 李高天.杭州師范大學(xué) 2015
[3]角膜混濁小鼠模型獲得及其分子基礎(chǔ)研究[D]. 倪俊達(dá).揚(yáng)州大學(xué) 2015
[4]可誘導(dǎo)型睪丸特異性啟動(dòng)子Cre工具鼠的建立及HRB2細(xì)胞功能研究[D]. 顧衛(wèi)娟.南京醫(yī)科大學(xué) 2010
[5]用ENU誘導(dǎo)斑馬魚(yú)突變和突變體篩選的初步研究[D]. 金鵬.清華大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3384888