研究目的膝骨關(guān)節(jié)炎是一種包括遺傳、代謝、發(fā)育、應力失衡、創(chuàng)傷、內(nèi)分泌等生物性和機械性因素相互作用,最終導致膝關(guān)節(jié)軟骨變性、軟骨下骨硬化、軟骨下骨囊腫和骨贅形成的慢性、進行性骨關(guān)節(jié)病。相關(guān)數(shù)據(jù)表明其發(fā)病率呈逐年上升趨勢,并趨于年輕化。適宜的運動可以改善膝骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展,但高強度運動則可以造成小鼠創(chuàng)傷性膝關(guān)節(jié)炎。近年來,創(chuàng)傷性膝骨關(guān)節(jié)炎處于高發(fā)狀態(tài),對其機制的研究,病情的防治備受人們矚目。其中理想的造模方式對其復雜的發(fā)病機制研究起著至關(guān)重要的作用,因此,本實驗設計將分別對8周和16周小鼠進行跑臺運動和半月板失穩(wěn)術(shù)（destabilization of the medial meniscus,DMM）手術(shù)建立創(chuàng)傷性膝骨關(guān)節(jié)炎模型,并對其效果進行比較,為后續(xù)進行的作用機制和運動康復作用的探討提供可行的、高效的、可重復的、易操作、貼近實際的動物造模方式。研究方法8周齡,20周齡雄性C57BL/6小鼠各32只,兩種不同周齡小鼠各分別隨機分為對照組（n=8）,手術(shù)組（n=8）,假手術(shù)組（n=8）,運動組（n=8）。對照組不施加任何干預,常規(guī)飼養(yǎng);手術(shù)組對小鼠雙側(cè)膝關(guān)節(jié)進行DMM手術(shù);假手術(shù)組小鼠... 

【文章來源】：上海體育學院上海市

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

運動對小鼠體重的影響（A：8周齡小鼠體重的變化，B：20周齡小鼠體重變化，NOR：空白對照組，DMM：DMM手術(shù)組，SHAM：假手術(shù)組，RUN：跑臺組

圖2.不同造模方式對不同周齡小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)和軟骨細胞的影響（n=8，A：8周齡和20周齡小鼠膝關(guān)節(jié)HE染色圖，X100；B：小鼠膝關(guān)節(jié)HE染色關(guān)節(jié)軟骨面Mankin's 評分*P<0.05, **P<0.01,RUN vsNOR ,DMM vs SHAM;#P<0.05,RUN vs DMM. C：小鼠膝關(guān)節(jié)HE染色關(guān)節(jié)軟骨細胞Mankin's 評分，###P<0.001,RUN vs DMM. 處表示軟骨損傷）3.3 跑臺和DMM手術(shù)造成小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨鈣化關(guān)節(jié)軟骨放射層與鈣化軟骨之間有一種特殊的染色線，稱之為潮線，通過番紅固綠染色和OARSI評分可以明顯地觀察到潮線是夠完整，軟骨是否出現(xiàn)鈣化，且能夠判斷是否有血管從軟骨下骨穿過鈣化軟骨到達潮線并作出比較。番紅主要染軟骨組織為紅色，固綠主要染骨組織為淺綠色。如圖3所示，與正常組相比，跑臺運動造成潮線破壞，軟骨鈣化現(xiàn)象（圖A-1,2,5,6）；與SHAM組相比，DMM手術(shù)也出現(xiàn)潮線破壞，軟骨鈣化的現(xiàn)象，且DMM組較RUN組更為嚴重（圖A-3，4，7，8）。且有顯著性差異（圖B）。RUN vs NOR, DMM vs SHAM *P<0.05，**P<0.01，***P<0.001 ；RUN vs DMM,#P<0.05,##P<0.01.

圖3.不同造模方式對不同周齡小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨鈣化的影響（n=8，A：各組小鼠膝關(guān)節(jié)番紅固綠染色圖，X100.B：各組小鼠OARSI評分。(*P<0.05, **P<0.01 RUN vs NOR, DMM vs SHAM;#P<0.05, ##P<0.01 DMM vs RUN， 處表示軟骨鈣化）3.4 跑臺訓練和DMM手術(shù)影響小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨炎癥因子mRNA表達小鼠跑臺運動干預結(jié)束后，提取各組小鼠右膝關(guān)節(jié)，去除附著的肌肉韌帶組織，摘取各組膝關(guān)節(jié)軟骨提取總RNA，運用熒光定量PCR檢測小鼠右膝關(guān)節(jié)軟骨中促炎性細胞因子TNF-α,IL-6,MMP9和二型膠原纖維的mRNA水平。結(jié)果如圖4所示，DMM手術(shù)和跑臺干預加劇了關(guān)節(jié)軟骨中二型膠原纖維的損傷，20周齡小鼠Collagen2 mRNA的水平較8周齡低但無顯著性差異(圖4-A）；促炎性細胞因子TNF-αmRNA水平，跑臺運動較正常組，DMM手術(shù)較SHAM組均出現(xiàn)顯著上調(diào)，且有顯著性差異（圖4-B）；促炎性細胞因子MMP9mRNA水平，跑臺運動較正常組，DMM手術(shù)較SHAM組均出現(xiàn)顯著上調(diào)，并且8周齡組的小鼠，RUN組與DMM組相比明顯升高，均有顯著性差異（圖4-C）；促炎性細胞因子IL-6mRNA水平，跑臺運動相較正常組，DMM手術(shù)相較于SHAM組均出現(xiàn)顯著上調(diào)，并且8周齡和20周齡小鼠RUN組較DMM組明顯升高，均有顯著性差異（圖4-D）。RUN vs NOR, DMM vs SHAM ,*P<0.05,**P<0.01，


本文編號：3373874