研究目的膝骨關(guān)節(jié)炎是一種包括遺傳、代謝、發(fā)育、應(yīng)力失衡、創(chuàng)傷、內(nèi)分泌等生物性和機(jī)械性因素相互作用,最終導(dǎo)致膝關(guān)節(jié)軟骨變性、軟骨下骨硬化、軟骨下骨囊腫和骨贅形成的慢性、進(jìn)行性骨關(guān)節(jié)病。相關(guān)數(shù)據(jù)表明其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì),并趨于年輕化。適宜的運(yùn)動(dòng)可以改善膝骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展,但高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)則可以造成小鼠創(chuàng)傷性膝關(guān)節(jié)炎。近年來,創(chuàng)傷性膝骨關(guān)節(jié)炎處于高發(fā)狀態(tài),對(duì)其機(jī)制的研究,病情的防治備受人們矚目。其中理想的造模方式對(duì)其復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制研究起著至關(guān)重要的作用,因此,本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)將分別對(duì)8周和16周小鼠進(jìn)行跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)和半月板失穩(wěn)術(shù)（destabilization of the medial meniscus,DMM）手術(shù)建立創(chuàng)傷性膝骨關(guān)節(jié)炎模型,并對(duì)其效果進(jìn)行比較,為后續(xù)進(jìn)行的作用機(jī)制和運(yùn)動(dòng)康復(fù)作用的探討提供可行的、高效的、可重復(fù)的、易操作、貼近實(shí)際的動(dòng)物造模方式。研究方法8周齡,20周齡雄性C57BL/6小鼠各32只,兩種不同周齡小鼠各分別隨機(jī)分為對(duì)照組（n=8）,手術(shù)組（n=8）,假手術(shù)組（n=8）,運(yùn)動(dòng)組（n=8）。對(duì)照組不施加任何干預(yù),常規(guī)飼養(yǎng);手術(shù)組對(duì)小鼠雙側(cè)膝關(guān)節(jié)進(jìn)行DMM手術(shù);假手術(shù)組小鼠... 

【文章來源】：上海體育學(xué)院上海市

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

運(yùn)動(dòng)對(duì)小鼠體重的影響（A：8周齡小鼠體重的變化，B：20周齡小鼠體重變化，NOR：空白對(duì)照組，DMM：DMM手術(shù)組，SHAM：假手術(shù)組，RUN：跑臺(tái)組

圖2.不同造模方式對(duì)不同周齡小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)和軟骨細(xì)胞的影響（n=8，A：8周齡和20周齡小鼠膝關(guān)節(jié)HE染色圖，X100；B：小鼠膝關(guān)節(jié)HE染色關(guān)節(jié)軟骨面Mankin's 評(píng)分*P<0.05, **P<0.01,RUN vsNOR ,DMM vs SHAM;#P<0.05,RUN vs DMM. C：小鼠膝關(guān)節(jié)HE染色關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞Mankin's 評(píng)分，###P<0.001,RUN vs DMM. 處表示軟骨損傷）3.3 跑臺(tái)和DMM手術(shù)造成小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨鈣化關(guān)節(jié)軟骨放射層與鈣化軟骨之間有一種特殊的染色線，稱之為潮線，通過番紅固綠染色和OARSI評(píng)分可以明顯地觀察到潮線是夠完整，軟骨是否出現(xiàn)鈣化，且能夠判斷是否有血管從軟骨下骨穿過鈣化軟骨到達(dá)潮線并作出比較。番紅主要染軟骨組織為紅色，固綠主要染骨組織為淺綠色。如圖3所示，與正常組相比，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)造成潮線破壞，軟骨鈣化現(xiàn)象（圖A-1,2,5,6）；與SHAM組相比，DMM手術(shù)也出現(xiàn)潮線破壞，軟骨鈣化的現(xiàn)象，且DMM組較RUN組更為嚴(yán)重（圖A-3，4，7，8）。且有顯著性差異（圖B）。RUN vs NOR, DMM vs SHAM *P<0.05，**P<0.01，***P<0.001 ；RUN vs DMM,#P<0.05,##P<0.01.

圖3.不同造模方式對(duì)不同周齡小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨鈣化的影響（n=8，A：各組小鼠膝關(guān)節(jié)番紅固綠染色圖，X100.B：各組小鼠OARSI評(píng)分。(*P<0.05, **P<0.01 RUN vs NOR, DMM vs SHAM;#P<0.05, ##P<0.01 DMM vs RUN， 處表示軟骨鈣化）3.4 跑臺(tái)訓(xùn)練和DMM手術(shù)影響小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨炎癥因子mRNA表達(dá)小鼠跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)干預(yù)結(jié)束后，提取各組小鼠右膝關(guān)節(jié)，去除附著的肌肉韌帶組織，摘取各組膝關(guān)節(jié)軟骨提取總RNA，運(yùn)用熒光定量PCR檢測(cè)小鼠右膝關(guān)節(jié)軟骨中促炎性細(xì)胞因子TNF-α,IL-6,MMP9和二型膠原纖維的mRNA水平。結(jié)果如圖4所示，DMM手術(shù)和跑臺(tái)干預(yù)加劇了關(guān)節(jié)軟骨中二型膠原纖維的損傷，20周齡小鼠Collagen2 mRNA的水平較8周齡低但無顯著性差異(圖4-A）；促炎性細(xì)胞因子TNF-αmRNA水平，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)較正常組，DMM手術(shù)較SHAM組均出現(xiàn)顯著上調(diào)，且有顯著性差異（圖4-B）；促炎性細(xì)胞因子MMP9mRNA水平，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)較正常組，DMM手術(shù)較SHAM組均出現(xiàn)顯著上調(diào)，并且8周齡組的小鼠，RUN組與DMM組相比明顯升高，均有顯著性差異（圖4-C）；促炎性細(xì)胞因子IL-6mRNA水平，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)相較正常組，DMM手術(shù)相較于SHAM組均出現(xiàn)顯著上調(diào)，并且8周齡和20周齡小鼠RUN組較DMM組明顯升高，均有顯著性差異（圖4-D）。RUN vs NOR, DMM vs SHAM ,*P<0.05,**P<0.01，


本文編號(hào)：3373874