目的:研究周質(zhì)伴侶蛋白SurA對(duì)傷寒沙門菌生物膜形成能力的影響及其潛在機(jī)制。方法:用前期構(gòu)建的surA基因缺陷株、缺陷空載體株及缺陷回補(bǔ)株的生物膜實(shí)驗(yàn),觀察surA基因缺失對(duì)細(xì)菌生物膜形成能力的影響。通過(guò)實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR）檢測(cè)影響生物膜形成的幾個(gè)關(guān)鍵基因在surA缺陷株及野生株中的表達(dá)差異,探索surA影響細(xì)菌生物膜形成的可能通路。通過(guò)電鏡實(shí)驗(yàn)觀察surA缺陷株及野生株的鞭毛表達(dá)情況。最后通過(guò)生物膜實(shí)驗(yàn)觀察鞭毛缺失對(duì)生物膜形成的影響。結(jié)果:與野生株相比,surA缺陷株的生物膜形成能力顯著下調(diào),缺陷株里回補(bǔ)surA后,細(xì)菌的生物膜形成能力恢復(fù)到與野生株相當(dāng)。與野生株相比,surA缺陷株中鞭毛相關(guān)基因的mRNA水平顯著下調(diào)。電鏡結(jié)果顯示,與野生株相比,surA缺陷株的鞭毛表達(dá)數(shù)量顯著減少。鞭毛缺失株（△flhD）幾乎不形成生物膜。結(jié)論:傷寒沙門菌surA基因缺陷可能通過(guò)下調(diào)鞭毛基因表達(dá)來(lái)影響生物膜形成。 

【文章來(lái)源】：南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,40(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

傷寒沙門菌surA基因缺陷株的生物膜實(shí)驗(yàn)

為了探索周質(zhì)伴侶蛋白SurA影響生物膜形成的機(jī)制，我們通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)影響傷寒沙門菌生物膜形成的幾個(gè)胞外基質(zhì)及關(guān)鍵調(diào)控子在野生株(WT)和缺陷株(△surA)中的表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與WT株相比，△surA菌株中鞭毛相關(guān)基因(flhD、fliA、fljB)的mRNA水平顯著下調(diào)，其中flhD和fliB的mRNA水平下降為野生株的25%,fljA mRNA水平下降到野生株的10%(圖2)。說(shuō)明surA基因缺陷后下調(diào)傷寒沙門菌鞭毛表達(dá)。2.3 電鏡觀察surA基因缺陷對(duì)細(xì)菌鞭毛表達(dá)的影響

為觀察傷寒沙門菌鞭毛和細(xì)菌生物膜形成能力的關(guān)系，利用鞭毛一級(jí)調(diào)控子FlhD的缺陷株進(jìn)行生物膜實(shí)驗(yàn)。如圖4所示，鞭毛缺失菌株(△flhD)的生物膜形成能力顯著低于WT菌株；甚至低于△surA菌株的生物膜形成能力�？紤]到我們已經(jīng)證明傷寒沙門菌surA基因缺陷下調(diào)鞭毛相關(guān)基因表達(dá)，因此傷寒沙門菌surA基因缺陷可能通過(guò)下調(diào)鞭毛基因表達(dá)來(lái)影響生物膜形成。圖4 鞭毛缺陷菌株的生物膜實(shí)驗(yàn)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]OsmY缺失對(duì)傷寒沙門菌在高滲應(yīng)激早期基因表達(dá)的影響[J]. 孟彥辰,王菲,杜鴻,翁曉琴,張海方,生秀梅,徐順高,黃新祥.  江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(04)



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