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旋毛蟲絲氨酸蛋白酶的表達(dá)與鑒定及用于免疫診斷的研究

發(fā)布時間:2021-06-05 13:07
  由旋毛蟲引起的旋毛蟲病是一種呈全球性分布的食源性人獸共患寄生蟲病,主要是通過食用含有旋毛蟲感染性幼蟲的生的或者不熟的肉類所導(dǎo)致的。近年來在我國周邊國家如韓國、泰國、老撾、越南等國也已發(fā)生了多次人體旋毛蟲病暴發(fā),因此,旋毛蟲病作為了一種新現(xiàn)和再現(xiàn)的人獸共患疾病,對人體健康、社會、經(jīng)濟均造成了巨大的影響。目前,國內(nèi)外對旋毛蟲病的診斷主要集中在肌肉幼蟲階段的旋毛蟲抗原。國際旋毛蟲病委員會(ICT)建議旋毛蟲肌幼蟲ES抗原可作為診斷旋毛蟲的金標(biāo)準(zhǔn)。然而,當(dāng)旋毛蟲肌幼蟲ES抗原用于檢測旋毛蟲感染小鼠或豬的血清時,抗旋毛蟲抗體IgG直到感染后3-4周才能檢測到陽性;并且感染旋毛蟲的病人在感染28天以后抗旋毛蟲的抗體陽性率才能達(dá)到100%。因此,在旋毛蟲感染后存在有23周的“窗口期”(window phase)。在旋毛蟲的生活史中,腸道感染性幼蟲(IIL)和成蟲是旋毛蟲對宿主腸黏膜的侵入期,其ES蛋白最早與腸黏膜直接接觸并相互作用,能夠接觸宿主的免疫系統(tǒng)首先引起宿主的免疫應(yīng)答;因此,IIL和成蟲的排泄分泌抗原含有刺激宿主產(chǎn)生早期免疫應(yīng)答的主要成分。在旋毛蟲感染后的早期,最早出現(xiàn)... 

【文章來源】:鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:131 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

旋毛蟲絲氨酸蛋白酶的表達(dá)與鑒定及用于免疫診斷的研究


成蟲ES成蟲可溶和肌幼蟲ES檢測感染100條(A),500(B)條旋毛蟲小鼠血清中抗旋毛蟲抗體的陽性率

小鼠血清,抗體水平


圖 1.2 成蟲 ES(A),成蟲可溶(B)和肌幼蟲 ES(C)檢測不同劑量旋毛蟲感染小鼠血清抗體水平(----為 Cut-off 值)圖 1.3 成蟲 ES(A),成蟲可溶(B)和肌幼蟲 ES(C)檢測不同劑量旋毛蟲感染小鼠血清抗體陽性率

小鼠血清,包被,稀釋度,濃度


圖 1.3 成蟲 ES(A),成蟲可溶(B)和肌幼蟲 ES(C)檢測不同劑量旋毛蟲感染小鼠血清抗體陽性率圖 1.4 成蟲 ES 抗原 ELISA 檢測感染 100 條和感染 500 條旋毛蟲肌幼蟲 OD 值,虛線指的是 Cut-off 值,陰影部分指的是肌幼蟲 ES 抗原不能檢測到特異性抗旋毛蟲抗體的區(qū)域2.5 檢測旋毛蟲和其他寄生蟲染的病人血清中抗旋毛蟲抗體水平2.5.1 棋盤滴定法檢測蛋白的最佳包被濃度和血清的稀釋度結(jié)果如下:成蟲 ES 包被濃度 1.5μg/ml,成蟲可溶的包被濃度 1.0μg/ml,肌幼蟲 ES 包被濃度2.5μg/ml 血清稀釋度為 1:200,二抗羊抗人 IgG 稀釋度 1:5000 成蟲 ES 的 Cut-off 0.41,成蟲可溶的 Cut-off 0.47,肌幼蟲 ES 的 Cut-off 0.45。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]云南省瀾滄縣一起旋毛蟲病暴發(fā)的調(diào)查[J]. 王春泉,吳方偉,王興榮,許海兵,李二,龍貴平,李樹春,白美玲,黃艷,魏忠富.  中國熱帶醫(yī)學(xué). 2013(11)
[2]旋毛蟲Ts21重組蛋白的免疫診斷價值及免疫保護作用的研究[J]. 王睿,王中全,崔晶.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2009(01)
[3]旋毛蟲抗原基因Ts43原核表達(dá)及重組蛋白鑒定[J]. 任道鋒,崔晶,王中全,韓化敏.  中國人獸共患病學(xué)報. 2008(06)
[4]小鼠實驗感染不同種旋毛蟲后血清IgG抗體水平的變化[J]. 王潔,崔晶,王中全.  中國病原生物學(xué)雜志. 2007(04)
[5]東方田鼠ADCC體外殺傷日本血吸蟲童蟲效果的初步觀察[J]. 劉金明,傅志強,李浩,魏梅雄,林矯矯.  寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報. 2001(04)



本文編號:3212227

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