本文關鍵詞：細胞凋亡不同階段檢測凋亡率的最佳方法研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探索涵蓋凋亡不同階段的較佳檢測方法,為選擇適當方法全面、準確檢測凋亡率提供參考依據(jù)。方法選取地塞米松(Dexamethasone,DEX)體內(nèi)及體外分別誘導小鼠胸腺細胞凋亡為實驗模型,采用流式細胞術(Flow Cyto Metry,FCM)及DNA瓊脂糖凝膠電泳等方法對處于不同凋亡階段的胸腺細胞凋亡率進行檢測分析,并采用紫外照射的方法誘導胸腺細胞死亡作為對照來檢測各種凋亡檢測方法對凋亡率檢測的準確性進行進一步的驗證評估。結(jié)果1、Annexine V聯(lián)合7-AAD染色流式細胞分析對于早期凋亡胸腺細胞的檢測不僅具有高度靈敏性,而且可有效區(qū)分凋亡與壞死細胞,能夠較好地適用于凋亡率的準確判斷。但當?shù)蛲鲋小⑼砥诩毎乐厥軗p乃至細胞破碎時,其對凋亡與壞死細胞的鑒別能力較差,不能有效反映真實凋亡率。2、瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA Ladder可用于凋亡各階段細胞的定性和定量分析,尤其是對凋亡晚期細胞解體后的DNA碎片,具有獨到的適用性。3、Caspase-3流式及TUNEL鏡下檢測均適用于細胞結(jié)構(gòu)完整時的凋亡定性或定量檢測,但Caspase-3在早期檢測靈敏度方面相對弱于Annexine V,而TUNEL染色假陽性較高且鏡下計數(shù)人為因素易導致較大誤差。結(jié)論凋亡檢測方法很多,對于不同凋亡階段的細胞,每種方法都有其優(yōu)點及不足。為全面和準確地評估細胞凋亡率,最好選取兩種以上互補的方法聯(lián)合檢測。對各期凋亡不確切的較為復雜樣本,Annexine V流式檢測與DNA Ladder定量分析結(jié)合是一種較好的選擇。
【關鍵詞】：細胞凋亡率 瓊脂糖凝膠電泳法 流式細胞術
【學位授予單位】：遼寧醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語表8-9
• 前言9-10
• 實驗材料與方法10-15
• 實驗結(jié)果15-23
• 討論23-28
• 結(jié)論28-29
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價29-30
• 參考文獻30-33
• 附錄33-46
• 一、文獻綜述33-43
• 參考文獻39-43
• 二、在校期間科研成績43-44
• 三、致謝44-45
• 四、個人簡介45-46

【共引文獻】

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  本文關鍵詞：細胞凋亡不同階段檢測凋亡率的最佳方法研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：316804