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低氧預(yù)處理hOM-MSCs移植治療PD模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-25 02:28
  目的:通過移植人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞(hOM-MSCs)治療帕金森病(PD)模型大鼠的實(shí)驗(yàn),了解hOM-MSCs移植后對(duì)大鼠行為學(xué)的影響及對(duì)移植后細(xì)胞的存活、分布及分化的研究,從而探討移植后hOM-MSCs對(duì)PD大鼠的療效及低氧預(yù)處理后的影響。方法:(1)PD大鼠造模通過立體定向儀注射6-羥基多巴胺(6-OHDA)至左側(cè)中腦海馬區(qū),篩選出造模成功大鼠30只,隨機(jī)分為三組,每組10只,即生理鹽水組、hOM-MSCs常氧組、hOM-MSCs低氧預(yù)處組;(2)hOM-MSCs傳至4代時(shí)選擇合適細(xì)胞密度轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白慢病毒載體(GFP-lentiviral vector),熒光顯微鏡檢測(cè)轉(zhuǎn)染及表達(dá)狀況;(3)旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)(Rotation Test)旋轉(zhuǎn)次數(shù)>6次/分,即為造模成功,并記錄10分鐘內(nèi)的圈數(shù);(4)在大鼠頭顱立體定向儀協(xié)助定位下微量注射器連接微量輸液泵將實(shí)驗(yàn)劑量轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白慢病毒載體的hOM-MSCs注射到損傷區(qū)(造模區(qū))對(duì)側(cè)對(duì)應(yīng)位置;(5)造模后第2天、移植后第1周,移植后第4周旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)評(píng)估行為學(xué),并記錄10分鐘的旋轉(zhuǎn)圈數(shù);(6)移植后第4周完成最后一次行為學(xué)評(píng)估后處死大... 

【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:55 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
引言
第1章 材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 主要試劑
    1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    1.4 手術(shù)器械及其他操作器械
    1.5 基礎(chǔ)試劑的配制
第2章 方法
    2.1 HOM-MSCS的培養(yǎng)、鑒定及移植前處理
    2.2 PD 大鼠造模
    2.3 PD模型大鼠評(píng)估及評(píng)分
    2.4 HOM-MSCS移植
    2.5 PD模型大鼠腦組織的組織學(xué)檢查
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 HOM-MSCS的鑒定
    3.2 PD模型成功的檢測(cè)
    3.3 HOM-MSCS標(biāo)記檢測(cè)、移植
    3.4 移植前后大鼠行為學(xué)觀察
    3.5 大鼠腦組織病理及免疫組織化學(xué)檢測(cè)
第4章 討論
    4.1 PD研究現(xiàn)狀
    4.2 低氧對(duì)MSCS的影響
    4.3 MSCS移植治療PD的相關(guān)作用機(jī)制
    4.4 MSCS治療PD研究
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
主要縮寫詞表
附錄
致謝



本文編號(hào):3158525

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