本文關(guān)鍵詞：MSC調(diào)控DCs對ARDS小鼠肺部炎癥反應(yīng)影響的研究

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【摘要】：目的：驗證MSC通過調(diào)控DCs減輕ARDS小鼠肺部炎癥反應(yīng)。方法：C57BL/6小鼠64只,隨機(jī)(隨機(jī)數(shù)字法)分為①對照組：小鼠氣道內(nèi)注射與LPS等體積的NS,30min后尾靜脈注射與MSC等體積的PBS;②ARDS組：小鼠氣道內(nèi)注射LPS 5mg/kg復(fù)制ARDS模型,30mmin后尾靜脈注射與MSC等體積的PBS;③MSC組：小鼠氣道內(nèi)注射LPS 5mg/kg復(fù)制ARDS模型,30mmin后尾靜脈注射MSC(100,000個細(xì)胞重懸于100 μl PBS); ④Creg組：小鼠氣道內(nèi)注射LPS 5mg/kg復(fù)制ARDS模型,30min后尾靜脈注射DCreg(100,000個細(xì)胞重懸于100 μl PBS)。 6h和24h后處死小鼠,留取肺、脾臟、血液檢測：(1)小鼠肺DCs的數(shù)量及成熟狀態(tài)檢測：流式細(xì)胞法(FCM)檢測肺單細(xì)胞懸液中DCs數(shù)量及DCs表達(dá)CD11c、CDllb、MHCⅡ和CD40的水平。(2)小鼠脾臟DCs的數(shù)量、成熟狀態(tài)及功能檢測：FCM檢測脾臟單細(xì)胞懸液中DCs數(shù)量及DCs表達(dá)CDllc、CD11b、MHCⅡ和CD40的水平;FITC-葡聚糖法檢測脾臟DCs的吞噬功能；混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)檢測脾臟DCs誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞增殖能力。(3)小鼠肺損傷程度檢測：HE染色行肺組織病理學(xué)檢查并行肺損傷評分評價肺損傷嚴(yán)重程度；計算肺濕重／體重比評價肺水腫程度；伊文思藍(lán)實驗評價肺血管內(nèi)皮通透性。(4)小鼠肺和全身炎癥反應(yīng)檢測：計算肺泡灌洗液中有核細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞計數(shù)評價炎癥細(xì)胞的浸潤程度；ELISA法檢測肺組織勻漿和血清中IL-4、IL-10、IL-17、IFN-γ、TGF-β的濃度評價肺部和全身炎癥反應(yīng)。結(jié)果：(1)MSC能夠抑制肺DCs的數(shù)量和成熟狀態(tài)：與ARDS組比較,MSC組肺DCs比例在6h后有下降趨勢(1.54±0.09)%,在24h后較ARDS組顯著下降(1.814±0.2)%(p0.05)；與ARDS組比較,MSC組肺DCs表達(dá)CDllc、CD11bMHCII和CD40水平在24h均顯著降低(p0.05)。(2)MSC能夠抑制脾臟DCs的數(shù)量、成熟狀態(tài)和免疫原性,增強(qiáng)脾臟DCs的吞噬能力：與ARDS組比較,MSC組脾臟DCs比例6h顯著下降(2.02+0.15)%(p0.05),24h脾臟DCs進(jìn)一步降至(1.29±0.07)%；與ARDS組比較,MSC組肺DCs表達(dá)CD11c、CD11b、MHCⅡ和CD40的水平在6h和24h均顯著降低(p0.05); ARDS組與MSC組脾臟DCs在6h的吞噬功能無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05),在24h點MSC組脾臟DCs的吞噬功能較ARDS組顯著增加(p0.05),誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞增殖的能力較ARDS組顯著下降(p0.05),該脾臟DCs符合DCreg特性,說明MSC能誘導(dǎo)脾臟DCreg的生成。(3) DCreg和MSC可降低LPS誘導(dǎo)的ARDS小鼠肺部和全身炎癥反應(yīng)：與ARDS組比較,DCreg和MSC在6h、24h均可顯著減輕BALF中有核細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù),同時能有效降低肺組織和血清促炎介質(zhì)IL-4. IL-17水平,并增加抗炎介質(zhì)IL-10、IFN-γ和TGF-β水平(p0.05)。(4) DCreg和MSC減輕LPS誘導(dǎo)的ARDS小鼠肺損傷：與ARDS組比較,DCreg和MSC在6h和24h均可顯著減輕肺病理損傷、降低肺損傷評分、減少肺濕重／體重比、降低肺微血管內(nèi)皮對伊文思藍(lán)的通透性(p0.05)。結(jié)論：MSC通過抑制DCs的數(shù)量和成熟狀態(tài)、同時誘導(dǎo)DCreg的生成減輕ARDS小鼠肺部炎癥反應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：間充質(zhì)干細(xì)胞 急性呼吸窘迫綜合征 樹突狀細(xì)胞 調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R563.8
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 縮略詞表10-12
• 前言12-17
• 參考文獻(xiàn)15-17
• 文獻(xiàn)綜述17-23
• 參考文獻(xiàn)21-23
• 主要實驗儀器與試劑23-26
• 引言26-27
• 實驗方法27-42
• 結(jié)果42-65
• 討論65-70
• 參考文獻(xiàn)70-73
• 結(jié)論73-74
• 已發(fā)表論文74-75
• 作者簡介75-76
• 致謝76

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本文編號：976372