本文關(guān)鍵詞：雷帕霉素治療小鼠百草枯中毒致肺纖維化的作用及機制研究

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【摘要】：研究背景：百草枯(paraquat, PQ)是一種被廣泛使用的除草劑。但是,對直接接觸的人類和動物來說,PQ是高度毒性的化合物,意外接觸或自殺口服后將導致極高的死亡率。PQ導致死亡的主要原因是肺纖維化,且現(xiàn)在仍無有效的治療方法。雷帕霉素(Rapamycin, RAPA)是mTOR (mammalian target of rapamycin)的抑制劑。RAPA在細胞內(nèi)與FK506(tacrolimus)結(jié)合蛋白相結(jié)合后形成復合物,此復合物再與mTOR結(jié)合后將抑制信號傳遞至下游效應分子,最終抑制細胞的生長和增殖�，F(xiàn)RAPA治療已廣泛運用于臨床,包括器官移植后的抗免疫排斥治療等。同時,RAPA的抗纖維化作用也日益受到重視。 目的：評估RAPA能否明顯抑制小鼠PQ中毒誘導的肺纖維化,并探討此抗纖維化作用的相關(guān)機制。 實驗方法：將C57BL/6J雄鼠分為對照組(生理鹽水,10ml/kg,腹腔注射)和實驗組(PQ,10mg/kg,腹腔注射)。實驗組根據(jù)處理不同,再分為以下四組：PQ組(PQ中毒后未治療)、PQ+RAPA組(PQ中毒后每日予RAPA1mg/kg灌胃治療)、PQ+MP組(PQ中毒后予一次甲強龍30mg/kg腹腔注射治療)和PQ+MP+RAPA組(PQ中毒后予一次甲強龍30mg/kg腹腔注射治療以及每日予RAPA1mg/kg灌胃治療)。每日觀察和記錄所有小鼠的體重和生存率變化。PQ中毒后14d時每組小鼠取3只處死,剩下的各組小鼠于28d時全部處死。用HE(hematoxylin-eosin)和Masson's染色觀察肺組織結(jié)構(gòu)變化。用ELISA試劑盒檢測肺組織中羥脯氨酸(Hydroxyproline, HYP)的含量。用免疫組化和免疫印跡的方法檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1),α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和上皮細胞鈣粘附蛋白(E-cadherin)的表達水平。 結(jié)果：PQ誘導肺纖維化的小鼠模型建立成功。小鼠肺組織染色結(jié)果顯示,RAPA治療能減輕肺纖維化的病理改變,包括肺泡結(jié)構(gòu)塌陷和肺間質(zhì)膠原沉積。ELISA實驗結(jié)果顯示,RAPA可降低PQ中毒小鼠肺組織中HYP的含量,且此作用在RAPA治療28d后更為顯著。免疫組化和免疫印跡實驗結(jié)果顯示,RAPA能明顯下調(diào)肺組織中TGF-β1和α-SMA的表達,但不能明顯提高E-cadherin蛋白水平的表達。同時,僅用RAPA治療無法明顯增加中毒小鼠的生存率和體重。甲強龍治療可增加小鼠生存率,但在減輕PQ誘導的肺纖維化及下調(diào)TGF-β1和α-SMA的表達方面無明顯作用。 結(jié)論：本研究結(jié)果顯示,RAPA治療可通過下調(diào)TGF-β1和α-SMA的表達,有效抑制PQ誘導的肺纖維化,如肺泡塌陷和膠原沉積等。因此,RAPA在治療PQ誘導的肺纖維化中有重要價值。
【關(guān)鍵詞】：百草枯 肺纖維化 雷帕霉素 甲強龍 轉(zhuǎn)化生長因子-β1 小鼠
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R595.4;R563
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略對照詞表9-10
• 目錄10-11
• 1 背景介紹11-13
• 2 實驗目的13-14
• 3 實驗方法和材料14-20
• 4 實驗結(jié)果20-28
• 5 討論28-31
• 6 結(jié)論31-32
• 7 參考文獻32-37
• 綜述37-58
• 參考文獻50-58
• 作者簡介58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張曉東;項濤;;賴諾普利對百草枯中毒肺纖維化的作用[J];臨床肺科雜志;2008年07期

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本文編號：929308