本文關(guān)鍵詞：黑火藥煙霧致大鼠吸入性肺損傷及烏司他丁的干預(yù)作用

  更多相關(guān)文章： 黑火藥 煙霧吸入損傷 動(dòng)物模型 烏司他丁 白細(xì)胞介素-1β 腫瘤壞死因子-α

【摘要】：目的：1、建立黑火藥煙霧動(dòng)物吸入性損傷實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。2、構(gòu)建黑火藥煙霧所致吸入性肺損傷大鼠模型并對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)。3、探討烏司他丁(Ulinastatin, UTI)對(duì)黑火藥煙霧所致大鼠吸入性肺損傷的干預(yù)作用。 方法：1、制作黑火藥煙霧動(dòng)物吸入性損傷實(shí)驗(yàn)裝置,分析煙霧成分并研究煙霧劑量及吸入時(shí)間與大鼠死亡率的關(guān)系。2、將42只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(C組)和煙霧吸入后1h、2h、6h、24h、48h、96h組(I-1h、1-2h、 I-6h、I-24h、I-48h、I-96h組),每組6只。除C組外,其余各組大鼠暴露于10g火藥產(chǎn)生的煙霧中8min。各組大鼠于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死后,檢測(cè)其動(dòng)脈血?dú)狻⒛δ艿淖兓?測(cè)定肺濕重／干重比(Wet to dry weight ratio, W/D)、支氣管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中白細(xì)胞計(jì)數(shù)(White blood cells, WBC)、蛋白含量以及血清髓過(guò)氧化物酶(Myeloperoxidase, MPO)活性,并進(jìn)行肺組織大體觀及病理學(xué)觀察。3、將30只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(C組)、吸入組(Ⅰ組)、UTI100000U/(kg·d)組(UH組)、UTI50000U/(kg·d)組(UM組)、UTI20000U/(kg·d)組(UL組),每組6只。除C組外,其余各組大鼠暴露于10g火藥產(chǎn)生的煙霧中8min。大鼠于煙霧吸入40h后檢測(cè)動(dòng)脈血?dú)�、W/D、BALF中WBC計(jì)數(shù)和蛋白含量、血清和肺組織MPO活性、肺組織丙二醛(Malondialdehyde, MDA)含量,并觀察肺組織的大體觀及病理學(xué)改變。采用反轉(zhuǎn)錄熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction, PCR)檢測(cè)肺組織Toll樣受體-4(Toll-like receptor4, TLR-4)、白細(xì)胞介素-1β (Interleukin-1β, IL-1β)、腫瘤壞死因子-α (Tumor necrosis factor-α, TNF-α)信使核糖核酸(Messenger ribonucleic acid, mRNA)的表達(dá)。 結(jié)果：1、裝置中火藥煙霧成分主要為CO2和CO,且12min內(nèi)濃度穩(wěn)定；隨火藥劑量增加,煙霧暴露時(shí)間延長(zhǎng),大鼠死亡率升高。2、大鼠吸入煙霧后表現(xiàn)為低氧血癥,碳氧血紅蛋白(Carboxyhemoglobin, COHb)于吸入后1h達(dá)峰值(P0.05),凝血功能未見(jiàn)異常(P0.05),W/D于吸入2h達(dá)峰值(P0.05),吸入后24h內(nèi)BALF中WBC呈進(jìn)行性增加(P0.05),蛋白含量顯著增高(P0.05),吸入48h內(nèi)大鼠血清MPO活性增加(P0.05)。病理觀察可見(jiàn)吸入組大鼠肺組織出血、水腫及炎性細(xì)胞浸潤(rùn),呈急性肺損傷表現(xiàn),至吸入后96h仍未恢復(fù)。3.UH、UM、UL組的血液氧氣分壓(Partial pressure of oxygen, PaO2)高于Ⅰ組(P0.05), W/D、BALF中WBC計(jì)數(shù)低于Ⅰ組(P0.05),UM、UL組BALF中蛋白含量低于Ⅰ組(P0.05),三組PaO2、血液二氧化碳分壓(Partial pressure of carbon dioxide, PaCO2)、 W/D、BALF中蛋白含量與C組比較均無(wú)顯著差異(P0.05)。UH組血清、肺組織MPO活性及肺組織MDA含量均低于Ⅰ組(P0.05),與C組比較無(wú)顯著差異(P0.05)。UH組TNF-α mRNA表達(dá)低于Ⅰ組(P0.05), UH、UM、UL組IL-1β mRNA表達(dá)低于Ⅰ組(P0.05),與C組比較無(wú)顯著差異(P0.05),各組間TLR-4mRNA表達(dá)水平比較均無(wú)顯著差異(P0.05)。病理觀察可見(jiàn)UTI用藥組大鼠肺泡腔滲出及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度均較Ⅰ組減輕。 結(jié)論：1、建立了黑火藥煙霧動(dòng)物吸入性損傷實(shí)驗(yàn)平臺(tái),且此裝置制作簡(jiǎn)單、造價(jià)低廉、操作簡(jiǎn)便。2、通過(guò)黑火藥煙霧暴露可建立大鼠吸入性肺損傷模型,且具有易復(fù)制、穩(wěn)定、可靠的優(yōu)點(diǎn)。3、UTI可通過(guò)降低MPO活性、IL-1β及TNF-α mRNA表達(dá)、MDA水平對(duì)黑火藥煙霧所致大鼠肺損傷發(fā)揮抗炎、抗氧化的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：黑火藥 煙霧吸入損傷 動(dòng)物模型 烏司他丁 白細(xì)胞介素-1β 腫瘤壞死因子-α
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R563.8
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 目錄8-10
• 符號(hào)說(shuō)明10-11
• 第一部分 黑火藥煙霧動(dòng)物吸入性損傷實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的構(gòu)建11-21
• 1 前言11-12
• 2 材料和方法12-16
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-13
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12
• 2.1.2 主要設(shè)備12
• 2.1.3 主要試劑12-13
• 2.1.4 主要試劑配制13
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-16
• 2.2.1 火藥煙霧發(fā)生裝置13-15
• 2.2.2 煙霧吸入致大鼠死亡的研究15-16
• 2.2.3 煙霧氣體成分檢測(cè)及溫度監(jiān)控16
• 2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理16
• 3 結(jié)果16-18
• 3.1 煙霧吸入致大鼠死亡的研究16-17
• 3.1.1 火藥劑量與死亡率的關(guān)系16-17
• 3.1.2 暴露時(shí)間與死亡率的關(guān)系17
• 3.2 煙霧氣體成分及溫度檢測(cè)結(jié)果17-18
• 4 討論18-19
• 5 結(jié)論19-20
• 參考文獻(xiàn)20-21
• 第二部分 黑火藥煙霧致大鼠吸入性肺損傷模型的建立21-32
• 1 前言21-22
• 2 材料和方法22-25
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料22-24
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物22
• 2.1.2 主要設(shè)備22
• 2.1.3 主要試劑與耗材22-23
• 2.1.4 主要試劑配制23-24
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法24-25
• 2.2.1 動(dòng)物分組24
• 2.2.2 煙熏暴露后表現(xiàn)24
• 2.2.3 標(biāo)本采集24-25
• 2.2.4 動(dòng)脈血?dú)饧澳δ軝z測(cè)25
• 2.2.5 W/D比25
• 2.2.6 BALF中的WBC計(jì)數(shù)及蛋白含量測(cè)定25
• 2.2.7 血清MPO活性測(cè)定25
• 2.2.8 肺組織病理學(xué)檢查25
• 2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理25
• 3 結(jié)果25-29
• 3.1 煙霧吸入后大鼠表現(xiàn)25-26
• 3.2 動(dòng)脈血?dú)馀c凝血功能26-27
• 3.3 W/D、BALF中WBC計(jì)數(shù)、蛋白含量及血清MPO活性測(cè)定27-28
• 3.4 肺組織病理學(xué)檢查28-29
• 4 討論29-30
• 5 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-32
• 第三部分 烏司他丁對(duì)黑火藥煙霧致吸入性肺損傷大鼠的干預(yù)作用32-48
• 1 前言32-33
• 2 材料和方法33-39
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料33-36
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物33
• 2.1.2 主要設(shè)備33-34
• 2.1.3 主要試劑與耗材34-35
• 2.1.4 主要試劑配制35-36
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法36-39
• 2.2.1 動(dòng)物分組及模型制備36
• 2.2.2 給藥方案36
• 2.2.3 標(biāo)本采集36
• 2.2.4 動(dòng)脈血?dú)饧癢/D測(cè)定36-37
• 2.2.5 BALF中WBC計(jì)數(shù)及蛋白含量測(cè)定37
• 2.2.6 血清MPO活性及肺組織MPO、MDA含量測(cè)定37
• 2.2.7 TLR-4、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)檢測(cè)37-38
• 2.2.8 肺組織病理學(xué)檢查38
• 2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理38-39
• 3 結(jié)果39-42
• 3.1 動(dòng)脈血?dú)?/span>39
• 3.2 W/D及BALF中WBC計(jì)數(shù)、蛋白含量測(cè)定39-40
• 3.3 血清MPO活性及肺組織MPO、MDA含量測(cè)定40-41
• 3.4 肺組織TLR-4、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)檢測(cè)41
• 3.5 肺組織病理學(xué)檢查41-42
• 4 討論42-45
• 5 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-48
• 綜述48-60
• 參考文獻(xiàn)55-60
• 攻讀學(xué)位期間主要的研究成果目錄60-61
• 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：894858