發(fā)布時間：2017-09-15 10:03

  本文關(guān)鍵詞：嗜酸粒細(xì)胞增多性哮喘小鼠NK細(xì)胞亞群的動態(tài)分析及不同亞型哮喘小鼠模型的建立

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【摘要】：目的：NK細(xì)胞在哮喘中的角色并不清楚。根據(jù)細(xì)胞表面CD11b和CD27分子,NK細(xì)胞可以分成不同亞群,這些細(xì)胞亞群在哮喘中的表型變化也未曾報道。另外,近年來臨床上根據(jù)哮喘患者痰液中不同炎性細(xì)胞類型將哮喘分為不同亞型,而在建立相應(yīng)哮喘動物模型方面尚有許多不足之處。本文旨在：1.通過觀察小鼠肺組織中NK細(xì)胞亞群在嗜酸粒細(xì)胞增多性哮喘發(fā)生過程中的動態(tài)變化,同時檢測哮喘發(fā)生后NK細(xì)胞的活性及分泌細(xì)胞因子水平,推測NK細(xì)胞在嗜酸粒細(xì)胞增多性哮喘中可能發(fā)揮的角色。2.通過建立不同類型哮喘的小鼠模型來模擬臨床不同亞型的哮喘患者,從而為深入研究哮喘的發(fā)病機(jī)制提供幫助。 方法：利用卵清蛋白(OVA)誘導(dǎo)建立嗜酸粒細(xì)胞增多性小鼠哮喘模型,并在此基礎(chǔ)上于不同時間點(diǎn),使用不同劑量的LPS誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞增多性以及混合粒細(xì)胞增多性小鼠哮喘模型；瑞氏-姬姆薩染色后于顯微鏡下觀察并計數(shù)肺泡灌洗液(BALF)中不同細(xì)胞的數(shù)量；HE染色檢測肺組織炎癥程度；糖原(PAS)染色檢測支氣管杯狀細(xì)胞分泌粘膜情況；ELISA技術(shù)檢測BALF中Thl、Th2和Th17細(xì)胞因子以及血清中IgE和OVA-IgE水平；流式細(xì)胞術(shù)(FACS)檢測NK細(xì)胞的比例、活性以及分泌細(xì)胞因子水平。地塞米松干預(yù)后觀察以上指標(biāo)變化。 結(jié)果：1.小鼠嗜酸粒細(xì)胞增多性哮喘發(fā)生過程中,肺組織中NK細(xì)胞占淋巴細(xì)胞的比例下降,其中CD11blowCD27lowNK細(xì)胞和CD11blowCD27highNK細(xì)胞所占比例上升,而CD11bhighCD27highNK細(xì)胞和CD11bhighCD27lowNK細(xì)胞比例下降。哮喘發(fā)生后,NK細(xì)胞數(shù)量增多、活性增強(qiáng),且能夠同時產(chǎn)生Thl和Th2細(xì)胞因子。盡管不同的NK細(xì)胞亞群都會分泌Thl和Th2細(xì)胞因子,但以CD11blowCD27lowNK細(xì)胞分泌為主。2.嗜酸粒細(xì)胞增多性哮喘模型組小鼠BALF中嗜酸粒細(xì)胞比例、數(shù)量增多,Th2細(xì)胞因子水平升高；中性粒細(xì)胞增多性哮喘模型組小鼠BALF中中性粒細(xì)胞比例、數(shù)量增多,Thl和Th17細(xì)胞因子表達(dá)升高；混合粒細(xì)胞增多性哮喘模型組小鼠BALF中嗜酸粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞比例和數(shù)量都增多,Th1、Th2和Th17表達(dá)水平也都升高。各哮喘模型組小鼠都有不同程度的肺組織炎性細(xì)胞浸潤和支氣管粘液分泌,血清中IgE和OVA-IgE表達(dá)水平也有不同程度升高。用地塞米松干預(yù)后,各哮喘模型組小鼠BALF中的細(xì)胞比例、數(shù)量以及細(xì)胞因子表達(dá)水平的變化,肺組織炎癥程度和支氣管粘液分泌程度的變化,血清中IgE和OVA-IgE表達(dá)水平的變化,都證實(shí)該藥物對嗜酸粒細(xì)胞增多性哮喘模型組小鼠具有良好的治療效果,而對中性粒細(xì)胞增多性和混合粒細(xì)胞增多性哮喘模型組小鼠的治療效果不理想。 結(jié)論： 1.在嗜酸粒細(xì)胞增多性哮喘發(fā)生過程中,盡管NK細(xì)胞并不是參與哮喘的主要淋巴細(xì)胞,但數(shù)量增多、活性升高,分泌更多細(xì)胞因子從而可能參與了哮喘疾病的發(fā)生。 2. CD11blowCD27lowNK可能是NK細(xì)胞參與哮喘的主要細(xì)胞亞群。 3.我們所建立的不同類型的小鼠哮喘模型,能夠很好地反映出臨床相對應(yīng)的亞型哮喘患者的病理特征,從而為進(jìn)一步研究不同亞型哮喘的發(fā)病機(jī)制并提出更具針對性的治療方案打下基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：哮喘 固有免疫 NK細(xì)胞 嗜酸粒細(xì)胞增多性哮喘 中性粒細(xì)胞增多性哮喘 混合粒細(xì)胞增多性哮喘 地塞米松
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 中英文縮略詞5-7
• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 第一部分 嗜酸粒細(xì)胞X椂嘈韻∈驨K細(xì)胞亞群的動態(tài)分析12-48
• 前言12-14
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法14-23
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 2. 實(shí)驗(yàn)裝置15-16
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法16-23
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-35
• 討論35-41
• 參考文獻(xiàn)41-48
• 第二部分 不同亞型哮喘小鼠模型的建立48-86
• 前言48-51
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法51-59
• 1 實(shí)驗(yàn)材料51
• 2 實(shí)驗(yàn)裝置51-52
• 3 實(shí)驗(yàn)方法52-59
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果59-69
• 討論69-74
• 參考文獻(xiàn)74-86
• 綜述86-106
• 參考文獻(xiàn)95-106
• 致謝106

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：855863