本文關鍵詞：嗜酸粒細胞增多性哮喘小鼠NK細胞亞群的動態(tài)分析及不同亞型哮喘小鼠模型的建立

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【摘要】：目的：NK細胞在哮喘中的角色并不清楚。根據(jù)細胞表面CD11b和CD27分子,NK細胞可以分成不同亞群,這些細胞亞群在哮喘中的表型變化也未曾報道。另外,近年來臨床上根據(jù)哮喘患者痰液中不同炎性細胞類型將哮喘分為不同亞型,而在建立相應哮喘動物模型方面尚有許多不足之處。本文旨在：1.通過觀察小鼠肺組織中NK細胞亞群在嗜酸粒細胞增多性哮喘發(fā)生過程中的動態(tài)變化,同時檢測哮喘發(fā)生后NK細胞的活性及分泌細胞因子水平,推測NK細胞在嗜酸粒細胞增多性哮喘中可能發(fā)揮的角色。2.通過建立不同類型哮喘的小鼠模型來模擬臨床不同亞型的哮喘患者,從而為深入研究哮喘的發(fā)病機制提供幫助。 方法：利用卵清蛋白(OVA)誘導建立嗜酸粒細胞增多性小鼠哮喘模型,并在此基礎上于不同時間點,使用不同劑量的LPS誘導中性粒細胞增多性以及混合粒細胞增多性小鼠哮喘模型；瑞氏-姬姆薩染色后于顯微鏡下觀察并計數(shù)肺泡灌洗液(BALF)中不同細胞的數(shù)量；HE染色檢測肺組織炎癥程度；糖原(PAS)染色檢測支氣管杯狀細胞分泌粘膜情況；ELISA技術檢測BALF中Thl、Th2和Th17細胞因子以及血清中IgE和OVA-IgE水平；流式細胞術(FACS)檢測NK細胞的比例、活性以及分泌細胞因子水平。地塞米松干預后觀察以上指標變化。 結果：1.小鼠嗜酸粒細胞增多性哮喘發(fā)生過程中,肺組織中NK細胞占淋巴細胞的比例下降,其中CD11blowCD27lowNK細胞和CD11blowCD27highNK細胞所占比例上升,而CD11bhighCD27highNK細胞和CD11bhighCD27lowNK細胞比例下降。哮喘發(fā)生后,NK細胞數(shù)量增多、活性增強,且能夠同時產(chǎn)生Thl和Th2細胞因子。盡管不同的NK細胞亞群都會分泌Thl和Th2細胞因子,但以CD11blowCD27lowNK細胞分泌為主。2.嗜酸粒細胞增多性哮喘模型組小鼠BALF中嗜酸粒細胞比例、數(shù)量增多,Th2細胞因子水平升高；中性粒細胞增多性哮喘模型組小鼠BALF中中性粒細胞比例、數(shù)量增多,Thl和Th17細胞因子表達升高；混合粒細胞增多性哮喘模型組小鼠BALF中嗜酸粒細胞和中性粒細胞比例和數(shù)量都增多,Th1、Th2和Th17表達水平也都升高。各哮喘模型組小鼠都有不同程度的肺組織炎性細胞浸潤和支氣管粘液分泌,血清中IgE和OVA-IgE表達水平也有不同程度升高。用地塞米松干預后,各哮喘模型組小鼠BALF中的細胞比例、數(shù)量以及細胞因子表達水平的變化,肺組織炎癥程度和支氣管粘液分泌程度的變化,血清中IgE和OVA-IgE表達水平的變化,都證實該藥物對嗜酸粒細胞增多性哮喘模型組小鼠具有良好的治療效果,而對中性粒細胞增多性和混合粒細胞增多性哮喘模型組小鼠的治療效果不理想。 結論： 1.在嗜酸粒細胞增多性哮喘發(fā)生過程中,盡管NK細胞并不是參與哮喘的主要淋巴細胞,但數(shù)量增多、活性升高,分泌更多細胞因子從而可能參與了哮喘疾病的發(fā)生。 2. CD11blowCD27lowNK可能是NK細胞參與哮喘的主要細胞亞群。 3.我們所建立的不同類型的小鼠哮喘模型,能夠很好地反映出臨床相對應的亞型哮喘患者的病理特征,從而為進一步研究不同亞型哮喘的發(fā)病機制并提出更具針對性的治療方案打下基礎。
【關鍵詞】：哮喘 固有免疫 NK細胞 嗜酸粒細胞增多性哮喘 中性粒細胞增多性哮喘 混合粒細胞增多性哮喘 地塞米松
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 中英文縮略詞5-7
• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 第一部分 嗜酸粒細胞X椂嘈韻∈驨K細胞亞群的動態(tài)分析12-48
• 前言12-14
• 實驗材料與方法14-23
• 1. 實驗材料14-15
• 2. 實驗裝置15-16
• 3. 實驗方法16-23
• 實驗結果23-35
• 討論35-41
• 參考文獻41-48
• 第二部分 不同亞型哮喘小鼠模型的建立48-86
• 前言48-51
• 實驗材料與方法51-59
• 1 實驗材料51
• 2 實驗裝置51-52
• 3 實驗方法52-59
• 實驗結果59-69
• 討論69-74
• 參考文獻74-86
• 綜述86-106
• 參考文獻95-106
• 致謝106

【共引文獻】

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1 胡斯明;羅雅玲;賴文巖;陳培芬;;地塞米松對哮喘小鼠Th17細胞因子IL-17表達的影響[J];南方醫(yī)科大學學報;2009年06期

2 卞芳芳;王軍;路明;武怡;;RORγt在支氣管哮喘小鼠肺組織中的表達及布地奈德對其抑制作用[J];中國當代兒科雜志;2012年08期

3 董慧;張曉斌;;樹突細胞靶向系統(tǒng)研究進展[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2013年19期

4 劉艷麗;林榮軍;;支氣管哮喘患兒血清IL-17、ECP及IgE的水平測定及臨床意義[J];中國兒童保健雜志;2013年10期

5 程遠;陳德暉;鄭佩燕;;廣州地區(qū)5歲以下兒童哮喘血清過敏原特點及臨床意義[J];中國兒童保健雜志;2013年10期

6 徐玉蘭;;舟山海島哮喘兒童血清過敏原檢測分析[J];中國兒童保健雜志;2013年10期

7 黃麗斌;石磊;楊衛(wèi)兵;;非小細胞肺癌抗腫瘤免疫應答與免疫逃逸相關研究[J];貴州醫(yī)藥;2014年02期

8 李健;劉大鷹;;微生態(tài)制劑在呼吸和危重癥疾病中的應用進展[J];重慶醫(yī)學;2014年06期

9 劉艷麗;林榮軍;肖翠林;;支氣管哮喘病兒血清IL-17、IgE與EOS計數(shù)變化及意義[J];青島大學醫(yī)學院學報;2014年02期

10 邱艷;趙凌杰;;白介素33在類風濕關節(jié)炎中的研究進展[J];安徽醫(yī)藥;2014年07期

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本文編號：855863