本文關(guān)鍵詞：谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶mu5對腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)人支氣管上皮細(xì)胞氧化損傷的調(diào)節(jié)作用研究

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【摘要】：目的建立腫瘤壞死因子α(TNF-α)誘導(dǎo)支氣管上皮(16HBE)細(xì)胞炎癥模型,探討谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶mu5(GSTM5)在炎癥誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷中的作用。方法以TNF-α(10 ng/m L)刺激16HBE細(xì)胞,運(yùn)用真核細(xì)胞表達(dá)載體技術(shù),增強(qiáng)GSTM5基因表達(dá),比色法檢測細(xì)胞內(nèi)丙二醛(MDA)及總抗氧化能力(T-AOC);MTT法檢測細(xì)胞存活率;RT-PCR法檢測NADPH氧化酶(NOX)家族NOX1、NOX2、NOX3、NOX4、NOX5、雙重氧化酶1(DUOX1)、DUOX2相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平;蛋白質(zhì)印跡法檢測NOX1和NOX2蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 TNF-α刺激16HBE細(xì)胞后,細(xì)胞內(nèi)MDA水平增高,T-AOC能力減低,細(xì)胞存活率明顯降低。預(yù)轉(zhuǎn)染GSTM5質(zhì)�？捎行Ы档蚑NF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)MDA的增高(P0.05),顯著增強(qiáng)T-AOC能力(P0.05),同時增加16HBE細(xì)胞存活率(P0.05)。GSTM5質(zhì)粒組NOX1、NOX2基因轉(zhuǎn)錄強(qiáng)度以及蛋白表達(dá)水平與TNF-α組及陰性對照組相比顯著降低(P均0.05),而NOX3、NOX4、NOX5、DUOX1、DUOX2基因表達(dá)強(qiáng)度比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。結(jié)論增強(qiáng)GSTM5表達(dá)對炎癥誘發(fā)的人支氣管上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷有保護(hù)性調(diào)節(jié)作用,其機(jī)制與下調(diào)NOX1、NOX2基因表達(dá)密切相關(guān)。
【作者單位】： 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院呼吸內(nèi)科;廣州醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院;廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院MICU科;
【關(guān)鍵詞】： 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶mu 真核細(xì)胞表達(dá)載體 氧化應(yīng)激 炎癥
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號:81370173);國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金(編號:81200002) 廣東省老年感染與器官功能支持重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣州市老年感染與臟器功能支持重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室資金支持
【分類號】：R563.8
【正文快照】： 急性肺損傷(ALI)的本質(zhì)是肺內(nèi)過度失控的炎癥反應(yīng)[1-2]。過度炎癥反應(yīng)引發(fā)氧化應(yīng)激狀態(tài)[3],誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)源性活性氧(ROS)的生成量劇增,超過機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的清除能力時,使機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài),直接導(dǎo)致肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞損傷[4-5],并且與炎癥損傷協(xié)同加重病情[6]。因此,下調(diào)炎癥激活的，

本文編號：828900