本文關(guān)鍵詞：小窩蛋白1對氣道上皮細(xì)胞黏液高分泌的影響

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【摘要】：目的:探討小窩蛋白1(Cav-1)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的氣道黏液高分泌的影響。方法:體外培養(yǎng)人氣道上皮細(xì)胞(16HBE),用LPS刺激細(xì)胞構(gòu)建黏液高分泌模型,以Toll樣受體4(TLR4)抑制劑E5564、核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)抑制劑PDTC、轉(zhuǎn)染Cav-1質(zhì)粒和siRNA為干預(yù)因素,將細(xì)胞隨機分為對照組、LPS刺激組、LPS+Cav-1質(zhì)粒組、LPS+Cav-1 siRNA組、LPS+陰性siRNA組、LPS+空質(zhì)粒組、LPS+E5564組及LPS+PDTC組。四甲基偶氮唑鹽法(MTT)檢測各組細(xì)胞的活力;RT-PCR檢測黏蛋白(MUC)5AC的轉(zhuǎn)錄水平;Western blot檢測Cav-1、TLR4、磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白的相對含量;ELISA檢測MUC5AC的分泌水平;激光共聚焦技術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)MUC5AC蛋白的分布和含量。結(jié)果:LPS刺激組細(xì)胞內(nèi)TLR4、p-IκBα、NF-κB、MUC5AC轉(zhuǎn)錄及蛋白水平顯著高于對照組(P值均0.05),過表達(dá)Cav-1可進(jìn)一步增加上述指標(biāo)的表達(dá)量,而下調(diào)Cav-1及給予E5564、PDTC可以抑制LPS引起的上述效應(yīng)(P0.05)。結(jié)論:Cav-1可通過上調(diào)TLR4/NF-κB信號通路而加重LPS誘導(dǎo)的MUC5AC的表達(dá)量。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科;海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 小窩蛋白 Toll樣受體 核轉(zhuǎn)錄因子-κB 黏蛋白AC
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81370111,31171346)資助項目
【分類號】：R56
【正文快照】： 氣道黏液高分泌是目前呼吸系疾病函待解決的主要問題之一,這種病理性黏液形成的主要原因是黏蛋白(Mucin,MUC)的過量表達(dá),尤其是病理表型MUC5AC。近年來,對氣道MUC5AC病理性表達(dá)機 制有了深入的研究,同時肯定了多種刺激因素在MUC5AC高表達(dá)中的重要作用,如中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶

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本文編號：699078