塵螨促進DCs TIM4的表達以及誘導Th2細胞分化的研究
發(fā)布時間:2017-08-17 21:20
本文關鍵詞:塵螨促進DCs TIM4的表達以及誘導Th2細胞分化的研究
更多相關文章: 樹突狀細胞 T細胞免疫球蛋白域和粘液素樣域-4 Th2細胞 特應性疾病
【摘要】:目的: 體外研究塵螨(House dust mite,HDM)是否通過誘導小鼠骨髓來源成熟樹突狀細胞(mature Dendritic cells,mDCs)T細胞免疫球蛋白域和粘液素樣域-4(TIM4)的表達,進而促進初始T細胞分化為Th2細胞。 方法: 1.分離、培養(yǎng)小鼠骨髓來源的mDCs,顯微鏡下觀察其生長、變化,流式細胞儀測定細胞表面分子CD11C、CD80、MHC-II、CD86對細胞進行鑒定; 2.培養(yǎng)的mDCs分為四組:空白對照組(0U/ml HDM)\100U/ml HDM刺激組、200U/ml HDM刺激組、400U/ml HDM刺激組,DCs與不同濃度HDM共同培養(yǎng)48h,收集HDM刺激后的DCs,分別用流式細胞儀、Western Blotting檢測各組中TIM4的表達; 3.將空白對照組、400U/ml HDM刺激組的DCs與小鼠初始T淋巴細胞共同培養(yǎng)48h,ELISA法測定混合培養(yǎng)細胞上清液中細胞因子IL-4及IFN-γ的表達,說明HDM對Th2細胞分化的影響。 結果: 1.收集培養(yǎng)第10天的DCs,流式細胞儀測定CD11C、CD80、MHC-II、CD86分子表達率分別為(95.18±1.20)%、(85.07±2.05)%、(90.85±1.24)%、(70.78±1.57)%。提示所培養(yǎng)的細胞為mDCs; 2.不同濃度HDM刺激DCs48h后,分別用流式細胞儀和Western Blotting測定TIM4的表達。流式細胞儀測定不同組TIM4+細胞百分比分別為:(5.01±3.02)%、(12.78±1.57)%、(24.17±2.45)%、(55.85±2.24)%,與空白對照組相比,HDM刺激組TIM4表達水平均升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Western Blotting結果同樣說明兩組間差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05); 3.ELISA法檢測經(jīng)不同濃度HDM刺激后DCs與初始T細胞混合培養(yǎng)上清液中IL-4及IFN-γ的表達水平,空白對照組、4OOU/ml HDM組IL-4水平分別為(2.52±2.80)pg/ml、(43.10±5.20)pg/ml, IFN-y水平分別為(90.37±3.74)pg/ml、(38.74±3.67)pg/ml。結果顯示經(jīng)HDM作用后IL-4表達明顯升高(P0.05),而IFN-γ表達降低(P0.05),差異具有統(tǒng)計學意義。結論: 小鼠骨髓來源的mDCs經(jīng)HDM刺激后TIM4表達水平升高,且呈一定的劑量依賴性,TIM4+DCs可促使初始T細胞活化并分化為Th2細胞。
【關鍵詞】:樹突狀細胞 T細胞免疫球蛋白域和粘液素樣域-4 Th2細胞 特應性疾病
【學位授予單位】:山西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R765.21;R562.25
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- Abstract7-9
- 英文縮略詞表9-10
- 前言10-12
- 材料12-14
- 方法14-19
- 結果19-23
- 討論23-25
- 參考文獻25-28
- 綜述28-37
- 參考文獻33-37
- 個人簡歷37-38
- 致謝38
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
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,本文編號:691170
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