本文關(guān)鍵詞：IL-33在粉塵螨Ⅰ類變應(yīng)原誘發(fā)的過敏性哮喘中的作用研究

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【摘要】：目的:研究IL-33在粉塵螨I類變應(yīng)原Der f1誘發(fā)的過敏性哮喘中的作用。方法:1.大劑量表達(dá)并純化粉塵螨I類變應(yīng)原Der f1蛋白。2.制備Der f1誘發(fā)的哮喘小鼠模型:將40只SPF級BALB/c雌性小鼠隨機(jī)分為哮喘組、PBS組、免疫治療組和抑制劑組四組,每組10只。除PBS組外,其余三組分別在第0、7、14天經(jīng)小鼠腹腔注射致敏液,同時給予抑制組小鼠腹腔注嘌呤抑制劑PPADS。第21天起,除PBS組外,其余三組分別霧化吸入上述致敏液,PBS組則用PBS液霧化吸入,每天霧化30min,1次/天,連續(xù)7天。PBS組小鼠用PBS腹腔注射和滴鼻激發(fā)。在完成最后一次霧化24小時后處死小鼠,集取每組小鼠的支氣管肺泡灌洗液(BALF)和血清,并計數(shù)BALF中嗜酸性粒細(xì)胞(EOS),取小鼠肺組織制作病理切片。ELISA檢測BALF中IL-5、IL-13、IFN-γ和IL-33的含量及血清中特異性IgE和IgG2a水平。用Western-blot法檢測肺組織中IL-33蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果:SDS-PAGE和Western bloting說明了Der f1蛋白表達(dá)純化成功;肺組織病理切片鏡檢說明,免疫治療組和抑制劑組小鼠均比哮喘組炎癥明顯好轉(zhuǎn),炎癥細(xì)胞浸潤減少。小鼠BALF中EOS結(jié)果為抑制劑組和免疫治療組嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)明顯低于哮喘組(P0.01)。BALF中IL-5、IL-13及IL-33細(xì)胞因子含量免疫治療組和抑制劑組明顯低于哮喘組(P0.01),而IFN-γ的變化則相反,免疫治療組明顯比于哮喘組高(P0.01)。血清中特異性IgE含量結(jié)果為免疫治療組和抑制劑組明顯要比哮喘組低(P0.01),IgG2a變化與IgE變化正好相反,免疫治療組明顯高于哮喘組(P0.01)。哮喘組小鼠肺組織中IL-33蛋白的表達(dá)情況明顯高于其他組。結(jié)論:成功表達(dá)純化Der f 1蛋白;IL-33在Der f1誘發(fā)的過敏性哮喘中可能發(fā)揮著重要的作用。
【關(guān)鍵詞】：粉塵螨 Der f1蛋白 過敏性哮喘 IL-33
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-9
• 摘要9-11
• Abstract11-13
• 前言13-14
• 第一部分 粉塵螨Ⅰ類變應(yīng)原Der f1蛋白表達(dá)和純化14-29
• 1.研究內(nèi)容14-15
• 2.材料與方法15-25
• 2.1 材料與試劑15-21
• 2.2 實驗方法21-25
• 3.結(jié)果25-28
• 3.1 Der f1蛋白表達(dá)與純化25-26
• 3.2 免疫印跡實驗鑒定Western blotting26-28
• 4.討論28-29
• 第二部分 IL-33在粉塵螨Ⅰ類變應(yīng)原誘發(fā)的過敏性哮喘中的作用研究29-40
• 1.研究內(nèi)容29
• 2.材料與方法29-33
• 2.1 材料與試劑29-31
• 2.2 實驗方法31-33
• 3.結(jié)果33-38
• 3.1 各組小鼠癥狀和體征的改變33-34
• 3.2 BALF中EOS分類計數(shù)分析34
• 3.3 BALF中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-5、IL-13和IL-33的變化34-35
• 3.4 肺組織病理結(jié)果35-36
• 3.5 血清變應(yīng)原特異性IgE、IgG2a的水平變化36-37
• 3.6 肺組織中IL-33蛋白表達(dá)分析37-38
• 4.討論38-40
• 結(jié)論40-41
• 創(chuàng)新點41-42
• 參考文獻(xiàn)42-49
• 綜述 塵螨與過敏性哮喘49-57
• 參考文獻(xiàn)53-57
• 作者簡介及讀研期間主要科研成果57-58
• 致謝58

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：613082